目的:自噬是一種存在于所有真核細(xì)胞中,進(jìn)化上高度保守的溶酶體依賴的物質(zhì)降解過程;主要通過包裹細(xì)胞內(nèi)異常蛋白質(zhì)和受損細(xì)胞器等“廢舊物”后形成自噬小體,再與溶酶體融合形成自噬溶酶體,進(jìn)行物質(zhì)的降解,而后將分解的產(chǎn)物進(jìn)行回收利用。近年來研究發(fā)現(xiàn),自噬缺陷可導(dǎo)致某些肺組織疾病的發(fā)生。我們課題組前期工作發(fā)現(xiàn):與同窩對照組相比,自噬相關(guān)基因-7（Autophagy-related gene 7,Atg7）全身敲除小鼠體積明顯減輕、發(fā)紺、呼吸困難并在出生12h內(nèi)死亡等現(xiàn)象。這些表型與臨床上新生兒呼吸窘迫綜合征患者極為相似。肺泡II型（alveolar type II,ATII）細(xì)胞分泌到肺泡腔的肺表面活性物質(zhì)（pulmonary surfactant,PS）減少,而在ATII細(xì)胞中合成、儲存和分泌PS的細(xì)胞器正是板層小體（lamellar bodies,LBs）。本次實驗主要研究自噬的缺陷對ATII細(xì)胞及其特異細(xì)胞器LBs的影響。然而Atg7全身敲除小鼠在出生后不久死亡,所以我們繁育出支氣管肺泡上皮特異性Atg7缺陷小鼠(Atg7^SPC),并對其出生第1天內(nèi)（P0）和90天（P... 

【文章來源】：中國醫(yī)科大學(xué)遼寧省

【文章頁數(shù)】：49 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
英語縮略詞
1前言
2 材料與方法
    2.1 實驗材料
        2.1.1 抗體
        2.1.2 主要試劑及試劑盒
        2.1.3 主要儀器設(shè)備
    2.2 實驗方法
        2.2.1 小鼠模型
        2.2.2 小鼠基因型鑒定
        2.2.3 q RT PCR
        2.2.4 免疫印跡(Western Blot)
        2.2.5 小鼠肺組織的取材與石蠟切片的制備
        2.2.6 HE染色
        2.2.7 免疫組化
        2.2.8 電鏡
        2.2.9 Masson染色
        2.2.10 生化分析儀
        2.2.11 數(shù)據(jù)分析
3 實驗結(jié)果
    3.1 支氣管肺泡上皮特異性Atg7缺陷小鼠模型及驗證
    3.2 Atg7~(SPC)新生小鼠(P0)肺泡壁增厚和肺泡腔面積減少
    3.3 Atg7~(SPC)新生小鼠ATII細(xì)胞的功能異常,板層小體變小
    3.4 Atg7~(SPC)小鼠(P90)肺泡壁增厚和肺泡腔面積減少
    3.5 Atg7~(SPC)小鼠(P90)ATII細(xì)胞增生、肥大,板層小體異常增大
    3.6 Atg7~(SPC)小鼠(P90)肺功能無明顯變化,肺部組織纖維化程度無明顯差異
    3.7 小鼠肺泡II型細(xì)胞和板層小體的模式圖
4 討論
本研究創(chuàng)新性的自我評價
參考文獻(xiàn)
綜述
    參考文獻(xiàn)
攻讀學(xué)位期間取得的研究成果
致謝
個人簡歷



本文編號：3183080