目的 探究抑癌基因SASH1抑制乳腺癌轉(zhuǎn)移的作用機(jī)制及Notch1信號通路在其中的作用。方法 將已經(jīng)構(gòu)建的人SASH1真核表達(dá)載體pcDNA3.1（+）-SASH1,轉(zhuǎn)染進(jìn)人乳腺癌細(xì)胞中,通過G418篩選建立SASH1基因過表達(dá)的人乳腺癌SASH1穩(wěn)定表達(dá)細(xì)胞系,以轉(zhuǎn)染空載體作為對照組。利用RT-qPCR、Western Blot方法驗證穩(wěn)定表達(dá)細(xì)胞系中SASH1的mRNA和蛋白表達(dá)水平。應(yīng)用Western blot和RT-qPCR檢測細(xì)胞信號通路Notch1相關(guān)基因的表達(dá),以判定其活化狀態(tài)。通過細(xì)胞劃痕實驗,檢測過表達(dá)組和對照組細(xì)胞的遷移能力。并利用Kaplan-Meier數(shù)據(jù)庫,進(jìn)行SASH1基因表達(dá)高低對乳腺癌患者生存期的影響。結(jié)果 成功獲得人SASH1過表達(dá)的乳腺癌MCF7和MDA-MB231穩(wěn)定表達(dá)細(xì)胞系。過表達(dá)組和對照組乳腺癌細(xì)胞遷移能力,劃痕實驗24小時,兩組細(xì)胞差距無統(tǒng)計學(xué)意義。48小時,SASH1高表達(dá)組距離較對照組分別寬`x=1.4mm和`x=1.7mm;具有統(tǒng)計學(xué)意義（p<0.05）。SASH1過表達(dá)后,Notch1的表達(dá)下降,表明SASH1抑制Notch1... 

【文章來源】：華北理工大學(xué)河北省

【文章頁數(shù)】：43 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
abstract
英文縮略表
引言
第1章 實驗研究
    1.1 材料與方法
        1.1.1 MCF7和MDA-MB231細(xì)胞的培養(yǎng)及轉(zhuǎn)染
        1.1.2 鑒定穩(wěn)定轉(zhuǎn)染SASH1基因的MCF7和MDA-MB231細(xì)胞
        1.1.3 細(xì)胞劃痕實驗檢測細(xì)胞遷移能力
        1.1.4 統(tǒng)計學(xué)分析
    1.2 結(jié)果
        1.2.1 建立穩(wěn)定轉(zhuǎn)染SASH1的MCF7和MDA-MB231細(xì)胞系
        1.2.2 體外驗證SASH1過表達(dá)后對細(xì)胞遷移能力的影響
        1.2.3 SASH1過表達(dá)后對Notch1信號通路的影響
        1.2.4 利用數(shù)據(jù)庫分析SASH1基因?qū)θ橄侔┥嫫诘挠绊?br>    1.3 討論
        1.3.1 SASH1基因與腫瘤關(guān)系
        1.3.2 Notch信號通路在癌細(xì)胞轉(zhuǎn)移中的作用
        1.3.3 SASH1基因在腫瘤EMT發(fā)生中的展望
    1.4 小結(jié)
    參考文獻(xiàn)
第2章 綜述 SASH1基因過表達(dá)抑制乳腺癌細(xì)胞增殖與轉(zhuǎn)移
    2.1 SASH1基因簡介
    2.2 SASH1基因與腫瘤關(guān)系
    2.3 SASH1基因與細(xì)胞凋亡
    2.4 SASH1基因與甲基化
    2.5 SASH1基因融合
    2.6 Notch-1信號通路簡介
    2.7 Notch-1信號通路與腫瘤
    參考文獻(xiàn)
結(jié)論
致謝
導(dǎo)師簡介
作者簡介
學(xué)位論文數(shù)據(jù)集


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]NSCLC對EGFR-TKI獲得性耐藥機(jī)制及其策略的研究進(jìn)展[J]. 黃歡,姚文秀.  腫瘤預(yù)防與治療. 2016(05)
[2]SASH1基因在食管鱗癌中的表達(dá)及臨床意義[J]. 劉秋菊,賀遠(yuǎn)龍,劉紅云,衛(wèi)紅軍,許琳,王青.  世界華人消化雜志. 2013(22)
[3]CpG島甲基化和人類腫瘤[J]. 徐國茂.  中國藥業(yè). 2008(09)

博士論文
[1]TMPRSS4表達(dá)在調(diào)控乳腺癌侵襲轉(zhuǎn)移中的作用及相關(guān)機(jī)制研究[D]. 李曉梅.山東大學(xué) 2017



本文編號：3181676