隨著抗生素的不合理和大規(guī)模使用,細(xì)菌的耐藥性越來(lái)越強(qiáng),這讓細(xì)菌疾病的治療再一次陷入困難,尋找新型的抑菌藥物已成為非常重要的研究課題。天然產(chǎn)物的開(kāi)發(fā)與利用是目前的研究熱點(diǎn),川白芷Angelica dahurica（Fish.ex Hoffm.）Benth.et Hook.f.var.formosana（Boiss.）Shan et Yuan是著名的川產(chǎn)道地藥材之一,以根入藥,具有良好的藥效價(jià)值和多種藥理活性。目前,川白芷的抑菌作用研究較淺,作用成分的代謝途徑更是鮮見(jiàn)研究。本研究以課題組前期選育的川白芷新品種為材料,通過(guò)對(duì)其提取物進(jìn)行體外抑菌、群體感應(yīng)抑制和中藥-抗生素聯(lián)用等試驗(yàn),以期闡明川白芷的抑菌作用及機(jī)理,為尋找新型的抑菌藥物提供理論依據(jù);通過(guò)對(duì)川白芷轉(zhuǎn)錄組數(shù)據(jù)的挖掘,尋找調(diào)控川白芷中抑菌物質(zhì)的代謝途徑關(guān)鍵酶基因,為川白芷抑菌成分的進(jìn)一步開(kāi)發(fā)利用,遺傳育種和代謝工程奠定基礎(chǔ)和提供科學(xué)依據(jù)。主要研究結(jié)果如下:（1）以川白芷根部為材料,通過(guò)醇提法得到川白芷粗提藥液,對(duì)大腸桿菌、金黃色葡萄球菌、肺炎克雷伯氏菌和銅綠假單胞菌進(jìn)行體外抑菌能力效果試驗(yàn)。結(jié)果表明,川白芷粗提物對(duì)四種致病性菌株都有... 

【文章來(lái)源】：四川農(nóng)業(yè)大學(xué)四川省 211工程院校

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【學(xué)位級(jí)別】：碩士

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植物苯丙烷代謝途徑[74]

183.3結(jié)果與分析3.3.1川白芷對(duì)銅綠假單胞菌綠膿菌素產(chǎn)量的影響如圖3.1所示，在低于MIC濃度下，隨著川白芷提取物濃度的增加，OD520減�。坏前l(fā)現(xiàn)隨著濃度降到極低，毒力因子反而呈現(xiàn)增加趨勢(shì)，結(jié)果說(shuō)明川白芷提取物在25mg/mL濃度下抑制了群體感應(yīng)作用，使其調(diào)控下生成的綠膿菌素量減少，但當(dāng)濃度繼續(xù)降低到17.5mg/mL或者一個(gè)閾值時(shí)，川白芷中的某些成分反而會(huì)促進(jìn)綠膿菌素的生成。圖3.1白芷提取物對(duì)綠膿菌素產(chǎn)量的影響，**P＜0.01Fig3.1EffectofAngelicaedahuricaextractontheyieldofPseudomonasaeruginosa,**P＜0.013.3.2脫脂牛奶平板法測(cè)銅綠假單胞菌胞外蛋白酶細(xì)菌的胞外蛋白酶可以分解培養(yǎng)基中牛奶，試驗(yàn)表現(xiàn)就是平板上小孔周?chē)呐Ｄ瘫环纸�，呈現(xiàn)一個(gè)透明圈狀。試驗(yàn)結(jié)果如圖3.2所示，隨著白芷提取物的濃度增加，透明圓圈的直徑逐漸變小，但是當(dāng)濃度低于17.5mg/mL或者某一個(gè)閾值時(shí)，相對(duì)于對(duì)照組牛奶被分解的更多，這說(shuō)明川白芷提取物中某些成分可以促進(jìn)細(xì)菌胞外蛋白酶的產(chǎn)生，或者促進(jìn)群體感應(yīng)，表明川白芷提取物中不僅有抑制蛋白酶產(chǎn)生的成分，也有可能含有促進(jìn)產(chǎn)生的物質(zhì)。

19圖3.2脫脂牛奶平板法測(cè)胞外蛋白酶，**P＜0.01Fig3.2Determinationofextracellularproteasebyskimmilkplatemethod,**P＜0.013.3.3結(jié)晶紫染色法測(cè)定銅綠假單胞菌生物膜試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，離心管中長(zhǎng)時(shí)間培養(yǎng)下菌液會(huì)形成一層薄膜，附著在管壁上，且很難被生理鹽水沖洗掉。這層膜結(jié)構(gòu)就是銅綠假單胞菌的生物膜，具有抵御外界不良環(huán)境的影響。如圖3.3所示，川白芷提取物在濃度高于25mg/mL時(shí)，能抑制銅綠假單胞菌的生物膜形成，而且濃度越大，抑制效果越明顯；但是當(dāng)濃度低于17.5mg/mL或者某一閾值時(shí)，生物膜的產(chǎn)量反而有所增加，這說(shuō)明川白芷中的成分功能多樣，或者是某一種成分在不同濃度發(fā)揮了不同的作用。圖3.3結(jié)晶紫染色法測(cè)定生物膜產(chǎn)量，**P＜0.01Fig3.3Determinationofbiofilmyieldbycrystalvioletstaining,**P＜0.01

【參考文獻(xiàn)】：
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碩士論文
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