高溫誘導(dǎo)尼羅羅非魚(yú)雌魚(yú)性腺細(xì)胞凋亡及相關(guān)基因表達(dá)變化的研究
發(fā)布時(shí)間:2021-05-13 16:09
性別決定對(duì)于生物有重要意義,是研究熱點(diǎn)之一。在脊椎動(dòng)物中,大約存在三種性別決定機(jī)制:分別為基因型性別決定(Genetic sex determination,GSD)、環(huán)境依賴型性別決定(Environment-dependent Sex Determination,ESD)和基因-環(huán)境型性別決定(Genetic sex determination+Temperature Effect,GSD+TE);-環(huán)境型性別決定常見(jiàn)的為基因-溫度性別決定。尼羅羅非魚(yú)生長(zhǎng)迅速,雄魚(yú)生長(zhǎng)遠(yuǎn)遠(yuǎn)大于雌魚(yú),性成熟早,繁殖力強(qiáng),營(yíng)養(yǎng)價(jià)值高,早在1995年就發(fā)現(xiàn)尼羅羅非魚(yú)是一種基因-溫度型性別決定(GSD+TE)的魚(yú)類(Baroiller et al,1995)。在尼羅羅非魚(yú)性腺分化的關(guān)鍵時(shí)期,即受精后10至20天,高溫誘導(dǎo)可使雌魚(yú)性逆轉(zhuǎn)為雄魚(yú)。那么高溫誘導(dǎo)尼羅羅非魚(yú)雌魚(yú)性逆轉(zhuǎn)的理論機(jī)制是什么,在尼羅羅非魚(yú)雌魚(yú)性逆轉(zhuǎn)的過(guò)程中,雌魚(yú)性腺細(xì)胞具體如何變化,是否會(huì)存在雌魚(yú)生殖細(xì)胞與體細(xì)胞的凋亡,如果凋亡的話,會(huì)在哪一時(shí)期凋亡,具體性腺細(xì)胞會(huì)產(chǎn)生怎樣的變化,這些問(wèn)題目前還不是很清楚。為了解高溫對(duì)尼羅羅非魚(yú)性腺發(fā)育...
【文章來(lái)源】:山東農(nóng)業(yè)大學(xué)山東省
【文章頁(yè)數(shù)】:45 頁(yè)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【文章目錄】:
中文摘要
Abstract
1 前言
1.1 脊椎動(dòng)物的性別決定類型
1.1.1 遺傳性別決定
1.1.2 環(huán)境依賴型性別決定
1.1.3 基因-溫度性別決定
1.2 魚(yú)類精巢、卵巢形態(tài)結(jié)構(gòu)及發(fā)育的概況
1.3 高溫誘導(dǎo)對(duì)魚(yú)類的影響及魚(yú)類性腺細(xì)胞的發(fā)育
1.4 細(xì)胞凋亡簡(jiǎn)介
1.4.1 細(xì)胞凋亡概念
1.4.2 細(xì)胞凋亡生物學(xué)意義
1.4.3 細(xì)胞凋亡檢測(cè)方法
1.4.4 細(xì)胞凋亡相關(guān)基因
1.5 魚(yú)類細(xì)胞凋亡的相關(guān)研究
1.6 本研究的目的意義
2 材料與方法
2.1 試驗(yàn)材料
2.1.1 尼羅羅非魚(yú)全雌家系建立與試驗(yàn)處理
2.1.2 樣品的采集
2.2 試驗(yàn)儀器及試劑
2.2.1 試驗(yàn)儀器
2.2.2 試驗(yàn)試劑
2.3 主要數(shù)據(jù)庫(kù)及軟件
2.4 試驗(yàn)方法
2.4.1 尼羅羅非魚(yú)性腺石蠟切片的制備
2.4.2 性腺組織學(xué)檢測(cè)
2.4.3 測(cè)量體長(zhǎng)全長(zhǎng)
2.4.4 TUNEL技術(shù)步驟
2.4.5 qRT-PCR引物來(lái)源及設(shè)計(jì)
2.4.6 總RNA的提取
2.4.7 第一鏈cDNA的合成
2.4.8 反轉(zhuǎn)錄模板的檢測(cè)
2.4.9 實(shí)時(shí)熒光定量PCR(qRT-PCR)
2.4.10 標(biāo)準(zhǔn)曲線的建立和重復(fù)性分析
2.4.11 數(shù)據(jù)分析
3 結(jié)果與分析
3.1 高溫誘導(dǎo)下尼羅羅非魚(yú)體長(zhǎng)全長(zhǎng)
3.2 尼羅羅非魚(yú)性腺組織學(xué)檢測(cè)
