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絲裂霉素下調(diào)高遷移率族蛋白B1基因表達(dá)對胃癌細(xì)胞增殖和凋亡的影響

發(fā)布時(shí)間:2021-07-06 10:03
  目的探討絲裂霉素通過下調(diào)高遷移率族蛋白B1(HMGB1)基因的表達(dá)對人胃癌MGC-803細(xì)胞增殖和凋亡的影響。方法用不同濃度的絲裂霉素干預(yù)人胃癌MGC-803細(xì)胞,CCK-8法檢測絲裂霉素對MGC-803細(xì)胞增殖抑制作用,計(jì)算半數(shù)抑制濃度(IC50),選擇接近1/2 IC50值的絲裂霉素濃度即2μmol·L-1進(jìn)行后續(xù)實(shí)驗(yàn)。將細(xì)胞分為4組:空白對照組(未行任何處理)、絲裂霉素組(2μmol·L-1絲裂霉素處理)、第1轉(zhuǎn)染組(轉(zhuǎn)染空載質(zhì)粒后以2μmol·L-1絲裂霉素處理)和第2轉(zhuǎn)染組(轉(zhuǎn)染HMGB1過表達(dá)載體質(zhì)粒后以2μmol·L-1絲裂霉素處理)。蛋白質(zhì)印跡法檢測HMGB1蛋白表達(dá)水平,通過脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染技術(shù)恢復(fù)HMGB1的表達(dá),CCK-8實(shí)驗(yàn)檢測細(xì)胞增殖能力(OD值), AnnexinⅤ-FITC/PI雙染色法檢測細(xì)胞凋亡情況。結(jié)果空白對照組、絲裂霉素組、第1轉(zhuǎn)染組和第2轉(zhuǎn)染組的HMGB1蛋白相對表達(dá)水平分別為0.44±0.04,0.18±0.02,0.1... 

【文章來源】:中國臨床藥理學(xué)雜志. 2020,36(23)北大核心CSCD

【文章頁數(shù)】:4 頁

【文章目錄】:
材料與方法
    1 材料
    2 實(shí)驗(yàn)方法
        2.1 細(xì)胞培養(yǎng)[3]
        2.2 細(xì)胞分組和處理
        2.3 以CCK-8實(shí)驗(yàn)檢測細(xì)胞增殖能力[4]
        2.4 以Annexin Ⅴ-FITC/PI雙染色法檢測細(xì)胞凋亡能力[5]
        2.5 以蛋白質(zhì)印跡法檢測HMGB1的蛋白表達(dá)
    3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理
結(jié) 果
    1 絲裂霉素對胃癌MGC-803細(xì)胞增殖的影響
    2 絲裂霉素抑制胃癌MGC-803細(xì)胞中HMGB1的表達(dá)
    3 HMGB1的表達(dá)逆轉(zhuǎn)絲裂霉素對MGC-803細(xì)胞增殖抑制作用
    4 恢復(fù)HMGB1的表達(dá)逆轉(zhuǎn)絲裂霉素對MGC-803細(xì)胞凋亡促進(jìn)作用
討 論


【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]微小RNA-145-5p對結(jié)腸癌細(xì)胞增殖凋亡和FSCN1表達(dá)的影響[J]. 朱琳,曾慶松,王續(xù).  臨床腫瘤學(xué)雜志. 2019(11)



本文編號:3268034

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