[目的]探討沉默SALL4基因?qū)θ橄侔┠退幖?xì)胞MCF-7/A的增殖及化療敏感性的影響。[方法]q RT-PCR和Western Blot實(shí)驗(yàn)檢測MCF-7、MCF-7/A細(xì)胞內(nèi)SALL4表達(dá)水平,運(yùn)用慢病毒包裝sh RNA方法沉默MCF-7/A細(xì)胞的SALL4基因;實(shí)驗(yàn)組（Lv-sh SALL4）、陰性對照組（Lv-sh NC）和空白對照組（CON）。CCK8法、克隆形成實(shí)驗(yàn)檢測SALL4沉默對細(xì)胞增殖能力的影響;CCK8法檢測表柔比星處理細(xì)胞24h和48h的半數(shù)抑制濃度(IC₅₀);流式細(xì)胞儀檢測細(xì)胞凋亡。[結(jié)果]SALL4在MCF-7/A細(xì)胞中的表達(dá)水平顯著高于MCF-7（P<0.05）。MCF-7/A細(xì)胞中SALL4基因被成功沉默,病毒感染MCF-7/A細(xì)胞72h后,細(xì)胞感染效率約95%,沉默SALL4基因后MCF-7/A細(xì)胞內(nèi)SALL4 m RNA及蛋白表達(dá)均明顯降低（P<0.05）。沉默MCF-7/A細(xì)胞的SALL4基因,顯著抑制了細(xì)胞的增殖能力（P<0.05）,增強(qiáng)了細(xì)胞對表柔比星的敏感性;表柔比星24h和48h的IC_50<... 

【文章來源】：中國腫瘤. 2016,25(02)

【文章頁數(shù)】：6 頁

【文章目錄】：
1 材料與方法
    1.1 材料
    1.2 方法
        1.2.1 細(xì)胞培養(yǎng)
        1.2.2 q RT-PCR檢測細(xì)胞內(nèi)SALL4 m RNA相對表達(dá)量
        1.2.3 Western blot實(shí)驗(yàn)檢測細(xì)胞內(nèi)SALL4 蛋白相對含量
        1.2.4 MCF-7/A細(xì)胞內(nèi)SALL4 基因沉默效率的檢測
        1.2.5 CCK8 法繪制細(xì)胞生長曲線
        1.2.6 克隆形成實(shí)驗(yàn)
        1.2.7 CCK8 法檢測表柔比星處理MCF-7/A細(xì)胞的半數(shù)抑制濃度(IC50)
        1.2.8 流式細(xì)胞術(shù)檢測表柔比星誘導(dǎo)的細(xì)胞凋亡
    1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理
2 結(jié)果
    2.1 MCF-7、MCF-7/A細(xì)胞中SALL4 基因表達(dá)水平的差異
    2.2 MCF-7/A細(xì)胞中SALL4 基因敲減效率檢測
    2.4 沉默SALL4 基因增強(qiáng)MCF-7/A細(xì)胞對表柔比星的敏感性
3 討論


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]乳腺癌多藥耐藥細(xì)胞系MCF-7/A的建立[J]. 洪理泉,柯衛(wèi)鋒,潘峰,陳兆軍,劉玉華.  浙江醫(yī)學(xué). 2012 (17)



本文編號：3236911