目的 通過突變整合于宿主細胞中的人乳頭瘤病毒（human papillomavirus, HPV）16型的E6、E7致癌基因,探索預防和治療宮頸癌的新方法。方法 以SiHa細胞系為研究對象,設計靶向其內(nèi)整合的HPV16E6和E7基因的小引導RNA（small guide RNA,sgRNA）,將其克隆入CRISPR/Cas9質(zhì)粒,并應用其將E6、E7基因敲除,隨后應用錯位酶切法和克隆測序檢測突變效果,并用細胞遷移與侵襲實驗檢測細胞的侵襲力。結(jié)果 設計的sgRNA被克隆入CRISPR/Cas9質(zhì)粒,經(jīng)測序克隆正確。該質(zhì)粒轉(zhuǎn)染SiHa細胞后,可以引發(fā)靶點DNA的突變,致使E6和E7基因密碼子改變,無法正確表達。E6、E7突變后SiHa細胞侵襲及增殖能力下降（t檢驗,pCas9組與psgE6-1-1-Cas9組相比,P＝0.0006; pCas9組與psgE7-1-2-Cas9組相比,P＝0.0007）,促進腫瘤抑制因子P53的表達恢復,細胞的惡性度降低。 

【文章來源】：國際遺傳學雜志. 2020,(02)

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