絲裂原活化蛋白激酶（MAPK）信號(hào)通路是生物體內(nèi)重要的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)系統(tǒng)之一,參與介導(dǎo)細(xì)胞生長(zhǎng)、發(fā)育、分裂和分化等多種生理及病理過程。本研究分別克隆獲得了棉鈴蟲Helicoverpa armigera絲裂原活化蛋白激酶家族的重要成員c-Jun氨基末端激酶基因（HaJNK）和p38絲裂原活化蛋白激酶基因（Hap38 MAPK）并對(duì)其進(jìn)行序列和表達(dá)模式分析,利用RT-qPCR、RNAi等技術(shù)研究了這兩個(gè)基因在棉鈴蟲響應(yīng)UV脅迫中的作用。相應(yīng)結(jié)果如下:1.棉鈴蟲c-Jun氨基末端激酶基因HaJNK的克隆及表達(dá)譜分析利用RT-PCR與RACE技術(shù)克隆獲得一個(gè)棉鈴蟲JNK基因并命名為HaJNK（GenBank登錄號(hào):MH719009）,其cDNA序列全長(zhǎng)為2 431 bp,開放閱讀框（ORF）長(zhǎng)1 191 bp,編碼396個(gè)氨基酸,編碼蛋白質(zhì)的相對(duì)分子量為45.01 kD,等電點(diǎn)為6.35,無(wú)跨膜結(jié)構(gòu),無(wú)信號(hào)肽。系統(tǒng)進(jìn)化分析顯示,棉鈴蟲HaJNK與其他昆蟲JNK具有很高的相似性。不同發(fā)育階段表達(dá)分析表明,HaJNK在棉鈴蟲卵、1-6齡幼蟲、蛹、雌成蟲和雄成蟲均有表達(dá),在卵期表達(dá)量最高;組織特異性分析顯... 

【文章來(lái)源】：貴州大學(xué)貴州省 211工程院校

【文章頁(yè)數(shù)】：99 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
第一章 前言
    1 紫外光(UV)與昆蟲
    2 MAPK信號(hào)通路研究
        2.1 JNK信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路
        2.2 p38 MAPK信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路
    3 RNAi在昆蟲中的研究進(jìn)展
        3.1 RNAi的作用機(jī)理
        3.2 RNAi在昆蟲研究中的應(yīng)用
    4 抗氧化酶系統(tǒng)研究
    5 立題依據(jù)
第二章 棉鈴蟲HaJNK基因的克隆及表達(dá)譜分析
    1 實(shí)驗(yàn)材料
        1.1 供試蟲源
        1.2 供試樣品
        1.3 棉鈴蟲幼蟲飼料配方
        1.4 主要儀器
        1.5 主要試劑
        1.6 溶液配制和培養(yǎng)基
    2 實(shí)驗(yàn)方法
        2.1 棉鈴蟲總RNA的提取
        2.2 中間片段的克隆
        2.3 3'端和5'端序列獲得
        2.4 克隆測(cè)序
        2.5 生物信息學(xué)分析
        2.6 時(shí)空表達(dá)分析
        2.7 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)與分析
    3 結(jié)果與分析
        3.1 棉鈴蟲總RNA的提取
        3.2 HaJNK基因的克隆和序列分析
        3.3 HaJNK同源性比對(duì)及系統(tǒng)發(fā)育分析
        3.4 HaJNK基因的表達(dá)模式分析
    4 討論
第三章 棉鈴蟲HaJNK在響應(yīng)UV-A脅迫機(jī)制中的作用研究
    1 實(shí)驗(yàn)材料
        1.1 供試蟲源
        1.2 棉鈴蟲幼蟲飼料配方
        1.3 主要儀器
        1.4 主要試劑
    2 實(shí)驗(yàn)方法
        2.1 棉鈴蟲不同UV-A處理
        2.2 dsRNA引物的設(shè)計(jì)
        2.3 dsRNA的體外合成
        2.4 dsRNA的注射
        2.5 棉鈴蟲總RNA的提取
        2.6 時(shí)空表達(dá)分析
        2.7 棉鈴蟲抗氧化酶活性的研究
        2.8 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)與分析
    3 結(jié)果與分析
        3.1 HaJNK在不同時(shí)長(zhǎng)UV-A脅迫的表達(dá)
        3.2 沉默效率的檢測(cè)
        3.3 UV-A脅迫對(duì)抗氧化酶活性的研究
    4 討論
第四章 棉鈴蟲Hap38 MAPK基因的克隆及表達(dá)譜分析
    1 實(shí)驗(yàn)材料
        1.1 供試蟲源
        1.2 供試樣品
        1.3 棉鈴蟲幼蟲飼料配方
        1.4 主要儀器
        1.5 主要試劑
        1.6 溶液配制和培養(yǎng)基
    2 實(shí)驗(yàn)方法
        2.1 棉鈴蟲總RNA的提取
        2.2 中間片段的克隆
        2.3 3'端和5'端序列獲得
        2.4 克隆測(cè)序
        2.5 生物信息學(xué)分析
        2.6 時(shí)空表達(dá)分析
        2.7 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)與分析
    3 結(jié)果與分析
        3.1 棉鈴蟲總RNA的提取
        3.2 Hap38 MAPK基因的克隆和序列分析
        3.3 Hap38 MAPK同源性比對(duì)及系統(tǒng)發(fā)育分析
        3.4 Hap38 MAPK基因的表達(dá)模式分析
    4 討論
第五章 棉鈴蟲Hap38 MAPK在響應(yīng)UV-A脅迫機(jī)制中的作用研究
    1 實(shí)驗(yàn)材料
        1.1 供試蟲源
        1.2 棉鈴蟲幼蟲飼料配方
        1.3 主要儀器
        1.4 主要試劑
    2 實(shí)驗(yàn)方法
        2.1 棉鈴蟲不同UV-A處理
        2.2 dsRNA引物的設(shè)計(jì)
        2.3 dsRNA的體外合成
        2.4 dsRNA的注射
        2.5 棉鈴蟲總RNA的提取
        2.6 時(shí)空表達(dá)分析
        2.7 棉鈴蟲抗氧化酶活性的研究
        2.8 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)與分析
    3 結(jié)果與分析
        3.1 Hap38 MAPK在不同時(shí)長(zhǎng)UV-A脅迫的表達(dá)
        3.2 沉默效率的檢測(cè)
        3.3 UV-A脅迫對(duì)抗氧化酶活性的研究
    4 討論
第六章 總結(jié)與展望
    1 主要研究結(jié)果
        1.1 棉鈴蟲HaJNK基因的克隆及表達(dá)譜分析
        1.2 棉鈴蟲HaJNK在響應(yīng)UV-A脅迫機(jī)制中的作用研究
        1.3 棉鈴蟲Hap38 MAPK基因的克隆及表達(dá)譜分析
        1.4 棉鈴蟲Hap38 MAPK在響應(yīng)UV-A脅迫機(jī)制中的作用研究
    2 論文創(chuàng)新點(diǎn)
    3 論文不足及展望
致謝
參考文獻(xiàn)
附錄


