菠蘿是世界上三大熱帶草本果樹之一,由于其獨(dú)特的風(fēng)味兒和營養(yǎng)價(jià)值深受消費(fèi)者青睞,因而具有較高的商業(yè)價(jià)值。近年來,我國菠蘿產(chǎn)業(yè)在國內(nèi)外市場(chǎng)中并不具備競(jìng)爭優(yōu)勢(shì)。開花是植物從營養(yǎng)生長過度到生殖生長的轉(zhuǎn)折階段,對(duì)植物果實(shí)的形成、果實(shí)的產(chǎn)量和品質(zhì)具有長遠(yuǎn)的影響。乙烯誘導(dǎo)菠蘿開花是一種常規(guī)的栽培技術(shù),但其分子機(jī)制的研究尚處于初始階段。FT是植物中可將多種途徑的開花誘導(dǎo)信號(hào)進(jìn)行整合并傳遞給下游的花分生組織決定基因的重要調(diào)節(jié)因子,因而具有重要的研究價(jià)值。菠蘿AcFT基因（NCBI注冊(cè)號(hào):HQ343233.1）的表達(dá)受乙烯調(diào)控,并且能夠促進(jìn)擬南芥開花時(shí)間提前大約6.8天并增加花絮的數(shù)量。本研究首先從“MD-2”菠蘿中克隆了兩個(gè)新的FT同源基因AcFTL1和AcFTL2,并利用實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)檢測(cè)了AcFTL1和AcFTL2基因與對(duì)照基因（AcFT）分別對(duì)低濃度（600ppm）和高濃度（1200 ppm）乙烯利的響應(yīng)特性,然后通過生物信息學(xué)的方法分析了AcFTL1和AcFTL2蛋白的理化性質(zhì)、保守結(jié)構(gòu)域、親緣關(guān)系和信號(hào)肽等。進(jìn)一步構(gòu)建了35S::AcFTL1、35S::AcFTL2過表達(dá)載體,并利用農(nóng)... 

【文章來源】：長江大學(xué)湖北省

【文章頁數(shù)】：73 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
ABSTRACT
第1章 緒論
    1.1 引言
    1.2 植物開花的分子機(jī)制
        1.2.1 植物開花誘導(dǎo)途徑
        1.2.2 開花信號(hào)整合因子
        1.2.3 花分生組織決定基因
        1.2.4 “ABCDE”模型
    1.3 乙烯及其信號(hào)傳導(dǎo)機(jī)制
    1.4 菠蘿開花分子機(jī)制的研究進(jìn)展
    1.5 研究目的及意義
第2章 AcFTL1和AcFTL2基因的表達(dá)量檢測(cè)與克隆分析
    2.1 引言
    2.2 試驗(yàn)材料與試劑
        2.2.1 試驗(yàn)材料
        2.2.2 材料處理
        2.2.3 酶
        2.2.4 試劑盒
        2.2.5 母液
        2.2.6 培養(yǎng)基
        2.2.7 實(shí)驗(yàn)儀器
    2.3 試驗(yàn)方法與步驟
        2.3.1 菠蘿c DNA模板的制備
        2.3.2 AcFTL1和AcFTL2及其相關(guān)基因的克隆
        2.3.3 AcFTL1和AcFTL2基因的表達(dá)量檢測(cè)
        2.3.4 AcFTL1和AcFTL2蛋白的生物信息學(xué)分析
    2.4 結(jié)果與分析
        2.4.1 菠蘿組織總RNA的完整性檢測(cè)
        2.4.2 AcFTL1和AcFTL2基因的克隆
        2.4.3 AcFTL1和AcFTL2基因的相對(duì)表達(dá)量檢測(cè)
        2.4.4 AcFTL1和AcFTL2蛋白的生物信息學(xué)分析
    2.5 結(jié)論與討論
第3章 AcFTL1和AcFTL2基因功能鑒定
    3.1 引言
    3.2 材料與試劑
        3.2.1 試驗(yàn)材料
        3.2.2 酶
        3.2.3 試劑盒
        3.2.4 母液
        3.2.5 培養(yǎng)基
        3.2.6 菌種
    3.3 試驗(yàn)方法與步驟
        3.3.1 過表達(dá)載體構(gòu)建
        3.3.2 轉(zhuǎn)基因擬南芥陽性株系的獲取
        3.3.3 轉(zhuǎn)基因擬南芥的表型鑒定
    3.4 結(jié)果與分析
        3.4.1 過表達(dá)載體的構(gòu)建
        3.4.2 轉(zhuǎn)基因擬南芥陽性植株的獲取
        3.4.3 轉(zhuǎn)基因擬南芥的表型鑒定
    3.5 結(jié)論與討論
第4章 AcFTL1和AcFTL2與互作蛋白的酵母雙雜交驗(yàn)證
    4.1 引言
    4.2 材料與試劑
        4.2.1 試驗(yàn)材料
        4.2.2 酶
        4.2.3 試劑盒
        4.2.4 母液
        4.2.5 培養(yǎng)基
    4.3 方法與步驟
        4.3.1 AcFDL1、AcFDL2和Ac14-3-3L基因全長的克隆
        4.3.2 誘餌和獵物載體的構(gòu)建
        4.3.3 Y2H-Gold酵母感受態(tài)的制備
        4.3.4 自激活活性檢測(cè)
        4.3.5 誘餌蛋白與獵物蛋白的互作關(guān)系檢測(cè)
    4.4 結(jié)果與分析
        4.4.1 AcFDL1、AcFDL2和Ac14-3-3L基因全長的克隆
        4.4.2 誘餌載體與獵物載體的構(gòu)建
        4.4.3 誘餌蛋白的自激活活性檢測(cè)
        4.4.4 誘餌蛋白與獵物蛋白的互作關(guān)系檢測(cè)
    4.5 結(jié)論與討論
第5章 結(jié)論與展望
    5.1 結(jié)論
    5.2 展望
致謝
參考文獻(xiàn)
個(gè)人簡介


