糞腸球菌（Enterococcus fascalis）是一種廣泛分布的機(jī)會(huì)致病菌,能夠引起人和動(dòng)物的多種疾病。近年來,在抗生素的不合理使用下,糞腸球菌的耐藥現(xiàn)象日趨嚴(yán)重結(jié)合其眾多毒力基因與復(fù)雜的致病機(jī)制,使得糞腸球菌感染的臨床治療愈加困難。多位點(diǎn)序列分型（MLST）是一種簡(jiǎn)單且具有高分辨率的分型方法,主要通過分析多個(gè)持家基因的核酸序列來完成對(duì)菌株的分型,它有一個(gè)專門的MLST數(shù)據(jù)庫,可實(shí)現(xiàn)對(duì)不同國(guó)家、地區(qū)菌株之間的信息交流,這為研究不同來源菌株的種群結(jié)構(gòu)、耐藥特征及流行型別等之間的相關(guān)性奠定了一定基礎(chǔ)。本研究對(duì)湖南部分地區(qū)養(yǎng)殖場(chǎng)豬、雞源糞腸球菌進(jìn)行分離與鑒定,并對(duì)分離株的毒力基因及耐藥性進(jìn)行檢測(cè),再使用MLST方法對(duì)部分多重耐藥菌株進(jìn)行分型,以期初步了解該地區(qū)糞腸球菌的毒力基因攜帶情況、耐藥特征及多重耐藥株的流行型別,為指導(dǎo)糞腸球菌感染用藥提供一定依據(jù)。本次研究結(jié)果如下:共分離到81株糞腸球菌,分離率雞源（35.8%）高于豬源（28.4%）;除esp外其余毒力基因均有檢測(cè)到,且85%以上的菌株攜帶兩種及兩種以上毒力基因;分離株對(duì)紅霉素、四環(huán)素以及頭孢西丁嚴(yán)重耐藥,對(duì)萬古霉素普遍敏感,多... 

【文章來源】：湖南農(nóng)業(yè)大學(xué)湖南省

【文章頁數(shù)】：63 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

糞腸球菌可疑株在腸球菌顯色培養(yǎng)基上的菌落特征

15腸球菌在顯色培養(yǎng)基上為紫紅色光澤菌落，見圖2-1；革蘭氏染色為陽性，且呈單個(gè)、成雙或短鏈狀排列，見圖2-2；根據(jù)糞腸球菌革蘭氏染色的結(jié)果和在腸球菌顯色培養(yǎng)基上的結(jié)果，可對(duì)糞腸球菌進(jìn)行初步判定。圖2-1糞腸球菌可疑株在腸球菌顯色培養(yǎng)基上的菌落特征Fig2-1SuspiciousEnterococcusfaecalisonChromogenicmediumofEnterococcus圖2-2糞腸球菌可疑株革蘭氏染色鏡檢圖Fig2-2ThemicroscopicexaminatioofSuspiciousEnterococcusfaecalisbyGramstaining2.3.2糞腸球菌的PCR鑒定結(jié)果利用糞腸球菌特異性引物對(duì)分離到的可疑菌株進(jìn)行PCR擴(kuò)增及電泳，結(jié)果共有81株出現(xiàn)1097bp的目的條帶，將部分PCR產(chǎn)物送去測(cè)序，測(cè)序結(jié)果在NCBI網(wǎng)站上進(jìn)行比對(duì)，同源性達(dá)98%以上。圖1-3為部分糞腸球菌分離株的PCR鑒定結(jié)果。

16圖2-3糞腸球菌分離株的PCR鑒定結(jié)果Fig1-3ThePCRresultsofEnterococcusfaecalisisolates注：M為DNA分子質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)；1為ATCC29212菌株；2為陰性對(duì)照；3-10為分離株2.3.3不同地區(qū)糞腸球菌分離情況本次試驗(yàn)共分離到糞腸球菌81株，其中包括豬源38株，雞源43株，總分離率雞源大于豬源；四個(gè)地區(qū)中，常德地區(qū)的樣本分離率最高，占40.0%，瀏陽及寧鄉(xiāng)地區(qū)次之，衡陽地區(qū)最低。具體分離情況見表1-3表1-3湖南省不同地區(qū)豬、雞源糞腸球菌分離結(jié)果Table1-3IsolationofEnterococcusfaecalisfrompigsandchickensindifferentareasofHunanProvince豬源Isolatedfrompigs雞源Isolatedfromchickens總計(jì)Total地區(qū)Area樣本數(shù)Numberofsamples分離數(shù)NumberofIsolation分離率Isolationrate/%樣本數(shù)Numberofsamples分離數(shù)NumberofIsolation分離率Isolationrate/%樣本數(shù)Numberofsamples分離數(shù)NumberofIsolation分離率Isolationrate/%寧鄉(xiāng)25832.0401230.0652030.8衡陽541425.9301033.3842428.6常德20525.0301550.0502040.0瀏陽351131.420630.0551730.9總計(jì)1343828.31204335.82548131.9

【參考文獻(xiàn)】：
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碩士論文
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本文編號(hào)：3297132