發(fā)布時(shí)間：2021-07-21 18:02

　　目的:通過氣調(diào)脅迫下藥材甲（Stegobium paniceum）轉(zhuǎn)錄組學(xué)分析,就藥材甲在氣調(diào)脅迫下的出現(xiàn)明顯差異表達(dá)的功能基因進(jìn)行功能研究,選擇有顯著響應(yīng)的羧酸酯酶基因,初步探討其對(duì)藥材甲應(yīng)對(duì)氣調(diào)脅迫的分子機(jī)制。方法:使用Illumina Hiseq平臺(tái)對(duì)10%和70%CO₂處理藥材甲進(jìn)行測(cè)序,利用差異基因檢測(cè)方法,篩選兩樣本間的差異表達(dá)基因;用RT-PCR方法對(duì)差異表達(dá)顯著的藥材甲羧酸酯酶基因進(jìn)行克隆,運(yùn)用生物信息學(xué)方法對(duì)該基因及其編碼蛋白進(jìn)行預(yù)測(cè)和分析;利用熒光定量PCR技術(shù)（RT-qPCR）檢測(cè)羧酸酯酶在藥材甲低齡幼蟲、高齡幼蟲、蛹和成蟲中的表達(dá)量,同時(shí)檢測(cè)spCarEs基因在LC₁₀（30%CO₂+70%空氣）、LC₃₀（70%CO₂+30%空氣）兩個(gè)亞致死濃度和致死中濃度LC₅₀（90%CO₂+10%空氣）CO₂濃度氣調(diào)脅迫前后的mRNA表達(dá)模式;以pGEX4T-1為載體構(gòu)建原核表達(dá)系統(tǒng)進(jìn)行表達(dá),用羧... 

【文章來源】：貴州師范大學(xué)貴州省

【文章頁(yè)數(shù)】：83 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

藥材甲危害現(xiàn)狀（引自Ignatowiczetal.Fig2,2011）

羧酸酯酶的結(jié)構(gòu)（引自Sopopetal.2002Fig1-c）

組裝流程

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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[7]CO2氣調(diào)對(duì)藥材甲的毒力及其能源物質(zhì)的代謝比較[J]. 曹宇,吳先勇,盧麗娟,鄧吉,李燦.  中國(guó)生物防治學(xué)報(bào). 2015(01)
[8]羧酸酯酶及其介導(dǎo)昆蟲抗藥性的研究進(jìn)展[J]. 任娜娜,謝苗,尤燕春,尤民生.  福建農(nóng)林大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版). 2014(04)
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[10]橘小實(shí)蠅?mèng)人狨ッ富駼dCAREB1的克隆及其表達(dá)模式解析[J]. 申光茂,豆威,王進(jìn)軍.  中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué). 2014(10)

博士論文
[1]桔小實(shí)蠅消化和解毒代謝相關(guān)基因鑒定及其對(duì)藥劑脅迫的應(yīng)激反應(yīng)[D]. 申光茂.西南大學(xué) 2013
[2]中藥材儲(chǔ)藏期主要害蟲種群生態(tài)及氣調(diào)毒理研究[D]. 李燦.貴州大學(xué) 2008

碩士論文
[1]印度谷螟轉(zhuǎn)錄組分析及Bt毒素相關(guān)基因的鑒定[D]. 薛昊.南京財(cái)經(jīng)大學(xué) 2015



本文編號(hào)：3295509