中國(guó)大鯢卵巢發(fā)育基因Rspo1和β-catenin的克隆與差異表達(dá)分析
發(fā)布時(shí)間:2021-07-11 17:58
Rspo1(R-spondin1)和β-catenin所參與的Rspo1/Wnt/β-catenin信號(hào)通路是Wnt介導(dǎo)的經(jīng)典信號(hào)通路之一,在雌性性別決定和分化中扮演著重要角色。近年來(lái),Rspo1和β-catenin基因在生殖系統(tǒng)中的作用越來(lái)越受到重視,尤其是在脊椎動(dòng)物早期性別決定和分化中。本研究擴(kuò)增獲得中國(guó)大鯢Rspo1和β-catenin基因cDNA全長(zhǎng)序列,并進(jìn)行了序列分析,同時(shí)選取了NCBI上公布的多個(gè)物種的Rspo1和β-catenin基因的核苷酸編碼序列及氨基酸序列構(gòu)建了系統(tǒng)發(fā)育樹(shù)。最后通過(guò)熒光定量實(shí)驗(yàn)探究中國(guó)大鯢Rspo1和β-catenin基因在中國(guó)大鯢幼年及成年的雌雄組織中的表達(dá)情況,并綜合分析了其他性腺發(fā)育相關(guān)基因FoxL2、Cyp19a、Dmrt1、Sox9在不同發(fā)育階段卵巢中的相對(duì)表達(dá)水平,探討Rspo1和β-catenin基因在中國(guó)大鯢卵巢發(fā)育過(guò)程中的作用。得到以下結(jié)果:1.中國(guó)大鯢Rspo1 cDNA序列全長(zhǎng)902bp,編碼261aa,其編碼蛋白具有一個(gè)N端信號(hào)肽,2個(gè)furin-like結(jié)構(gòu)域(FU1和FU2),一個(gè)凝血酶敏感蛋白1型結(jié)構(gòu)域(TSP1)。中...
【文章來(lái)源】:四川農(nóng)業(yè)大學(xué)四川省 211工程院校
【文章頁(yè)數(shù)】:67 頁(yè)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【部分圖文】:
中國(guó)大鯢部分組織總RNA1.0%瓊脂糖凝膠電泳M:DL2000(標(biāo)準(zhǔn)分子量DNAmaker)
17圖3-2中國(guó)大鯢Rspo1基因全長(zhǎng)的擴(kuò)增;M:DL2000(標(biāo)準(zhǔn)分子量DNAmaker)Fig3-2amplificationofA.davidianusRspo1genecDNA;M:DL2000(DNAmolecularweightstandards)②如圖3-3顯示β-catenin基因部分片段擴(kuò)增電泳檢測(cè)結(jié)果,可以看到一條約1700bp的條帶,經(jīng)測(cè)序該序列片段長(zhǎng)度為1816bp,在NCBI上Blast,結(jié)果表明該序列為β-catenin基因的部分片段,該基因的CDS區(qū)5’端和3’端均不全。圖3-3中國(guó)大鯢β-catenin部分片段的擴(kuò)增;M:DL2000(標(biāo)準(zhǔn)分子量DNAmaker)Fig3-3partialfragmentamplificationofA.davidianusβ-cateningenecDNA;M:DL2000(DNAmolecularweightstandards)
17圖3-2中國(guó)大鯢Rspo1基因全長(zhǎng)的擴(kuò)增;M:DL2000(標(biāo)準(zhǔn)分子量DNAmaker)Fig3-2amplificationofA.davidianusRspo1genecDNA;M:DL2000(DNAmolecularweightstandards)②如圖3-3顯示β-catenin基因部分片段擴(kuò)增電泳檢測(cè)結(jié)果,可以看到一條約1700bp的條帶,經(jīng)測(cè)序該序列片段長(zhǎng)度為1816bp,在NCBI上Blast,結(jié)果表明該序列為β-catenin基因的部分片段,該基因的CDS區(qū)5’端和3’端均不全。圖3-3中國(guó)大鯢β-catenin部分片段的擴(kuò)增;M:DL2000(標(biāo)準(zhǔn)分子量DNAmaker)Fig3-3partialfragmentamplificationofA.davidianusβ-cateningenecDNA;M:DL2000(DNAmolecularweightstandards)
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]腸缺血再灌注損傷后腸上皮RSpo1表達(dá)及其意義[J]. 殷剛,吳承堂,王運(yùn)星,雷尚通. 南方醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào). 2009(06)
本文編號(hào):3278575
【文章來(lái)源】:四川農(nóng)業(yè)大學(xué)四川省 211工程院校
【文章頁(yè)數(shù)】:67 頁(yè)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【部分圖文】:
中國(guó)大鯢部分組織總RNA1.0%瓊脂糖凝膠電泳M:DL2000(標(biāo)準(zhǔn)分子量DNAmaker)
17圖3-2中國(guó)大鯢Rspo1基因全長(zhǎng)的擴(kuò)增;M:DL2000(標(biāo)準(zhǔn)分子量DNAmaker)Fig3-2amplificationofA.davidianusRspo1genecDNA;M:DL2000(DNAmolecularweightstandards)②如圖3-3顯示β-catenin基因部分片段擴(kuò)增電泳檢測(cè)結(jié)果,可以看到一條約1700bp的條帶,經(jīng)測(cè)序該序列片段長(zhǎng)度為1816bp,在NCBI上Blast,結(jié)果表明該序列為β-catenin基因的部分片段,該基因的CDS區(qū)5’端和3’端均不全。圖3-3中國(guó)大鯢β-catenin部分片段的擴(kuò)增;M:DL2000(標(biāo)準(zhǔn)分子量DNAmaker)Fig3-3partialfragmentamplificationofA.davidianusβ-cateningenecDNA;M:DL2000(DNAmolecularweightstandards)
17圖3-2中國(guó)大鯢Rspo1基因全長(zhǎng)的擴(kuò)增;M:DL2000(標(biāo)準(zhǔn)分子量DNAmaker)Fig3-2amplificationofA.davidianusRspo1genecDNA;M:DL2000(DNAmolecularweightstandards)②如圖3-3顯示β-catenin基因部分片段擴(kuò)增電泳檢測(cè)結(jié)果,可以看到一條約1700bp的條帶,經(jīng)測(cè)序該序列片段長(zhǎng)度為1816bp,在NCBI上Blast,結(jié)果表明該序列為β-catenin基因的部分片段,該基因的CDS區(qū)5’端和3’端均不全。圖3-3中國(guó)大鯢β-catenin部分片段的擴(kuò)增;M:DL2000(標(biāo)準(zhǔn)分子量DNAmaker)Fig3-3partialfragmentamplificationofA.davidianusβ-cateningenecDNA;M:DL2000(DNAmolecularweightstandards)
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]腸缺血再灌注損傷后腸上皮RSpo1表達(dá)及其意義[J]. 殷剛,吳承堂,王運(yùn)星,雷尚通. 南方醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào). 2009(06)
本文編號(hào):3278575
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