食源性單核細胞增生型李斯特菌lmoF2365 0 032基因克隆及序列分析
發(fā)布時間:2021-06-08 21:51
對食源性單核細胞增生李斯特菌LM5567的lmoF23650032基因進行克隆和序列分析,利用PCR方法對lmoF23650032基因進行擴增,將擴增產(chǎn)物連接到pMD19-T載體上,篩選陽性菌株進行測序比對分析。結(jié)果顯示,擴增獲得的lmoF23650032基因序列長度為811 bp,克隆得到lmoF23650032基因的陽性轉(zhuǎn)化子;生物信息學分析表明,lmoF 23650032蛋白屬于跨膜蛋白,無信號肽序列;二級結(jié)構(gòu)中無規(guī)則卷曲和延伸鏈結(jié)構(gòu)占比較大,分別是37.86%和36.89%;序列比對結(jié)果表明,LM5567菌株lmoF23650032基因的核苷酸序列與02-6680菌株(4b,奶酪,加拿大)、10-0811菌株(1/2b,螃蟹,加拿大)的相似性均為99.7%;與10-0809菌株(4b,糞便,加拿大)、81-055菌株(4b,腦脊髓液,加拿大)、02-1103菌株、02-1792菌株(4b,奶酪,加拿大)、81-0861菌株(4b,卷心菜,加拿大)的...
【文章來源】:江蘇農(nóng)業(yè)科學. 2020,48(16)
【文章頁數(shù)】:6 頁
【文章目錄】:
1 材料與方法
1.1 材料
1.1.1 菌株和質(zhì)粒
1.1.2 主要試劑和儀器
1.1.3 引物設計與合成
1.2 方法
1.2.1 菌株培養(yǎng)和基因組DNA的提取
1.2.2 PCR檢測
1.2.3 PCR擴增產(chǎn)物的檢測
1.2.4 目的基因克隆及測序
1.2.5 生物信息學分析
2 結(jié)果與分析
2.1 lmoF2365_0032基因PCR擴增和克隆測序
2.2 lmoF2365_0032編碼蛋白的理化性質(zhì)分析
2.3 lmoF2365_0032編碼蛋白信號肽和跨膜區(qū)分析
2.4 lmoF2365_0032基因核苷酸序列同源性比對
2.5 lmoF2365_0032基因序列編碼氨基酸同源性比對
2.6 lmoF2365_0032蛋白的二級和三級結(jié)構(gòu)預測
3 討論
【參考文獻】:
期刊論文
[1]進口俄羅斯食品中食源性微生物的檢測分析[J]. 馬微,潘秀霞,李蘇龍,何浩,魏書娟,穆曉東,呂重,程麗. 食品安全質(zhì)量檢測學報. 2016(12)
[2]2013年梅州市餐飲業(yè)自制食品微生物污染檢測與分析[J]. 丘增萍,謝強,況偉,賴紀年,朱茂玉. 中國藥事. 2015(04)
[3]單核細胞增生性李斯特菌srtA基因的克隆與原核表達[J]. 吳學林,曹樹珠,馬勛. 石河子大學學報(自然科學版). 2015(02)
[4]Arc基因表達及甲基化與幼齡鼠和成年鼠空間記憶形成的相關(guān)性[J]. 葉保國,滕士勇,李新白,宋雪松,麻海春,朱慶三. 中國生物制品學雜志. 2013(03)
[5]單增李斯特菌增殖的影響因素研究[J]. 張春琳,張家國. 食品研究與開發(fā). 2011(07)
本文編號:3219269
【文章來源】:江蘇農(nóng)業(yè)科學. 2020,48(16)
【文章頁數(shù)】:6 頁
【文章目錄】:
1 材料與方法
1.1 材料
1.1.1 菌株和質(zhì)粒
1.1.2 主要試劑和儀器
1.1.3 引物設計與合成
1.2 方法
1.2.1 菌株培養(yǎng)和基因組DNA的提取
1.2.2 PCR檢測
1.2.3 PCR擴增產(chǎn)物的檢測
1.2.4 目的基因克隆及測序
1.2.5 生物信息學分析
2 結(jié)果與分析
2.1 lmoF2365_0032基因PCR擴增和克隆測序
2.2 lmoF2365_0032編碼蛋白的理化性質(zhì)分析
2.3 lmoF2365_0032編碼蛋白信號肽和跨膜區(qū)分析
2.4 lmoF2365_0032基因核苷酸序列同源性比對
2.5 lmoF2365_0032基因序列編碼氨基酸同源性比對
2.6 lmoF2365_0032蛋白的二級和三級結(jié)構(gòu)預測
3 討論
【參考文獻】:
期刊論文
[1]進口俄羅斯食品中食源性微生物的檢測分析[J]. 馬微,潘秀霞,李蘇龍,何浩,魏書娟,穆曉東,呂重,程麗. 食品安全質(zhì)量檢測學報. 2016(12)
[2]2013年梅州市餐飲業(yè)自制食品微生物污染檢測與分析[J]. 丘增萍,謝強,況偉,賴紀年,朱茂玉. 中國藥事. 2015(04)
[3]單核細胞增生性李斯特菌srtA基因的克隆與原核表達[J]. 吳學林,曹樹珠,馬勛. 石河子大學學報(自然科學版). 2015(02)
[4]Arc基因表達及甲基化與幼齡鼠和成年鼠空間記憶形成的相關(guān)性[J]. 葉保國,滕士勇,李新白,宋雪松,麻海春,朱慶三. 中國生物制品學雜志. 2013(03)
[5]單增李斯特菌增殖的影響因素研究[J]. 張春琳,張家國. 食品研究與開發(fā). 2011(07)
本文編號:3219269
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