發(fā)布時(shí)間：2021-07-22 17:17

　　目的:采用RNA靶向干擾技術(shù),研究人胃癌細(xì)胞BGC823中微小RNA（microRNA, miRNA, miR）-200c的靶點(diǎn)鋅指E盒增強(qiáng)子結(jié)合蛋白2（zinc finger E-box enhancer binding protein 2, ZEB2）基因的表達(dá)情況,并檢測(cè)相關(guān)的波形蛋白基因表達(dá)情況,觀察miR-200c對(duì)胃癌BGC823細(xì)胞功能的影響。方法:構(gòu)建ZEB2基因表達(dá)的干擾質(zhì)粒shZEB2,用Lipofectamine 2000轉(zhuǎn)染胃癌BGC823細(xì)胞,用G418篩選穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞株,進(jìn)行實(shí)時(shí)定量聚合酶鏈反應(yīng)（polymerase chain reaction,PCR）檢測(cè)人BCG823細(xì)胞中ZEB2 mRNA、miR-200c及波形蛋白基因的表達(dá)水平,并用蛋白印跡法檢測(cè)ZEB2蛋白、波形蛋白表達(dá)水平,噻唑藍(lán)（methylthiazolyldiphenyl-tetrazolium bromide, MTT）法檢測(cè)細(xì)胞增殖能力;Transwell小室檢測(cè)細(xì)胞侵襲能力,劃痕實(shí)驗(yàn)檢測(cè)細(xì)胞遷移能力。結(jié)果:干擾ZEB2分子表達(dá)后,miR-200c表達(dá)水平增高,而BGC823細(xì)胞的增... 

【文章來(lái)源】：診斷學(xué)理論與實(shí)踐. 2020,19(04)

【文章頁(yè)數(shù)】：6 頁(yè)

【部分圖文】：

轉(zhuǎn)染后BCG823細(xì)胞中ZEB2表達(dá)

用MTT實(shí)驗(yàn)檢測(cè)轉(zhuǎn)染后胃癌細(xì)胞增殖能力，結(jié)果顯示，自第4天開始，shZEB2組較Scramble組BCG823細(xì)胞中腫瘤細(xì)胞增殖能力降低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（見表1）。該結(jié)果顯示，ZEB2低表達(dá)時(shí)胃癌細(xì)胞增殖能力降低（見圖2）。四、腫瘤細(xì)胞侵襲力檢測(cè)

本研究采用Transwell小室法檢測(cè)腫瘤細(xì)胞侵襲能力，將腫瘤細(xì)胞種于Transwell小室內(nèi)24 h后，取出小室，采用結(jié)晶紫染色小室背面的基質(zhì)膠，在高倍顯微鏡下觀察小室背面基質(zhì)膠里的細(xì)胞，了解腫瘤細(xì)胞侵襲情況。結(jié)果顯示，shZEB2組較Scramble組的胃癌細(xì)胞侵襲力降低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01）。結(jié)果提示，ZEB2低表達(dá)時(shí)胃癌細(xì)胞在基質(zhì)膠中的侵襲能力降低（見圖3）。五、細(xì)胞遷移能力檢測(cè)

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]Incidence and mortality of stomach cancer in China,2014[J]. Lei Yang,Rongshou Zheng,Ning Wang,Yannan Yuan,Shuo Liu,Huichao Li,Siwei Zhang,Hongmei Zeng,Wanqing Chen.  Chinese Journal of Cancer Research. 2018(03)



本文編號(hào)：3297563