目的探討Livin基因沉默對視網(wǎng)膜母細胞瘤細胞侵襲性的影響及其機制。方法體外培養(yǎng)視網(wǎng)膜母細胞瘤細胞Y79和視網(wǎng)膜色素上皮細胞ARPE-19,采用實時熒光定量PCR（RT-qPCR）和Western blot分別檢測細胞中Livin的mRNA和蛋白表達水平。將Y79細胞分為對照組（細胞正常培養(yǎng)）、si-Livin組（轉(zhuǎn)染Livin小干擾RNA）和si-NC組（轉(zhuǎn)染亂序無意義陰性序列）,CCK-8法檢測各組細胞存活率,采用Transwell實驗檢測各組細胞遷移和侵襲能力,Western blot檢測各組細胞中血管內(nèi)皮生長因子（VEGF）、血管生成素-2（Ang-2）、基質(zhì)金屬蛋白酶-2（MMP-2）、基質(zhì)金屬蛋白酶-9（MMP-9）的蛋白表達。結果與ARPE-19細胞中Livin的mRNA（1.01±0.06）和蛋白（0.18±0.07）表達比較,Y79細胞中Livin的mRNA（1.81±0.10）和蛋白（0.51±0.10）表達水平均顯著升高（均為P<0.05）。與對照組[細胞存活率（99.87±1.36）%、細胞遷移能力（126.89±8.54）個、細胞侵襲能力（100.89±... 

【文章來源】：眼科新進展. 2020,40(12)北大核心

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ARPE-19細胞和Y79細胞中Livin蛋白表達

對照組、si-NC組和si-Livin組Y79細胞存活率分別為(99.87±1.36)%、(98.43±1.22)%、(46.27±1.73)%。與對照組或si-NC組比較,si-Livin組Y79細胞存活率均顯著降低(均為P<0.05)。si-NC組與對照組Y79細胞存活率比較,差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。表2 Livin小干擾RNA轉(zhuǎn)染Y79細胞后Livin的mRNA和蛋白表達水平 (n=9, x ˉ ±s) 組別 Livin mRNA Livin蛋白 對照組 1.00±0.07 0.52±0.09 si-NC組 0.99±0.06 0.51±0.08 si-Livin組 0.34±0.05*# 0.28±0.04*# F值 351.082 30.912 P值 <0.001 <0.001 注:與對照組比較,*P<0.05;與si-NC組比較,#P<0.05

與對照組或si-NC組比較,si-Livin組Y79細胞遷移和侵襲細胞數(shù)均顯著降低(均為P<0.05)。si-NC組與對照組Y79細胞遷移和侵襲細胞數(shù)比較,差異均無統(tǒng)計學意義(P>0.05)(見圖3和表3)。表3 Livin基因沉默對Y79細胞遷移和侵襲的影響 (n=9, x ˉ ±s) 組別 遷移細胞數(shù)/個 侵襲細胞數(shù)/個 對照組 126.89±8.54 100.89±7.92 si-NC組 120.44±7.51 99.56±7.23 si-Livin組 58.00±5.68*# 37.56±4.30*# F值 241.887 264.846 P值 <0.001 <0.001 注:與對照組比較,*P<0.05;與si-NC組比較,#P<0.05

【參考文獻】：
期刊論文
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本文編號：3232408