目的觀察中藥復(fù)方-還腦益聰方提取物（Huannao Yicong decoction,HYD）含藥血清對β-淀粉樣前蛋白swe基因（APPswe）人類早老素（PSEN1d E9,PS1）和早老蛋白1d E9基因（PSEN1d E9）人鼠淀粉樣前蛋白融合體（APPswe,APP）雙基因轉(zhuǎn)染人胚腎293（human embryonic kidney 293,HEK293）細(xì)胞γ分泌酶活性及相關(guān)蛋白的影響,分析含藥血清影響γ分泌酶活性相關(guān)蛋白的作用機(jī)制。方法以人APP/PS1雙基因轉(zhuǎn)染（HEK293）人胚腎細(xì)胞株為載體,將其分為5組,分別為空白組,7.5%HYD含藥血清組,15%HYD含藥血清組,HYD直接給藥組,γ分泌酶抑制劑-DAPT組,復(fù)蘇傳代后采用細(xì)胞計數(shù)試劑盒CCK-8（cell counting kit-8,CCK-8）法檢測HYD含藥血清（大鼠灌胃10 d,取血清并進(jìn)行血藥成分檢測）對人APP/PS1雙基因轉(zhuǎn)染細(xì)胞的生長活力和超微結(jié)構(gòu)的影響;透射電鏡觀察各組細(xì)胞超微結(jié)構(gòu);雙熒光素酶基因檢測γ分泌酶活性;蛋白質(zhì)印跡法（Western blot）檢測γ分泌酶組件及相關(guān)蛋白早老素1（... 

【文章來源】：中國藥理學(xué)通報. 2017,33(03)北大核心CSCD

【文章頁數(shù)】：10 頁

【文章目錄】：
1 材料與方法
    1.1 動物、細(xì)胞株與藥物
    1.2 細(xì)胞的體外培養(yǎng)與傳代
    1.3 含藥血清的制備
    1.4 分組與給藥
    1.5 透射電鏡觀察
    1.6 γ分泌酶活性檢測
    1.7 Western blot檢測
    1.8 統(tǒng)計學(xué)方法
2 結(jié)果
    2.1 HYD有效組分測定
    2.2 不同濃度HYD含藥血清對細(xì)胞株活性的影響
    2.3 HYD含藥血清對γ分泌酶活性的影響
    2.4 HYD含藥血清對γ分泌酶相關(guān)組件表達(dá)的影響
        2.4.1 HYD含藥血清對人APP/PS1雙基因轉(zhuǎn)染細(xì)胞株P(guān)S1蛋白表達(dá)電泳圖的影響
        2.4.2 HYD含藥血清對人APP/PS1雙基因轉(zhuǎn)染細(xì)胞株CHIP蛋白表達(dá)灰度值的影響
        2.4.3 HYD含藥血清對人APP/PS1雙基因轉(zhuǎn)染細(xì)胞株CDC42蛋白表達(dá)灰度值的影響
        2.4.4 HYD含藥血清對人APP/PS1雙基因轉(zhuǎn)染細(xì)胞株Aph-1α蛋白表達(dá)灰度值的影響
        2.4.5 HYD含藥血清對人APP/PS1雙基因轉(zhuǎn)染細(xì)胞株HIF-1α蛋白表達(dá)灰度值的影響
    2.5 APP/PS1雙基因轉(zhuǎn)染細(xì)胞株超微結(jié)構(gòu)的改變
        2.5.1線粒體
        2.5.2 脂褐素
3 討論


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]大黃及大黃蒽醌類有效成分對胰腺腺泡細(xì)胞損傷的保護(hù)作用[J]. 吳麗,徐春蕾,季易彥,蔡寶昌.  中藥新藥與臨床藥理. 2014(05)
[2]還腦益聰方提取物對淀粉樣前體蛋白/早老蛋白1雙轉(zhuǎn)基因癡呆模型小鼠學(xué)習(xí)記憶能力的改善作用及其機(jī)制[J]. 劉美霞,劉劍剛,李浩,劉龍濤,梁琳,胡佳,魏蕓.  中國藥理學(xué)與毒理學(xué)雜志. 2014(01)
[3]γ-分泌酶、淀粉樣前體蛋白和早老蛋白1在阿爾采末病中相關(guān)性的研究進(jìn)展[J]. 韋云,劉劍剛,李浩,唐旭東.  中國藥理學(xué)通報. 2014(02)
[4]還腦益聰方對快速老化小鼠腦組織氧化應(yīng)激及炎性因子的影響[J]. 田芳,梁琳,劉劍剛,李浩.  北京中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報. 2013(11)
[5]鹽酸小檗堿含藥血清與血漿抗鼻咽癌CNE-1細(xì)胞作用的比較分析[J]. 李彩虹,彭罡,李錦云,王效軍,徐德峰,周克元.  醫(yī)學(xué)研究生學(xué)報. 2013(07)
[6]還腦益聰方提取物對APP轉(zhuǎn)基因小鼠腦組織Aβ生成相關(guān)因子和學(xué)習(xí)記憶行為的影響[J]. 李浩,劉明芳,劉劍剛,劉龍濤,官杰,蔡琳琳,胡佳,魏蕓.  中國中西醫(yī)結(jié)合雜志. 2013(01)
[7]原人參三醇組皂苷和人參皂苷-Re對MPP+誘導(dǎo)的SH-SY5Y細(xì)胞損傷的保護(hù)作用[J]. 李東薇,竇德強(qiáng).  神經(jīng)藥理學(xué)報. 2011(05)
[8]含二苯乙烯苷大鼠血清對NG108-15癡呆模型細(xì)胞的影響[J]. 黃忠仕,謝海源,張樹球,李韜,農(nóng)嵩,李曙波.  中國藥房. 2009(25)
[9]健康大鼠服用益腎通絡(luò)方后血清中阿魏酸的RP-HPLC測定[J]. 金紅,李雅,凌曉,楊智,盧岳華.  湖南師范大學(xué)學(xué)報(醫(yī)學(xué)版). 2007(04)



本文編號：3179947