3.3 高溫誘導(dǎo)尼羅羅非魚(yú)雄性率
3.4 末端脫氧核苷酸轉(zhuǎn)移酶介導(dǎo)的dUTP缺口末端標(biāo)記測(cè)定性腺細(xì)胞凋亡
3.5 高溫誘導(dǎo)后尼羅羅非魚(yú)促凋亡和抑凋亡基因的差異表達(dá)
3.5.1 RNA質(zhì)量的檢測(cè)
3.5.2 反轉(zhuǎn)錄合成cDNA模板
3.5.3 持家基因和目的基因標(biāo)準(zhǔn)曲線的建立
3.5.4 高溫誘導(dǎo)對(duì)凋亡基因表達(dá)的影響
4 討論
4.1 高溫誘導(dǎo)對(duì)尼羅羅非魚(yú)不同家系性逆轉(zhuǎn)率的影響
4.2 高溫誘導(dǎo)對(duì)尼羅羅非魚(yú)不同日齡段性腺組織學(xué)的影響
4.3 高溫誘導(dǎo)對(duì)尼羅羅非魚(yú)中相關(guān)凋亡基因的影響
5 結(jié)論
參考文獻(xiàn)
致謝
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]黃顙魚(yú)性別決定和分化相關(guān)基因的鑒定及其在性腺中的表達(dá)分析[J]. 謝彬月,熊舒婷,梅潔. 湖北農(nóng)業(yè)科學(xué). 2017(12)
[2]硬骨魚(yú)類性別決定與分化相關(guān)基因研究進(jìn)展[J]. 李永婧,吳利敏,李學(xué)軍. 河南師范大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版). 2017(04)
[3]用模式生物青鳉概觀硬骨魚(yú)性別決定及性分化研究進(jìn)展[J]. 亢逸,關(guān)桂君,洪云漢. 遺傳. 2017(06)
[4]遺傳和溫度因素對(duì)魚(yú)類性別分化相關(guān)基因表達(dá)及性別比例的影響[J]. 閆浩,梁利群,常玉梅,孫博,蘇寶鋒. 大連海洋大學(xué)學(xué)報(bào). 2017(01)
[5]Caspase細(xì)胞凋亡通路在魚(yú)類中的研究進(jìn)展[J]. 張?jiān)邬i,馮建軍. 安徽農(nóng)業(yè)科學(xué). 2016(11)
[6]調(diào)控魚(yú)類性腺分化基因的研究進(jìn)展[J]. 鄭堯,王在照,陳家長(zhǎng). 水生生物學(xué)報(bào). 2015(04)
[7]外源性及內(nèi)源性細(xì)胞凋亡機(jī)制研究進(jìn)展[J]. 鐘明,魏玲玲,楊顯富,鄧紹平. 實(shí)用醫(yī)院臨床雜志. 2014(02)
[8]脊椎動(dòng)物性別決定基因與性染色體演化機(jī)制[J]. 邵長(zhǎng)偉,陳松林. 農(nóng)業(yè)生物技術(shù)學(xué)報(bào). 2012(12)
[9]FOXL2與脊椎動(dòng)物性別決定研究進(jìn)展[J]. 魯毅,李任峰,徐萍,李學(xué)斌,劉衛(wèi),王三虎. 河南農(nóng)業(yè)科學(xué). 2012(01)
[10]魚(yú)類性別決定機(jī)制及相關(guān)基因研究進(jìn)展[J]. 李云航,孫鵬. 現(xiàn)代漁業(yè)信息. 2011(12)
博士論文
[1]HERP在小鼠卵泡顆粒細(xì)胞凋亡中的作用及其機(jī)制研究[D]. 陳風(fēng)雷.西北農(nóng)林科技大學(xué) 2016
[2]冷凍保存對(duì)豬卵母細(xì)胞凋亡模式與基因表達(dá)的影響[D]. 戴建軍.南京農(nóng)業(yè)大學(xué) 2015
[3]尼羅羅非魚(yú)性別特異分子標(biāo)記的篩選、應(yīng)用及性別決定候選基因sdY的分子克隆[D]. 孫運(yùn)侶.西南大學(xué) 2013
[4]豬卵泡顆粒細(xì)胞凋亡及幾種影響因素的研究[D]. 劉忠華.東北農(nóng)業(yè)大學(xué) 2000
碩士論文
[1]性類固醇激素在尼羅羅非魚(yú)性別決定與分化中的作用[D]. 蔣小龍.西南大學(xué) 2014
[2]降雄激素對(duì)多囊卵巢綜合征患者卵丘顆粒細(xì)胞凋亡的影響[D]. 夏小璐.南方醫(yī)科大學(xué) 2014