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]UV-B照射對(duì)煙蚜抗氧化系統(tǒng)的影響[J]. 劉小飛,孟建玉,張瀅,張長(zhǎng)禹.  環(huán)境昆蟲學(xué)報(bào). 2018(06)
[2]棉鈴蟲種群調(diào)查及測(cè)報(bào)技術(shù)[J]. 姜玉英,劉杰,曾娟,楊清坡,陸宴輝.  應(yīng)用昆蟲學(xué)報(bào). 2018 (01)
[3]逆境脅迫對(duì)油菜谷胱甘肽還原酶基因表達(dá)及其酶活性的影響[J]. 張騰國(guó),聶亭亭,孫萬(wàn)倉(cāng),史中飛,王娟.  應(yīng)用生態(tài)學(xué)報(bào). 2018(01)
[4]RNAi技術(shù)的最新研究進(jìn)展[J]. 王偉偉,劉妮,陸沁,凌曉霏,陳航.  生物技術(shù)通報(bào). 2017(11)
[5]不同波長(zhǎng)誘蟲燈對(duì)紅樹林主要害蟲的誘集作用[J]. 王林聰,李志剛,李軍,韓詩(shī)疇.  環(huán)境昆蟲學(xué)報(bào). 2016(05)
[6]紫外線脅迫對(duì)紅色型豌豆蚜生物學(xué)特性的影響[J]. 袁偉寧,朱仰艷,孫小玲,楊巧燕,劉長(zhǎng)仲.  植物保護(hù). 2016(04)
[7]棉鈴蟲發(fā)育歷期的地理變異[J]. 陳元生,涂小云.  環(huán)境昆蟲學(xué)報(bào). 2016(04)
[8]高溫脅迫對(duì)扶桑綿粉蚧成蟲過氧化物酶和谷胱甘肽-S-轉(zhuǎn)移酶活性的影響[J]. 袁盛勇,孔瓊,吳晶瑩,秦文旭,劉小紅,陳振毅,馬廷霞,尹久婷.  環(huán)境昆蟲學(xué)報(bào). 2016(04)
[9]NaCl脅迫對(duì)酸棗幼苗AsA-GSH循環(huán)的影響[J]. 呂新民,楊怡帆,魯曉燕,靳娟,樊新民.  植物生理學(xué)報(bào). 2016(05)
[10]UV-B與重金屬Cd雙重脅迫對(duì)麥長(zhǎng)管蚜種群生長(zhǎng)發(fā)育和繁殖的影響[J]. 王萍,杜一民,楊杰,車文艷,高歡歡,趙惠燕,胡祖慶,胡想順.  昆蟲學(xué)報(bào). 2016(01)

博士論文
[1]UV脅迫下棉鈴蟲生殖補(bǔ)償研究及Hsps基因的克隆與表達(dá)[D]. 張長(zhǎng)禹.華中農(nóng)業(yè)大學(xué) 2010

碩士論文
[1]冷脅迫條件下荒漠昆蟲小胸鱉甲JNK信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路相關(guān)基因的表達(dá)及功能研究[D]. 阮夢(mèng)鴿.新疆大學(xué) 2016
[2]白鰱p38 MAPK,c-fos,c-jun基因克隆及其微囊藻毒素暴露后的表達(dá)分析[D]. 李園園.河南師范大學(xué) 2015
[3]α1，2-巖藻糖轉(zhuǎn)移酶基因轉(zhuǎn)導(dǎo)對(duì)人卵巢癌細(xì)胞RMG-I p38MAPK信號(hào)通路介導(dǎo)的凋亡的影響[D]. 叢建萍.中國(guó)醫(yī)科大學(xué) 2010



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