小麥（Triticum aestivum L.）是世界上三大糧食作物之一。其抽穗時(shí)間會(huì)直接影響小麥產(chǎn)量。為理解小麥開花過程的分子調(diào)控機(jī)理,本研究從小麥中分離得到一個(gè)MADS-box基因,命名為SOC1-like,并對(duì)其表達(dá)模式及生物學(xué)功能進(jìn)行了初步探究。主要結(jié)果如下:TaSOC1-like基因具有三個(gè)等位基因,分別定位于6A、6B和6D染色體。三個(gè)基因組基因結(jié)構(gòu)皆含有六個(gè)外顯子和五個(gè)內(nèi)含子,其核苷酸之間的序列同一性高達(dá)97.08%�；蚪M序列全長(zhǎng)分別是6739 bp（TaSOC1-like-6A）、7205 bp（TaSOC1-like-6B）和7029bp（TaSOC1-like-6D）,相應(yīng)的CDS長(zhǎng)度為789 bp、777 bp、780 bp,分別編碼262、258和259個(gè)氨基酸。NCBI數(shù)據(jù)庫蛋白預(yù)測(cè)推斷顯示,TaSOC1-like蛋白屬于典型的MIKC型蛋白,含有MADS-box家族中MEF2-like和K-box兩個(gè)經(jīng)典結(jié)構(gòu)域。進(jìn)化樹分析表明,TaSOC1-like蛋白與其他物種中同源蛋白相比,與大麥HORVU6Hr1G002330編碼的蛋白相似性最高,具有較近的親緣關(guān)系... 

【文章來源】：山東農(nóng)業(yè)大學(xué)山東省

【文章頁數(shù)】：66 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
縮略詞說明
中文摘要
Abstract
1 前言
    1.1 小麥概述
        1.1.1 小麥進(jìn)化起源
        1.1.2 抽穗期對(duì)小麥的影響
    1.2 植物開花調(diào)控
        1.2.1 開花調(diào)控途徑中的相互作用
        1.2.2 光周期途徑
        1.2.3 春化途徑
        1.2.4 自主途徑
        1.2.5 GA途徑
        1.2.6 其他開花調(diào)控途徑
    1.3 花形態(tài)建成
        1.3.1 花器官發(fā)育ABC模型的建立與完善
        1.3.2 MADS-box家族的發(fā)現(xiàn)
        1.3.3 MADS-box基因的結(jié)構(gòu)和功能
    1.4 本研究的目的與意義
2 材料與方法
    2.1 實(shí)驗(yàn)材料
        2.1.1 實(shí)驗(yàn)材料與材料培養(yǎng)條件
        2.1.2 菌株與載體
        2.1.3 酶以及其它生化試劑
        2.1.4 主要儀器
        2.1.5 PCR引物以及序列測(cè)定
    2.2 實(shí)驗(yàn)方法
        2.2.1 試劑盒總RNA的提取
        2.2.2 反轉(zhuǎn)錄cDNA第一鏈的合成
        2.2.3 目的基因TaSOC1-like的克隆
        2.2.4 目的片段的回收與檢測(cè)
        2.2.5 大腸桿菌感受態(tài)細(xì)胞的制備
        2.2.6 克隆載體的構(gòu)建
        2.2.7 熱激法轉(zhuǎn)化大腸桿菌
        2.2.8 陽性克隆的篩選及測(cè)序
        2.2.9 堿法小量提取質(zhì)粒DNA
        2.2.10 表達(dá)載體的構(gòu)建
        2.2.11 根瘤農(nóng)桿菌感受態(tài)的轉(zhuǎn)化
        2.2.12 mRNA原位雜交實(shí)驗(yàn)
            2.2.12.1 固定與包埋組織材料
            2.2.12.2 探針制備
            2.2.12.3 探針濃度檢測(cè)
            2.2.12.4 組織切片
            2.2.12.5 脫蠟與復(fù)水
            2.2.12.6 雜交液的配制
            2.2.12.7 雜交后處理
            2.2.12.8 信號(hào)的檢測(cè)
        2.2.13 小麥的原生質(zhì)體轉(zhuǎn)化
        2.2.14 轉(zhuǎn)基因小麥的獲得
            2.2.14.1 TaSOC1-like基因RNAi載體的構(gòu)建
            2.2.14.2 農(nóng)桿菌侵染小麥幼胚的遺傳轉(zhuǎn)化
        2.2.15 基因組DNA的小量提取
        2.2.16 轉(zhuǎn)基因小麥分子水平的鑒定
            2.2.16.1 DNA水平轉(zhuǎn)基因小麥的鑒定
            2.2.16.2 RNA水平的轉(zhuǎn)基因小麥鑒定
        2.2.17 進(jìn)化樹的構(gòu)建
3 結(jié)果
    3.1 TaSOC1-like基因的克隆
    3.2 TaSOC1-like蛋白的亞細(xì)胞定位
    3.3 TaSOC1-like基因組織表達(dá)模式分析
    3.4 TaSOC1-like在小麥穗發(fā)育過程的表達(dá)分析
    3.5 TaSOC1-like-RNAi載體的構(gòu)建及遺傳轉(zhuǎn)化
    3.6 TaSOC1-like-RNAi轉(zhuǎn)基因小麥T0 代鑒定
    3.7 TaSOC1-like-RNAi轉(zhuǎn)基因小麥T1 代表型分析
        3.7.1 TaSOC1-like-RNAi轉(zhuǎn)基因小麥早花表型及抽穗統(tǒng)計(jì)分析
        3.7.2 TaSOC1-like-RNAi轉(zhuǎn)基因小麥穗發(fā)育各個(gè)時(shí)期形態(tài)觀察及開始時(shí)間統(tǒng)計(jì)
    3.8 TaSOC1-like-RNAi株系其它農(nóng)藝性狀的變化
4 討論
5 結(jié)論
參考文獻(xiàn)
附錄
致謝


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]我國完成小麥A基因組測(cè)序和圖譜繪制[J]. 佘惠敏.  糧食科技與經(jīng)濟(jì). 2018(05)
[2]高溫和單氰胺對(duì)油桃休眠花芽呼吸代謝的影響[J]. 譚鉞,冷傳遠(yuǎn),李玲,徐臣善,陳修德,高東升.  應(yīng)用生態(tài)學(xué)報(bào). 2012(09)
[3]甘肅隴東黃土高原冬小麥對(duì)氣候變暖的響應(yīng)[J]. 王位泰,張?zhí)熹h,黃斌,李宗龍?zhí)?王潤元,楊民,蒲金涌.  生態(tài)學(xué)雜志. 2006(07)

博士論文
[1]小麥TaTOC1s基因調(diào)控開花與發(fā)育的分子機(jī)理研究[D]. 洪坡.山東農(nóng)業(yè)大學(xué) 2018

碩士論文
[1]小麥MADS-box基因TaAGL32的功能研究[D]. 王健.山東農(nóng)業(yè)大學(xué) 2017



本文編號(hào)：3198305