[3]孵化溫度對(duì)烏龜性別決定基因表達(dá)的影響[D]. 湯文琦.杭州師范大學(xué) 2013
[4]大黃魚(yú)原始生殖細(xì)胞發(fā)生、遷移及性腺性別分化的組織學(xué)研究[D]. 游秀容.集美大學(xué) 2012
[5]刀鱭(Coilia nasus)性腺發(fā)育、人工繁殖及早期生活史的研究[D]. 徐鋼春.南京農(nóng)業(yè)大學(xué) 2010
[6]溫度及酒精對(duì)牛卵母細(xì)胞和早期胚胎凋亡的影響[D]. 劉鵬.中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院 2009
[7]紅鯽繁殖周期與內(nèi)分泌生理功能研究[D]. 姚珺.中國(guó)海洋大學(xué) 2008
本文編號(hào):3184318
【文章來(lái)源】:山東農(nóng)業(yè)大學(xué)山東省
【文章頁(yè)數(shù)】:45 頁(yè)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
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中文摘要
Abstract
1 前言
1.1 脊椎動(dòng)物的性別決定類型
1.1.1 遺傳性別決定
1.1.2 環(huán)境依賴型性別決定
1.1.3 基因-溫度性別決定
1.2 魚(yú)類精巢、卵巢形態(tài)結(jié)構(gòu)及發(fā)育的概況
1.3 高溫誘導(dǎo)對(duì)魚(yú)類的影響及魚(yú)類性腺細(xì)胞的發(fā)育
1.4 細(xì)胞凋亡簡(jiǎn)介
1.4.1 細(xì)胞凋亡概念
1.4.2 細(xì)胞凋亡生物學(xué)意義
1.4.3 細(xì)胞凋亡檢測(cè)方法
1.4.4 細(xì)胞凋亡相關(guān)基因
1.5 魚(yú)類細(xì)胞凋亡的相關(guān)研究
1.6 本研究的目的意義
2 材料與方法
2.1 試驗(yàn)材料
2.1.1 尼羅羅非魚(yú)全雌家系建立與試驗(yàn)處理
2.1.2 樣品的采集
2.2 試驗(yàn)儀器及試劑
2.2.1 試驗(yàn)儀器
2.2.2 試驗(yàn)試劑
2.3 主要數(shù)據(jù)庫(kù)及軟件
2.4 試驗(yàn)方法
2.4.1 尼羅羅非魚(yú)性腺石蠟切片的制備
2.4.2 性腺組織學(xué)檢測(cè)
2.4.3 測(cè)量體長(zhǎng)全長(zhǎng)
2.4.4 TUNEL技術(shù)步驟
2.4.5 qRT-PCR引物來(lái)源及設(shè)計(jì)
2.4.6 總RNA的提取
2.4.7 第一鏈cDNA的合成
2.4.8 反轉(zhuǎn)錄模板的檢測(cè)
2.4.9 實(shí)時(shí)熒光定量PCR(qRT-PCR)
2.4.10 標(biāo)準(zhǔn)曲線的建立和重復(fù)性分析
2.4.11 數(shù)據(jù)分析
3 結(jié)果與分析
3.1 高溫誘導(dǎo)下尼羅羅非魚(yú)體長(zhǎng)全長(zhǎng)
3.2 尼羅羅非魚(yú)性腺組織學(xué)檢測(cè)
3.3 高溫誘導(dǎo)尼羅羅非魚(yú)雄性率
3.4 末端脫氧核苷酸轉(zhuǎn)移酶介導(dǎo)的dUTP缺口末端標(biāo)記測(cè)定性腺細(xì)胞凋亡
3.5 高溫誘導(dǎo)后尼羅羅非魚(yú)促凋亡和抑凋亡基因的差異表達(dá)
3.5.1 RNA質(zhì)量的檢測(cè)
3.5.2 反轉(zhuǎn)錄合成cDNA模板
3.5.3 持家基因和目的基因標(biāo)準(zhǔn)曲線的建立
3.5.4 高溫誘導(dǎo)對(duì)凋亡基因表達(dá)的影響
4 討論
4.1 高溫誘導(dǎo)對(duì)尼羅羅非魚(yú)不同家系性逆轉(zhuǎn)率的影響
4.2 高溫誘導(dǎo)對(duì)尼羅羅非魚(yú)不同日齡段性腺組織學(xué)的影響
4.3 高溫誘導(dǎo)對(duì)尼羅羅非魚(yú)中相關(guān)凋亡基因的影響
5 結(jié)論
參考文獻(xiàn)
致謝
