隨著抗生素的不合理和大規(guī)模使用,細(xì)菌的耐藥性越來越強,這讓細(xì)菌疾病的治療再一次陷入困難,尋找新型的抑菌藥物已成為非常重要的研究課題。天然產(chǎn)物的開發(fā)與利用是目前的研究熱點,川白芷Angelica dahurica（Fish.ex Hoffm.）Benth.et Hook.f.var.formosana（Boiss.）Shan et Yuan是著名的川產(chǎn)道地藥材之一,以根入藥,具有良好的藥效價值和多種藥理活性。目前,川白芷的抑菌作用研究較淺,作用成分的代謝途徑更是鮮見研究。本研究以課題組前期選育的川白芷新品種為材料,通過對其提取物進(jìn)行體外抑菌、群體感應(yīng)抑制和中藥-抗生素聯(lián)用等試驗,以期闡明川白芷的抑菌作用及機理,為尋找新型的抑菌藥物提供理論依據(jù);通過對川白芷轉(zhuǎn)錄組數(shù)據(jù)的挖掘,尋找調(diào)控川白芷中抑菌物質(zhì)的代謝途徑關(guān)鍵酶基因,為川白芷抑菌成分的進(jìn)一步開發(fā)利用,遺傳育種和代謝工程奠定基礎(chǔ)和提供科學(xué)依據(jù)。主要研究結(jié)果如下:（1）以川白芷根部為材料,通過醇提法得到川白芷粗提藥液,對大腸桿菌、金黃色葡萄球菌、肺炎克雷伯氏菌和銅綠假單胞菌進(jìn)行體外抑菌能力效果試驗。結(jié)果表明,川白芷粗提物對四種致病性菌株都有... 

【文章來源】：四川農(nóng)業(yè)大學(xué)四川省 211工程院校

【文章頁數(shù)】：69 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

植物苯丙烷代謝途徑[74]

183.3結(jié)果與分析3.3.1川白芷對銅綠假單胞菌綠膿菌素產(chǎn)量的影響如圖3.1所示，在低于MIC濃度下，隨著川白芷提取物濃度的增加，OD520減�。坏前l(fā)現(xiàn)隨著濃度降到極低，毒力因子反而呈現(xiàn)增加趨勢，結(jié)果說明川白芷提取物在25mg/mL濃度下抑制了群體感應(yīng)作用，使其調(diào)控下生成的綠膿菌素量減少，但當(dāng)濃度繼續(xù)降低到17.5mg/mL或者一個閾值時，川白芷中的某些成分反而會促進(jìn)綠膿菌素的生成。圖3.1白芷提取物對綠膿菌素產(chǎn)量的影響，**P＜0.01Fig3.1EffectofAngelicaedahuricaextractontheyieldofPseudomonasaeruginosa,**P＜0.013.3.2脫脂牛奶平板法測銅綠假單胞菌胞外蛋白酶細(xì)菌的胞外蛋白酶可以分解培養(yǎng)基中牛奶，試驗表現(xiàn)就是平板上小孔周圍的牛奶被分解，呈現(xiàn)一個透明圈狀。試驗結(jié)果如圖3.2所示，隨著白芷提取物的濃度增加，透明圓圈的直徑逐漸變小，但是當(dāng)濃度低于17.5mg/mL或者某一個閾值時，相對于對照組牛奶被分解的更多，這說明川白芷提取物中某些成分可以促進(jìn)細(xì)菌胞外蛋白酶的產(chǎn)生，或者促進(jìn)群體感應(yīng)，表明川白芷提取物中不僅有抑制蛋白酶產(chǎn)生的成分，也有可能含有促進(jìn)產(chǎn)生的物質(zhì)。

19圖3.2脫脂牛奶平板法測胞外蛋白酶，**P＜0.01Fig3.2Determinationofextracellularproteasebyskimmilkplatemethod,**P＜0.013.3.3結(jié)晶紫染色法測定銅綠假單胞菌生物膜試驗發(fā)現(xiàn)，離心管中長時間培養(yǎng)下菌液會形成一層薄膜，附著在管壁上，且很難被生理鹽水沖洗掉。這層膜結(jié)構(gòu)就是銅綠假單胞菌的生物膜，具有抵御外界不良環(huán)境的影響。如圖3.3所示，川白芷提取物在濃度高于25mg/mL時，能抑制銅綠假單胞菌的生物膜形成，而且濃度越大，抑制效果越明顯；但是當(dāng)濃度低于17.5mg/mL或者某一閾值時，生物膜的產(chǎn)量反而有所增加，這說明川白芷中的成分功能多樣，或者是某一種成分在不同濃度發(fā)揮了不同的作用。圖3.3結(jié)晶紫染色法測定生物膜產(chǎn)量，**P＜0.01Fig3.3Determinationofbiofilmyieldbycrystalvioletstaining,**P＜0.01

【參考文獻(xiàn)】：
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本文編號：3249957