芥藍(lán)（Brassica oleracea var.alboglabra）屬十字花科蕓薹屬蔬菜,其花薹和嫩葉中維生素C、類胡蘿卜素、芥子油苷和多酚等營養(yǎng)物質(zhì)含量豐富。ζ–胡蘿卜素脫氫酶（ζ-carotene desaturase,ZDS）和八氫番茄紅素脫氫酶（Phytoene desaturase,PDS）是植物類胡蘿卜素生物合成途徑中重要的限速酶,ZDS和PDS基因分別被沉默后,轉(zhuǎn)基因植株均會表現(xiàn)出明顯的白化表型,因此這兩個基因常作為CRISPR/Cas9基因編輯、VIGS等體系建立的報告靶基因。在CRISPR/Cas9基因編輯體系中,利用原生質(zhì)體瞬轉(zhuǎn)化技術(shù)篩選優(yōu)良的CRISPR靶位點(diǎn)是一種高效精確的方法。我們前期研究發(fā)現(xiàn),芥藍(lán)中ZDS基因有一個成員,屬單基因;而PDS基因有兩個成員,屬多基因。因此,本研究以芥藍(lán)為試驗(yàn)材料,以BaZDS與BaPDSs基因?yàn)榘谢?首次建立了CRISPR/Cas9基因編輯技術(shù)在芥藍(lán)中的原生質(zhì)體瞬時轉(zhuǎn)化體系、單基因與多基因編輯的穩(wěn)定遺傳體系。本研究的結(jié)果為芥藍(lán)等蕓薹屬植物上利用CRISPR/Cas9基因編輯技術(shù)研究基因功能及新品種選育提供了理論基礎(chǔ)和技術(shù)支... 

【文章來源】：四川農(nóng)業(yè)大學(xué)四川省 211工程院校

【文章頁數(shù)】：59 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

CRISPR位點(diǎn)結(jié)構(gòu)

CRISPR／Cas9系統(tǒng)作用機(jī)制[53]

BaZDS基因靶位點(diǎn)及CRISPR/Cas9載體結(jié)構(gòu)圖

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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[2]沙冬青子葉原生質(zhì)體瞬時表達(dá)體系的建立及其AmDREB1蛋白的亞細(xì)胞定位[J]. 楠迪娜,薛敏,唐寬剛,任美艷,王茅雁.  植物科學(xué)學(xué)報. 2018(04)
[3]玉米葉片原生質(zhì)體的制備及瞬時轉(zhuǎn)化體系的建立[J]. 雷海英,白鳳麟,馮宇,郭亞沖,喬楠茜.  長治學(xué)院學(xué)報. 2018(02)
[4]白花芥藍(lán)離體再生植株的研究[J]. 鄭愛紅,張芬,袁巧,肖楠,楊莉媛,甘穎,楊朝君,孫勃.  分子植物育種. 2017(03)
[5]植物中CRISPR/Cas系統(tǒng)的應(yīng)用研究進(jìn)展[J]. 崔娜,姚佳羽,張楊,于洋,張彤彤,商亦聰,龐舒予,范海延.  西北植物學(xué)報. 2017(01)
[6]芥藍(lán)八氫番茄紅素脫氫酶基因BaPDS1和BaPDS2的克隆與表達(dá)分析[J]. 孫勃,張芬,夏雪,薛生玲,袁巧,陳清,湯浩茹.  園藝學(xué)報. 2016(11)
[7]黃花芥藍(lán)染色體制片優(yōu)化及核型分析[J]. 夏雪,辜金花,劉丹,吳益梅,田玉肖,陳清,張芬,湯浩茹,孫勃.  浙江大學(xué)學(xué)報(農(nóng)業(yè)與生命科學(xué)版). 2016(05)
[8]TALEN-Mediated Homologous Recombination Produces Site-Directed DNA Base Change and Herbicide-Resistant Rice[J]. Ting Li,Bo Liu,Chih Ying Chen,Bing Yang.  Journal of Genetics and Genomics. 2016(05)
[9]CRISPR-dCas9系統(tǒng)在基因表達(dá)調(diào)控中的最新研究進(jìn)展[J]. 羅旻,顧華.  實(shí)驗(yàn)室研究與探索. 2016(03)
[10]應(yīng)用CRISPR/Cas9技術(shù)在楊樹中高效敲除多個靶基因[J]. 劉婷婷,范迪,冉玲玉,姜淵忠,劉瑞,羅克明.  遺傳. 2015(10)

碩士論文
[1]利用CRISPR/Cas9技術(shù)構(gòu)建草莓抗鑲脈病毒植株體系的研究[D]. 江雷雨.四川農(nóng)業(yè)大學(xué) 2016



本文編號：3273307