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]黃顙魚(yú)性別決定和分化相關(guān)基因的鑒定及其在性腺中的表達(dá)分析[J]. 謝彬月,熊舒婷,梅潔. 湖北農(nóng)業(yè)科學(xué). 2017(12)
[2]硬骨魚(yú)類性別決定與分化相關(guān)基因研究進(jìn)展[J]. 李永婧,吳利敏,李學(xué)軍. 河南師范大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版). 2017(04)
[3]用模式生物青鳉概觀硬骨魚(yú)性別決定及性分化研究進(jìn)展[J]. 亢逸,關(guān)桂君,洪云漢. 遺傳. 2017(06)
[4]遺傳和溫度因素對(duì)魚(yú)類性別分化相關(guān)基因表達(dá)及性別比例的影響[J]. 閆浩,梁利群,常玉梅,孫博,蘇寶鋒. 大連海洋大學(xué)學(xué)報(bào). 2017(01)
[5]Caspase細(xì)胞凋亡通路在魚(yú)類中的研究進(jìn)展[J]. 張?jiān)邬i,馮建軍. 安徽農(nóng)業(yè)科學(xué). 2016(11)
[6]調(diào)控魚(yú)類性腺分化基因的研究進(jìn)展[J]. 鄭堯,王在照,陳家長(zhǎng). 水生生物學(xué)報(bào). 2015(04)
[7]外源性及內(nèi)源性細(xì)胞凋亡機(jī)制研究進(jìn)展[J]. 鐘明,魏玲玲,楊顯富,鄧紹平. 實(shí)用醫(yī)院臨床雜志. 2014(02)
[8]脊椎動(dòng)物性別決定基因與性染色體演化機(jī)制[J]. 邵長(zhǎng)偉,陳松林. 農(nóng)業(yè)生物技術(shù)學(xué)報(bào). 2012(12)
[9]FOXL2與脊椎動(dòng)物性別決定研究進(jìn)展[J]. 魯毅,李任峰,徐萍,李學(xué)斌,劉衛(wèi),王三虎. 河南農(nóng)業(yè)科學(xué). 2012(01)
[10]魚(yú)類性別決定機(jī)制及相關(guān)基因研究進(jìn)展[J]. 李云航,孫鵬. 現(xiàn)代漁業(yè)信息. 2011(12)
博士論文
[1]HERP在小鼠卵泡顆粒細(xì)胞凋亡中的作用及其機(jī)制研究[D]. 陳風(fēng)雷.西北農(nóng)林科技大學(xué) 2016
[2]冷凍保存對(duì)豬卵母細(xì)胞凋亡模式與基因表達(dá)的影響[D]. 戴建軍.南京農(nóng)業(yè)大學(xué) 2015
[3]尼羅羅非魚(yú)性別特異分子標(biāo)記的篩選、應(yīng)用及性別決定候選基因sdY的分子克隆[D]. 孫運(yùn)侶.西南大學(xué) 2013
[4]豬卵泡顆粒細(xì)胞凋亡及幾種影響因素的研究[D]. 劉忠華.東北農(nóng)業(yè)大學(xué) 2000
碩士論文
[1]性類固醇激素在尼羅羅非魚(yú)性別決定與分化中的作用[D]. 蔣小龍.西南大學(xué) 2014
[2]降雄激素對(duì)多囊卵巢綜合征患者卵丘顆粒細(xì)胞凋亡的影響[D]. 夏小璐.南方醫(yī)科大學(xué) 2014
[3]孵化溫度對(duì)烏龜性別決定基因表達(dá)的影響[D]. 湯文琦.杭州師范大學(xué) 2013
[4]大黃魚(yú)原始生殖細(xì)胞發(fā)生、遷移及性腺性別分化的組織學(xué)研究[D]. 游秀容.集美大學(xué) 2012
[5]刀鱭(Coilia nasus)性腺發(fā)育、人工繁殖及早期生活史的研究[D]. 徐鋼春.南京農(nóng)業(yè)大學(xué) 2010
[6]溫度及酒精對(duì)牛卵母細(xì)胞和早期胚胎凋亡的影響[D]. 劉鵬.中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院 2009
[7]紅鯽繁殖周期與內(nèi)分泌生理功能研究[D]. 姚珺.中國(guó)海洋大學(xué) 2008
本文編號(hào):3184318
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