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還腦益聰方提取物含藥血清對(duì)APP/PS1雙基因轉(zhuǎn)染細(xì)胞γ分泌酶活性及相關(guān)蛋白表達(dá)的影響

發(fā)布時(shí)間:2021-05-10 19:42
  目的觀(guān)察中藥復(fù)方-還腦益聰方提取物(Huannao Yicong decoction,HYD)含藥血清對(duì)β-淀粉樣前蛋白swe基因(APPswe)人類(lèi)早老素(PSEN1d E9,PS1)和早老蛋白1d E9基因(PSEN1d E9)人鼠淀粉樣前蛋白融合體(APPswe,APP)雙基因轉(zhuǎn)染人胚腎293(human embryonic kidney 293,HEK293)細(xì)胞γ分泌酶活性及相關(guān)蛋白的影響,分析含藥血清影響γ分泌酶活性相關(guān)蛋白的作用機(jī)制。方法以人APP/PS1雙基因轉(zhuǎn)染(HEK293)人胚腎細(xì)胞株為載體,將其分為5組,分別為空白組,7.5%HYD含藥血清組,15%HYD含藥血清組,HYD直接給藥組,γ分泌酶抑制劑-DAPT組,復(fù)蘇傳代后采用細(xì)胞計(jì)數(shù)試劑盒CCK-8(cell counting kit-8,CCK-8)法檢測(cè)HYD含藥血清(大鼠灌胃10 d,取血清并進(jìn)行血藥成分檢測(cè))對(duì)人APP/PS1雙基因轉(zhuǎn)染細(xì)胞的生長(zhǎng)活力和超微結(jié)構(gòu)的影響;透射電鏡觀(guān)察各組細(xì)胞超微結(jié)構(gòu);雙熒光素酶基因檢測(cè)γ分泌酶活性;蛋白質(zhì)印跡法(Western blot)檢測(cè)γ分泌酶組件及相關(guān)蛋白早老素1(... 

【文章來(lái)源】:中國(guó)藥理學(xué)通報(bào). 2017,33(03)北大核心CSCD

【文章頁(yè)數(shù)】:10 頁(yè)

【文章目錄】:
1 材料與方法
    1.1 動(dòng)物、細(xì)胞株與藥物
    1.2 細(xì)胞的體外培養(yǎng)與傳代
    1.3 含藥血清的制備
    1.4 分組與給藥
    1.5 透射電鏡觀(guān)察
    1.6 γ分泌酶活性檢測(cè)
    1.7 Western blot檢測(cè)
    1.8 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法
2 結(jié)果
    2.1 HYD有效組分測(cè)定
    2.2 不同濃度HYD含藥血清對(duì)細(xì)胞株活性的影響
    2.3 HYD含藥血清對(duì)γ分泌酶活性的影響
    2.4 HYD含藥血清對(duì)γ分泌酶相關(guān)組件表達(dá)的影響
        2.4.1 HYD含藥血清對(duì)人APP/PS1雙基因轉(zhuǎn)染細(xì)胞株P(guān)S1蛋白表達(dá)電泳圖的影響
        2.4.2 HYD含藥血清對(duì)人APP/PS1雙基因轉(zhuǎn)染細(xì)胞株CHIP蛋白表達(dá)灰度值的影響
        2.4.3 HYD含藥血清對(duì)人APP/PS1雙基因轉(zhuǎn)染細(xì)胞株CDC42蛋白表達(dá)灰度值的影響
        2.4.4 HYD含藥血清對(duì)人APP/PS1雙基因轉(zhuǎn)染細(xì)胞株Aph-1α蛋白表達(dá)灰度值的影響
        2.4.5 HYD含藥血清對(duì)人APP/PS1雙基因轉(zhuǎn)染細(xì)胞株HIF-1α蛋白表達(dá)灰度值的影響
    2.5 APP/PS1雙基因轉(zhuǎn)染細(xì)胞株超微結(jié)構(gòu)的改變
        2.5.1線(xiàn)粒體
        2.5.2 脂褐素
3 討論


【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
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[2]還腦益聰方提取物對(duì)淀粉樣前體蛋白/早老蛋白1雙轉(zhuǎn)基因癡呆模型小鼠學(xué)習(xí)記憶能力的改善作用及其機(jī)制[J]. 劉美霞,劉劍剛,李浩,劉龍濤,梁琳,胡佳,魏蕓.  中國(guó)藥理學(xué)與毒理學(xué)雜志. 2014(01)
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[7]原人參三醇組皂苷和人參皂苷-Re對(duì)MPP+誘導(dǎo)的SH-SY5Y細(xì)胞損傷的保護(hù)作用[J]. 李東薇,竇德強(qiáng).  神經(jīng)藥理學(xué)報(bào). 2011(05)
[8]含二苯乙烯苷大鼠血清對(duì)NG108-15癡呆模型細(xì)胞的影響[J]. 黃忠仕,謝海源,張樹(shù)球,李韜,農(nóng)嵩,李曙波.  中國(guó)藥房. 2009(25)
[9]健康大鼠服用益腎通絡(luò)方后血清中阿魏酸的RP-HPLC測(cè)定[J]. 金紅,李雅,凌曉,楊智,盧岳華.  湖南師范大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版). 2007(04)



本文編號(hào):3179947

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