本文關(guān)鍵詞：蒺藜苜蓿MtMYB114和MtGL2轉(zhuǎn)錄因子在轉(zhuǎn)基因紫花苜蓿中的功能研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：紫花苜蓿是世界上最重要的豆科牧草之一,其優(yōu)異的飼用價(jià)值和極高的產(chǎn)量奠定了其在畜牧業(yè)中的地位,但是反芻家畜采食紫花苜蓿后易發(fā)生臌脹病,所以嚴(yán)重限制了紫花苜蓿營養(yǎng)潛力的發(fā)揮�？s合單寧是黃酮類化合物生物合成途徑中的重要產(chǎn)物,可以抑制臌脹病的發(fā)生。隨著基因工程的飛速發(fā)展,利用生物技術(shù)手段提高紫花苜蓿中縮合單寧的含量用于預(yù)防臌脹病的發(fā)生已成為可能�，F(xiàn)得到如下結(jié)果:1、本文研究了紫花苜蓿近緣物種蒺藜苜蓿的MtMYB114和MtGL2基因,對(duì)其分別進(jìn)行生物信息學(xué)分析發(fā)現(xiàn),這兩個(gè)基因與其同源基因具有較高的相似性。2、本研究利用農(nóng)桿菌介導(dǎo)的方法,已成功地將MtMYB114和MtGL2基因轉(zhuǎn)化至紫花苜蓿中,共得到43株轉(zhuǎn)MtMYB114基因陽性植株和40株轉(zhuǎn)MtGL2基因陽性植株。通過實(shí)時(shí)熒光定量技術(shù)發(fā)現(xiàn),這些轉(zhuǎn)基因植株中,包括縮合單寧和花青素的黃酮類化合物合成途徑關(guān)鍵酶基因DFR和ANR基因的表達(dá)量相對(duì)于未轉(zhuǎn)基因植株明顯升高。3、與野生型相比,轉(zhuǎn)基因植株在愈傷組織時(shí)期會(huì)呈現(xiàn)出明顯的紅色,說明這兩個(gè)基因的過量表達(dá)可以提高縮合單寧前體花青素的含量。以上實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,通過過量表達(dá)MtMYB114和MtGL2基因,可以上調(diào)黃酮類化合物生物合成途徑中關(guān)鍵酶基因的表達(dá),至少能提高縮合單寧前體花青素的含量,為抗臌脹病紫花苜蓿的育種提供參考依據(jù)。
【關(guān)鍵詞】：MtMYB114 MtGL2 黃酮類化合物 紫花苜蓿
【學(xué)位授予單位】：蘭州大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號(hào)】：S541.9
【目錄】：

• 中文摘要3-4
• Abstract4-8
• 第一章 文獻(xiàn)綜述8-20
• 1.1 植物黃酮類化合物的研究進(jìn)展8-11
• 1.1.1 黃酮類化合物的作用8-9
• 1.1.2 黃酮類化合物的基本生物合成途徑9-11
• 1.2 參與黃酮類化合物合成的轉(zhuǎn)錄因子11-16
• 1.2.1 參與黃酮類化合物合成的MYB轉(zhuǎn)錄因子11-13
• 1.2.2 參與黃酮類化合物合成的bHLH型轉(zhuǎn)錄因子13-14
• 1.2.3 參與黃酮類化合物合成的WD40轉(zhuǎn)錄因子14-15
• 1.2.4 同源異型亮氨酸拉鏈(Homeobox-leucine zipper)蛋白15-16
• 1.3 苜蓿中調(diào)控黃酮合成的轉(zhuǎn)錄因子研究進(jìn)展16-18
• 1.3.1 調(diào)控苜蓿黃酮合成的主要轉(zhuǎn)錄因子16-17
• 1.3.2 轉(zhuǎn)錄因子在苜蓿黃酮品質(zhì)改良中的應(yīng)用17-18
• 1.4 研究?jī)?nèi)容及意義18-20
• 第二章 MtMYB114基因在紫花苜蓿中的過量表達(dá)分析20-35
• 2.1 材料與試劑20-21
• 2.1.1 材料20
• 2.1.2 實(shí)驗(yàn)試劑20
• 2.1.3 實(shí)驗(yàn)儀器20-21
• 2.2 實(shí)驗(yàn)方法21-27
• 2.2.1 MtMYB114基因轉(zhuǎn)化紫花苜蓿21-22
• 2.2.2 轉(zhuǎn)基因植株DNA檢測(cè)22-23
• 2.2.3 轉(zhuǎn)基因紫花苜蓿表達(dá)分析23-26
• 2.2.4 轉(zhuǎn)基因紫花苜蓿MtMYB114下游基因DFR，ANR，ANS基因表達(dá)分析26-27
• 2.3 結(jié)果與分析27-32
• 2.3.1 MtMYB114基因的生物信息學(xué)分析27-28
• 2.3.2 MtMYB114基因轉(zhuǎn)化紫花苜蓿及分子檢測(cè)28-30
• 2.3.3 過量表達(dá)MtMYB114對(duì)其下游基因DFR，ANR和ANS表達(dá)量的影響30-32
• 2.3.4 過量表達(dá)MtMYB114對(duì)花青素合成的影響32
• 2.4 討論32-35
• 第三章 Mt GL2基因在紫花苜蓿中的過量表達(dá)分析35-46
• 3.1 材料與試劑35
• 3.1.1 材料35
• 3.1.2 實(shí)驗(yàn)試劑35
• 3.1.3 實(shí)驗(yàn)儀器35
• 3.2 實(shí)驗(yàn)方法35-37
• 3.2.1 MtGL2基因轉(zhuǎn)化紫花苜蓿35
• 3.2.2 轉(zhuǎn)基因植株DNA檢測(cè)35-36
• 3.2.3 轉(zhuǎn)基因紫花苜蓿表達(dá)分析36-37
• 3.2.4 轉(zhuǎn)基因紫花苜蓿MtGL2下游基因DFR，ANR，ANS基因表達(dá)分析37
• 3.3 結(jié)果與分析37-43
• 3.3.1 MtGL2基因的生物信息學(xué)分析37-39
• 3.3.2 MtGL2基因轉(zhuǎn)化紫花苜蓿及分子檢測(cè)39-41
• 3.3.3 過量表達(dá)MtGL2對(duì)其下游基因DFR，ANR和ANS表達(dá)量的影響41-43
• 3.3.4 過量表達(dá)MtGL2對(duì)花青素合成的影響43
• 3.4 討論43-46
• 第四章 結(jié)論與展望46-48
• 4.1 主要結(jié)論46-47
• 4.2 研究展望47-48
• 參考文獻(xiàn)48-56
• 在學(xué)期間的研究成果56-57
• 致謝57

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：323346