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]菠蘿對(duì)乙烯利誘花的敏感性差異研究[J]. 張紅娜,劉勝輝,孫偉生,李運(yùn)合,孫光明,林文秋,張秀梅,吳青松.  熱帶作物學(xué)報(bào). 2018(06)
[2]高等植物成花誘導(dǎo)的分子機(jī)理研究進(jìn)展[J]. 周琴,張思思,包滿珠,劉國鋒.  分子植物育種. 2018(11)
[3]乙烯信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)與植物非生物脅迫反應(yīng)調(diào)控研究進(jìn)展[J]. 趙赫,陳受宜,張勁松.  生物技術(shù)通報(bào). 2016(10)
[4]2015年中國菠蘿產(chǎn)業(yè)發(fā)展報(bào)告及形勢(shì)預(yù)測(cè)[J]. 金琰.  世界熱帶農(nóng)業(yè)信息. 2016(09)
[5]成花素基因FT及其調(diào)控機(jī)制研究進(jìn)展[J]. 劉麗敏,陳福祿,張曉玫,武小霞,陳慶山,傅永福.  分子植物育種. 2016(07)
[6]miRNAs調(diào)控植物生長發(fā)育的研究進(jìn)展[J]. 陳思,陳薇,龐基良.  北方園藝. 2016(05)
[7]赤霉素生物合成及信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑研究進(jìn)展[J]. 黃桃鵬,李媚娟,王睿,李玲.  植物生理學(xué)報(bào). 2015(08)
[8]miR156介導(dǎo)的高等植物年齡途徑研究進(jìn)展[J]. 虞莎,王佳偉.  科學(xué)通報(bào). 2014(15)
[9]植物SOC1/AGL20基因研究進(jìn)展[J]. 馬騰飛,林新春.  浙江農(nóng)林大學(xué)學(xué)報(bào). 2013(06)
[10]植物激素乙烯作用機(jī)制的最新進(jìn)展[J]. 李文陽,馬夢(mèng)迪,郭紅衛(wèi).  中國科學(xué):生命科學(xué). 2013(10)

碩士論文
[1]熱激誘導(dǎo)表達(dá)Hd3a基因的水稻轉(zhuǎn)化研究及Hd3a信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)機(jī)理初探[D]. 郭輝.廈門大學(xué) 2009



本文編號(hào)：3201337