發(fā)布時(shí)間：2021-05-09 21:51

　　二球懸鈴木（Platanus20acerifolia）屬于基礎(chǔ)真雙子葉植物群,山龍眼目懸鈴木科木本植物,憑借其樹姿優(yōu)美、冠大遮陰、耐修剪易移栽等優(yōu)良特性,被廣泛種植于道路兩旁、公園等場(chǎng)所,在園林綠化中占有重要地位。但落花落果引起的花粉、果毛過(guò)敏問(wèn)題日益嚴(yán)重,應(yīng)用現(xiàn)代生物學(xué)技術(shù)研究其開花結(jié)果特性顯得日益緊迫,而打破二球懸鈴木難轉(zhuǎn)化的瓶頸已成為我們懸鈴木育種工作的重中之重。本研究嘗試以子葉為外植體,建立二球懸鈴木的再生體系;并優(yōu)化影響農(nóng)桿菌遺傳轉(zhuǎn)化效率的因素,試圖建立其完善的轉(zhuǎn)化體系。同時(shí)通過(guò)對(duì)二球懸鈴木調(diào)控胚珠發(fā)育及種子形成的關(guān)鍵基因-ANT（AINTEGUMENTA）和BEL1（BELL1）同源基因及其啟動(dòng)子進(jìn)行克隆分析,研究其生物學(xué)功能,以為解決懸鈴木落毛問(wèn)題提供幫助。主要研究結(jié)果如下:1.以二球懸鈴木子葉為外植體,通過(guò)調(diào)整再生培養(yǎng)基的激素種類及濃度、外植體苗齡和壯芽培養(yǎng)基中BA和NAA的激素濃度,建立了二球懸鈴木穩(wěn)定的再生體系。結(jié)果表明,取萌發(fā)培養(yǎng)520d的種子子葉為外植體,正面向上放置于再生培養(yǎng)基上,即MS+4.020mg·L^-1120BA+0.220mg·... 

【文章來(lái)源】：華中農(nóng)業(yè)大學(xué)湖北省 211工程院校 教育部直屬院校

【文章頁(yè)數(shù)】：121 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：博士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
縮略詞表
第一章 文獻(xiàn)綜述
    1.1 二球懸鈴木簡(jiǎn)介
        1.1.1 懸鈴木起源
        1.1.2 懸鈴木花發(fā)育過(guò)程
        1.1.3 懸鈴木應(yīng)用
    1.2 植物組織培養(yǎng)及遺傳轉(zhuǎn)化研究進(jìn)展
        1.2.1 懸鈴木組織培養(yǎng)研究進(jìn)展
        1.2.2 子葉外植體再生研究進(jìn)展
        1.2.3 農(nóng)桿菌介導(dǎo)的植物遺傳轉(zhuǎn)化影響因子
        1.2.4 懸鈴木轉(zhuǎn)基因研究進(jìn)展
    1.3 胚珠發(fā)育相關(guān)基因ANT與BEL1研究進(jìn)展
        1.3.1 ANT基因研究進(jìn)展
        1.3.2 BEL1基因研究進(jìn)展
    1.4 本研究的目的和意義
第二章 二球懸鈴木子葉離體再生體系的建立
    2.1 材料與方法
        2.1.1 實(shí)驗(yàn)材料與試劑
        2.1.2 實(shí)驗(yàn)方法
        2.1.3 數(shù)據(jù)分析
    2.2 結(jié)果與分析
        2.2.1 植物激素組合對(duì)子葉再生的影響
        2.2.2 外植體苗齡對(duì)子葉再生的影響
        2.2.3 不同BA濃度對(duì)不定芽伸長(zhǎng)培養(yǎng)的影響
        2.2.4 BA和NAA濃度對(duì)子葉再生率的影響
        2.2.5 不定芽生根與移栽
    2.3 討論
        2.3.1 外植體放置方式影響不定芽的誘導(dǎo)
        2.3.2 外植體的生長(zhǎng)狀態(tài)影響不定芽再生率
        2.3.3 激素濃度影響再生芽的誘導(dǎo)與生長(zhǎng)
        2.3.4 子葉再生體系優(yōu)缺點(diǎn)
    2.4 本章小結(jié)
第三章 農(nóng)桿菌介導(dǎo)的二球懸鈴木子葉遺傳轉(zhuǎn)化體系的影響因子分析
    3.1 材料與方法
        3.1.1 材料與試劑
        3.1.2 試驗(yàn)方法
        3.1.3 陽(yáng)性檢測(cè)
        3.1.4 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)與分析
    3.2 結(jié)果與分析
        3.2.1 卡那霉素Km篩選壓的確定
        3.2.2 不同抑菌劑對(duì)子葉不定芽再生影響
        3.2.3 農(nóng)桿菌侵染時(shí)間對(duì)子葉轉(zhuǎn)化效率的影響
        3.2.4 農(nóng)桿菌侵染對(duì)子葉再生的影響
        3.2.5 外源因素改善對(duì)轉(zhuǎn)化后子葉再生的影響
        3.2.6 陽(yáng)性檢測(cè)
    3.3 討論
        3.3.1 農(nóng)桿菌介導(dǎo)的二球懸鈴木子葉轉(zhuǎn)化體系初探
        3.3.2 農(nóng)桿菌侵染抑制子葉外植體的再生
    3.4 本章小結(jié)
第四章 二球懸鈴木ANT(AINTEGUMENTA)同源基因的克隆及功能分析
    4.1 材料與方法
        4.1.1 實(shí)驗(yàn)材料及試劑
        4.1.2 二球懸鈴木PaANTs同源基因克隆與序列分析
        4.1.3 二球懸鈴木PaANTs同源基因時(shí)空表達(dá)分析
        4.1.4 二球懸鈴木PaANTs同源基因亞細(xì)胞定位分析
        4.1.5 二球懸鈴木PaANT-1/2基因啟動(dòng)子分析
        4.1.6 二球懸鈴木PaANTs同源基因功能驗(yàn)證
    4.2 結(jié)果
        4.2.1 二球懸鈴木PaANTs同源基因克隆及序列分析
        4.2.2 被子植物euANT亞家族基因進(jìn)化分析
        4.2.3 二球懸鈴木PaANTs同源基因表達(dá)模式分析
        4.2.4 二球懸鈴木PaANTs同源基因亞細(xì)胞定位分析
        4.2.5 PaANT-1/2啟動(dòng)子的序列分析
        4.2.6 異源超量表達(dá)PaANTs同源基因?qū)煵莅l(fā)育的影響
    4.3 討論
        4.3.1 二球懸鈴木PaANTs同源基因具組織表達(dá)特異性
        4.3.2 二球懸鈴木PaANTs基因的功能進(jìn)化
    4.4 本章小結(jié)
第五章 二球懸鈴木BEL1(BELL1)同源基因及啟動(dòng)子的克隆與分析
    5.1 材料與方法
        5.1.1 實(shí)驗(yàn)材料及試劑
        5.1.2 二球懸鈴木PaBEL1s同源基因克隆與序列分析
        5.1.3 二球懸鈴木PaBEL1s同源基因時(shí)空表達(dá)分析
        5.1.4 二球懸鈴木PaBEL1s同源基因功能分析
        5.1.5 二球懸鈴木PaBEL1-1基因啟動(dòng)子克隆與分析
    5.2 結(jié)果
        5.2.1 二球懸鈴木PaBEL1s同源基因克隆及序列分析
        5.2.2 BELL1亞家族基因進(jìn)化分析
        5.2.3 二球懸鈴木PaBEL1s同源基因表達(dá)模式分析
        5.2.4 異源超量表達(dá)懸鈴木PaBEL1s同源基因?qū)煵莅l(fā)育的影響
        5.2.5 PaBEL1-1啟動(dòng)子的表達(dá)分析
    5.3 討論
        5.3.1 二球懸鈴木PaBEL1s基因的功能進(jìn)化
        5.3.2 PaBEL1-1基因5’UTR區(qū)內(nèi)含子功能分析
    5.4 本章小結(jié)
參考文獻(xiàn)
附錄1
附錄2
致謝


