目的觀察消巖湯對WISP2/CCN5基因敲減的MCF-7細胞增殖的抑制作用,以及WISP2/CCN5、Skp2和p27Kip1 mRNA和蛋白水平變化,探索消巖湯抑制WISP2/CCN5基因敲降的MCF-7細胞增殖的分子機制。方法 WISP2/CCN5 shRNA慢病毒質(zhì)粒轉(zhuǎn)染MCF-7細胞,構(gòu)建WISP2/CCN5基因敲減的MCF-7細胞系,采用高、中、低濃度的消巖湯孵育WISP2/CCN5基因敲減的MCF-7細胞24、36及48 h后,檢測細胞增殖抑制率、WISP2/CCN5、Skp2及p27Kip1的mRNA和蛋白水平。結(jié)果 WISP2/CCN5基因敲減的MCF-7細胞增殖抑制率低于空白組和空載組（P<0.05）,消巖湯干預(yù)組細胞增殖抑制率高于WISP2/CCN5基因敲減組（P<0.05）;高濃度消巖湯孵育WISP2/CCN5基因敲減的MCF-7細胞48 h組細胞增殖抑制率高于相同濃度孵育24 h組（P<0.05）。WISP2/CCN5基因敲減組Skp2 mRNA和蛋白水平均高于空白組和空載組（P<0.05,P<0.05）,而p27Kip1 mRNA... 

【文章來源】：廣東醫(yī)學(xué). 2020,41(19)

【文章頁數(shù)】：6 頁

【文章目錄】：
1 材料與方法
    1.1 細胞株
    1.2 實驗藥物
    1.3 試劑
    1.4 方法
        1.4.1 MCF-7細胞培養(yǎng)
        1.4.2 病毒轉(zhuǎn)染構(gòu)建WISP2/CCN5基因敲減的MCF-7細胞
        1.4.3 消巖湯顆粒劑溶解液配制和溶解
        1.4.4 MTT法觀察消巖湯對MCF-7細胞增殖的抑制作用
        1.4.5 熒光定量RT-PCR法檢測相關(guān)因子mRNA水平
        1.4.6 采用Western blot檢測相關(guān)因子蛋白水平
    1.5 統(tǒng)計學(xué)方法
2 結(jié)果
    2.1 消巖湯抑制WISP2/CCN5基因敲減的MCF-7細胞增殖,并與消巖湯濃度和作用時間相關(guān)
    2.2 消巖湯在mRNA水平對WISP2/CCN5、Skp2和p27Kip1 的調(diào)控作用
    2.3 消巖湯在蛋白水平對WISP2/CCN5、Skp2和p27Kip1的調(diào)控作用
3 討論


【參考文獻】：
期刊論文
[1]消巖湯對肺癌干細胞TGF-β/Smad3/MMP-9信號通路的影響[J]. 李小江,張瑩,楊佩穎,孫彬栩,朱津麗,賀斌,孫月紅,姜珊,賈英杰.  中草藥. 2018(05)
[2]消巖湯對肺癌A549細胞及肺癌干細胞遷移及侵襲的影響[J]. 李小江,張瑩,楊佩穎,孫彬栩,易丹,孫月紅,姜珊,賈英杰.  中草藥. 2018(04)
[3]阿帕替尼聯(lián)合消巖湯治療晚期非鱗非小細胞肺癌臨床療效觀察[J]. 李小江,姜珊,郭姍琦,劉宏根,賈英杰.  中國腫瘤臨床. 2017(14)
[4]消巖湯含藥血清介導(dǎo)下Survivin siRNA對人肺腺癌A549細胞增殖及凋亡的影響[J]. 張欣,賈英杰,楊佩穎,張?zhí)N超.  天津中醫(yī)藥. 2017(02)
[5]扶正消巖湯聯(lián)合NP方案治療復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移性乳腺癌[J]. 吳曉麗.  吉林中醫(yī)藥. 2016(09)
[6]2012年中國惡性腫瘤發(fā)病和死亡分析[J]. 陳萬青,鄭榮壽,張思維,曾紅梅,左婷婷,賈漫漫,夏昌發(fā),鄒小農(nóng),赫捷.  中國腫瘤. 2016(01)
[7]Skp2和p27Kip1表達異常與乳腺癌發(fā)生及臨床病理特征的相關(guān)性研究[J]. 呂艷,牛昀,丁秀敏,肖緒祺.  診斷病理學(xué)雜志. 2015(07)
[8]乳腺癌中WISP2的表達及與ER、PR、HER2的關(guān)系研究[J]. 秦燕子,武世伍,馬莉,柴大敏,馮振中,王丹娜,陶儀聲.  中國組織化學(xué)與細胞化學(xué)雜志. 2015(01)



本文編號：3197760