以甘藍(lán)型油菜幼苗為材料,根據(jù)油脂蛋白Oleosin（O20）基因的啟動子序列設(shè)計引物,PCR擴(kuò)增了長度為935 bp的片段,把該片段連接到pBI101載體,GUS瞬時染色結(jié)果表明,該片段可以驅(qū)動GUS基因在油菜幼苗根部特異性表達(dá)。油菜油脂蛋白是一個蛋白質(zhì)家族,為進(jìn)一步鑒別擴(kuò)增到的935 bp油脂蛋白啟動子,該研究利用油菜基因組信息進(jìn)行序列對比,結(jié)果表明935 bp的啟動子和Oleosin（O20）的啟動子序列之間有較多的變異,但和油菜1號染色體上的序列完全一致;1號染色體上緊跟的編碼框序列和油脂蛋白Oleosin（O20）的編碼框序列也完全一致,但油脂蛋白Oleosin（O20）的基因組序列要比油菜1號染色體的基因組序列短。通過PLACE和PlantCARE軟件對935 bp啟動子進(jìn)行了掃描預(yù)測,結(jié)果表明該啟動子中含有許多順式作用元件,尤其是脫落酸、茉莉酸甲酯和水楊酸這3個與激素有關(guān)的元件;將該研究擴(kuò)增到的另一個928 bp長度的啟動子與935 bp的啟動子相比,前者啟動子區(qū)域水楊酸順式作用元件缺少了1個堿基,同時也缺失了1個堿基的片段,這些序列的變化可能是該啟動子喪失活力的原因。 

【文章來源】：安徽農(nóng)業(yè)科學(xué). 2020,48(22)

【文章頁數(shù)】：6 頁

【文章目錄】：
1 材料與方法
    1.1 菌株和載體
    1.2 試劑
    1.3 油菜總DNA的提取
    1.4 Oleosin啟動子的擴(kuò)增與相關(guān)載體的構(gòu)建
        1.4.1 Oleosin啟動子的擴(kuò)增。
        1.4.2 重組表達(dá)載體的構(gòu)建。
    1.5 重組質(zhì)粒的篩選和轉(zhuǎn)化
    1.6 農(nóng)桿菌介導(dǎo)油菜愈傷組織的轉(zhuǎn)化
    1.7 GUS染色與瞬時表達(dá)
2 結(jié)果與分析
    2.1 Oleosin基因啟動子的擴(kuò)增
    2.2 Oleosin基因啟動子序列比對
    2.3 GUS基因瞬時表達(dá)檢測
    2.4 油菜啟動子中的順式作用元件
3 結(jié)論與討論


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]植物油質(zhì)蛋白的結(jié)構(gòu)、功能及應(yīng)用[J]. 孫靜,姜宇,陶俊.  植物生理學(xué)報. 2018(03)
[2]谷子Oleosin基因家族及其對干旱響應(yīng)的分析[J]. 蔣茂雙,元香梅,劉曉東,候蕊,蘇彥冰,郭展,于世慧,李紅英.  山西農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(自然科學(xué)版). 2018(01)
[3]植物生物反應(yīng)器研究進(jìn)展[J]. 龐俊峰,黃東光,吳燕民.  生物技術(shù)通報. 2011(01)
[4]植物油體表達(dá)體系的研究進(jìn)展[J]. 劉昱輝,賈士榮.  農(nóng)業(yè)生物技術(shù)學(xué)報. 2003(05)

博士論文
[1]植物油體表達(dá)體系的建立及Profilin2維管束特異表達(dá)啟動子的區(qū)段缺失分析[D]. 劉昱輝.中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院 2001

碩士論文
[1]利用油菜油體系統(tǒng)表達(dá)重組人胰島素原的研究[D]. 張冉.上海師范大學(xué) 2010



本文編號：3194951