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]硫辛酸對(duì)農(nóng)桿菌介導(dǎo)的黃瓜子葉節(jié)遺傳轉(zhuǎn)化的影響[J]. 王燁,顧興芳,張圣平,苗晗.  華北農(nóng)學(xué)報(bào). 2012(S1)
[2]懸鈴木葉片再生體系的建立[J]. 王磊,李紅雙,藺娜,崔德才.  林業(yè)科學(xué). 2004(01)
[3]脯氨酸、硝酸銀對(duì)農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化大豆的影響[J]. 劉金華,王丕武,武麗敏,于彥春,張君,郝文媛,姚丹.  大豆科學(xué). 2003(01)
[4]Isolation20of20tomato20proteinase20inhibitor20Ⅱ20gene20and20the20function20of20its20intron[J]. XIE Xianzhi & WU NaihuInstitute of Developmental Biology, Chinese Academy of Sciences, Beijing 100080, China.  Chinese Science Bulletin. 2002(10)
[5]懸鈴木platanus20acerifolia落毛問(wèn)題的研究——Ⅱ、毛的類型及其發(fā)育的觀察[J]. 喬士義.  南京林業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版). 1986(03)

博士論文
[1]農(nóng)桿菌介導(dǎo)的秈粳稻轉(zhuǎn)化差異[D]. 鐵韋韋.華中農(nóng)業(yè)大學(xué) 2012
[2]北美一球懸鈴木無(wú)性系選育及其體胚發(fā)生等快繁技術(shù)研究[D]. 蔡曉明.南京林業(yè)大學(xué) 2008
[3]北美—球懸鈴木轉(zhuǎn)基因受體系統(tǒng)的建立及遺傳轉(zhuǎn)化研究[D]. 鄒永梅.南京林業(yè)大學(xué) 2005

碩士論文
[1]懸鈴木再生體系的建立及其遺傳轉(zhuǎn)化條件的初步研究[D]. 張娜娜.鄭州大學(xué) 2013
[2]不同基因型懸鈴木的離體培養(yǎng)及遺傳轉(zhuǎn)化研究[D]. 彭文明.華中農(nóng)業(yè)大學(xué) 2009
[3]懸鈴木再生體系建立與開花關(guān)鍵基因轉(zhuǎn)化[D]. 陶鳳杰.北京林業(yè)大學(xué) 2007
[4]根癌農(nóng)桿菌介導(dǎo)的反義LEAFY基因?qū)霊意從镜倪z傳轉(zhuǎn)化研究[D]. 趙振利.河南農(nóng)業(yè)大學(xué) 2006
[5]懸鈴木葉片體外器官和體細(xì)胞胚胎發(fā)生及植株再生研究[D]. 賀窯青.河南農(nóng)業(yè)大學(xué) 2003



本文編號(hào)：3178086