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羅漢果3-羥基-3-甲基戊二酰輔酶A還原酶基因的克隆及表達(dá)分析

發(fā)布時(shí)間:2021-05-01 01:06
  3-羥基-3-甲基戊二酰輔酶A還原酶(3-hydroxy-3-methylglutaryl coenzyme A reductase, HMGR)是萜類甲羥戊酸途徑(mevalonic acid pathway,MVA)中的第一個(gè)限速酶,是細(xì)胞質(zhì)中萜類代謝途徑中的重要調(diào)控位點(diǎn)。該研究以授粉后0,1,3,15,30 d的羅漢果為實(shí)驗(yàn)材料,基于轉(zhuǎn)錄組數(shù)據(jù),從羅漢果cDNA中克隆得到2個(gè)HMGR基因,分別命名為SgHMGR2(GenBank登錄號(hào)MT270447)和SgHMGR3(GenBank登錄號(hào)MT270448);虬_放閱讀框(ORF)分別為1 746,1 782 bp,編碼582,594個(gè)氨基酸,生物信息學(xué)分析推測其分子質(zhì)量分別為62.7,63.2 kDa,等電點(diǎn)(theoretical pI)為8.34,7.47,均不含信號(hào)肽,為非分泌型蛋白,并且存在2個(gè)跨膜結(jié)構(gòu)。結(jié)合蛋白質(zhì)保守結(jié)構(gòu)域以及進(jìn)化樹分析,證實(shí)該基因確為HMGR家族基因。利用實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測SgHMGRs在授粉后不同時(shí)間的羅漢果中的表達(dá)模式,結(jié)果表明SgHMGRs均在授粉后15 d表達(dá)量最高。該研究首次從羅漢... 

【文章來源】:中國中藥雜志. 2020,45(20)北大核心CSCD

【文章頁數(shù)】:7 頁

【文章目錄】:
1 材料
    1.1 植物
    1.2 試劑
    1.3 儀器
2 方法
    2.1 羅漢果總RNA的提取及cDNA的制備
    2.2 羅漢果HMGRs基因的全長克隆
    2.3 羅漢果HMGRs的生物信息學(xué)分析
    2.4 羅漢果HMGRs基因的表達(dá)模式分析
3 結(jié)果與分析
    3.1 羅漢果總RNA的提取及HMGRs基因的克隆
    3.2 羅漢果HMGRs蛋白的生物信息學(xué)分析
    3.3 羅漢果HMGRs蛋白的序列比對(duì)及系統(tǒng)進(jìn)化樹的構(gòu)建
    3.4 羅漢果HMGRs系統(tǒng)進(jìn)化樹的構(gòu)建
    3.5 不同授粉時(shí)間后羅漢果HMGRs基因表達(dá)模式的分析
4 討論



本文編號(hào):3169838

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