為闡明藏綿羊瘤胃、網(wǎng)胃、瓣胃與皺胃功能差異的分子機理,試驗以藏綿羊為研究對象,采用抑制消減雜交法篩選藏綿羊瘤胃、網(wǎng)胃、瓣胃與皺胃差異表達基因并進行生物信息學(xué)分析。結(jié)果表明:成功構(gòu)建了6個藏綿羊瘤胃、網(wǎng)胃、瓣胃與皺胃差異表達的正反向消減c DNA文庫;得到了皺胃特異表達的30個EST片段,瘤胃、網(wǎng)胃、瓣胃特異表達的10個EST片段。經(jīng)Blast X對比發(fā)現(xiàn)5個EST片段與已知基因具有較高的序列相似性,且都在皺胃中特異表達。其中胃蛋白酶A、Napsin-A參與蛋白質(zhì)水解;胃溶菌酶參與菌體蛋白的消化過程;胃饑餓激素調(diào)節(jié)食欲且促進相關(guān)消化酶分泌;鋅指蛋白調(diào)節(jié)胃酸分泌。說明皺胃具有真正的消化功能,而瘤胃、網(wǎng)胃、瓣胃不能分泌消化酶。瘤胃能利用微生物將攝入的飼草發(fā)酵分解成小顆粒物質(zhì),網(wǎng)胃、瓣胃起篩濾作用。 

【文章來源】：黑龍江畜牧獸醫(yī). 2017,(13)北大核心

【文章頁數(shù)】：6 頁

【文章目錄】：
1 材料
    1.1 試驗動物
    1.2 主要試劑
    1.3 主要儀器
2 方法
    2.1 引物的設(shè)計及合成
    2.2 總RNA的提取及檢測
    2.3 雙鏈c DNA的合成
    2.4 抑制消減雜交
    2.5 消減文庫的建立、陽性克隆的篩選、序列測定與分析
3 結(jié)果與分析
    3.1 總RNA完整性檢測結(jié)果
    3.2 RsaⅠ酶切效率及接頭連接效率檢測
    3.3 第二輪PCR產(chǎn)物檢測
    3.4 消減文庫隨機c DNA片段PCR檢測
    3.5 差異表達序列的測定和初步分析
4 討論


【參考文獻】：
期刊論文
[1]藏山羊瓣胃溶菌酶基因TGOLyz的克隆及組織表達分析[J]. 張鵬,江明鋒,馬曉瑞,方毅,王永.  華北農(nóng)學(xué)報. 2013(03)
[2]草地藏系綿羊賈洛類群生產(chǎn)性能研究[J]. 吳錦波,王永,傅昌秀,楊虎林,程鑒,劉魯蜀.  西南民族大學(xué)學(xué)報(自然科學(xué)版). 2009(02)
[3]鋅指蛋白結(jié)構(gòu)和功能研究進展[J]. 余曉丹.  國外醫(yī)學(xué)(衛(wèi)生學(xué)分冊). 2004(03)



本文編號：3201187