小麥（Triticum aestivum L.）是世界上三大糧食作物之一。其抽穗時間會直接影響小麥產(chǎn)量。為理解小麥開花過程的分子調控機理,本研究從小麥中分離得到一個MADS-box基因,命名為SOC1-like,并對其表達模式及生物學功能進行了初步探究。主要結果如下:TaSOC1-like基因具有三個等位基因,分別定位于6A、6B和6D染色體。三個基因組基因結構皆含有六個外顯子和五個內含子,其核苷酸之間的序列同一性高達97.08%�；蚪M序列全長分別是6739 bp（TaSOC1-like-6A）、7205 bp（TaSOC1-like-6B）和7029bp（TaSOC1-like-6D）,相應的CDS長度為789 bp、777 bp、780 bp,分別編碼262、258和259個氨基酸。NCBI數(shù)據(jù)庫蛋白預測推斷顯示,TaSOC1-like蛋白屬于典型的MIKC型蛋白,含有MADS-box家族中MEF2-like和K-box兩個經(jīng)典結構域。進化樹分析表明,TaSOC1-like蛋白與其他物種中同源蛋白相比,與大麥HORVU6Hr1G002330編碼的蛋白相似性最高,具有較近的親緣關系... 

【文章來源】：山東農(nóng)業(yè)大學山東省

【文章頁數(shù)】：66 頁

【學位級別】：碩士

【文章目錄】：
縮略詞說明
中文摘要
Abstract
1 前言
    1.1 小麥概述
        1.1.1 小麥進化起源
        1.1.2 抽穗期對小麥的影響
    1.2 植物開花調控
        1.2.1 開花調控途徑中的相互作用
        1.2.2 光周期途徑
        1.2.3 春化途徑
        1.2.4 自主途徑
        1.2.5 GA途徑
        1.2.6 其他開花調控途徑
    1.3 花形態(tài)建成
        1.3.1 花器官發(fā)育ABC模型的建立與完善
        1.3.2 MADS-box家族的發(fā)現(xiàn)
        1.3.3 MADS-box基因的結構和功能
    1.4 本研究的目的與意義
2 材料與方法
    2.1 實驗材料
        2.1.1 實驗材料與材料培養(yǎng)條件
        2.1.2 菌株與載體
        2.1.3 酶以及其它生化試劑
        2.1.4 主要儀器
        2.1.5 PCR引物以及序列測定
    2.2 實驗方法
        2.2.1 試劑盒總RNA的提取
        2.2.2 反轉錄cDNA第一鏈的合成
        2.2.3 目的基因TaSOC1-like的克隆
        2.2.4 目的片段的回收與檢測
        2.2.5 大腸桿菌感受態(tài)細胞的制備
        2.2.6 克隆載體的構建
        2.2.7 熱激法轉化大腸桿菌
        2.2.8 陽性克隆的篩選及測序
        2.2.9 堿法小量提取質粒DNA
        2.2.10 表達載體的構建
        2.2.11 根瘤農(nóng)桿菌感受態(tài)的轉化
        2.2.12 mRNA原位雜交實驗
            2.2.12.1 固定與包埋組織材料
            2.2.12.2 探針制備
            2.2.12.3 探針濃度檢測
            2.2.12.4 組織切片
            2.2.12.5 脫蠟與復水
            2.2.12.6 雜交液的配制
            2.2.12.7 雜交后處理
            2.2.12.8 信號的檢測
        2.2.13 小麥的原生質體轉化
        2.2.14 轉基因小麥的獲得
            2.2.14.1 TaSOC1-like基因RNAi載體的構建
            2.2.14.2 農(nóng)桿菌侵染小麥幼胚的遺傳轉化
        2.2.15 基因組DNA的小量提取
        2.2.16 轉基因小麥分子水平的鑒定
            2.2.16.1 DNA水平轉基因小麥的鑒定
            2.2.16.2 RNA水平的轉基因小麥鑒定
        2.2.17 進化樹的構建
3 結果
    3.1 TaSOC1-like基因的克隆
    3.2 TaSOC1-like蛋白的亞細胞定位
    3.3 TaSOC1-like基因組織表達模式分析
    3.4 TaSOC1-like在小麥穗發(fā)育過程的表達分析
    3.5 TaSOC1-like-RNAi載體的構建及遺傳轉化
    3.6 TaSOC1-like-RNAi轉基因小麥T0 代鑒定
    3.7 TaSOC1-like-RNAi轉基因小麥T1 代表型分析
        3.7.1 TaSOC1-like-RNAi轉基因小麥早花表型及抽穗統(tǒng)計分析
        3.7.2 TaSOC1-like-RNAi轉基因小麥穗發(fā)育各個時期形態(tài)觀察及開始時間統(tǒng)計
    3.8 TaSOC1-like-RNAi株系其它農(nóng)藝性狀的變化
4 討論
5 結論
參考文獻
附錄
致謝


【參考文獻】：
期刊論文
[1]我國完成小麥A基因組測序和圖譜繪制[J]. 佘惠敏.  糧食科技與經(jīng)濟. 2018(05)
[2]高溫和單氰胺對油桃休眠花芽呼吸代謝的影響[J]. 譚鉞,冷傳遠,李玲,徐臣善,陳修德,高東升.  應用生態(tài)學報. 2012(09)
[3]甘肅隴東黃土高原冬小麥對氣候變暖的響應[J]. 王位泰,張?zhí)熹h,黃斌,李宗龍?zhí)?王潤元,楊民,蒲金涌.  生態(tài)學雜志. 2006(07)

博士論文
[1]小麥TaTOC1s基因調控開花與發(fā)育的分子機理研究[D]. 洪坡.山東農(nóng)業(yè)大學 2018

碩士論文
[1]小麥MADS-box基因TaAGL32的功能研究[D]. 王健.山東農(nóng)業(yè)大學 2017



本文編號：3198305