目的探討枸櫞相互作用的絲氨酸/蘇氨酸激酶（CIT）對(duì)阿霉素（ADM）耐藥肝癌細(xì)胞耐藥性的調(diào)控作用及其機(jī)制。方法用脂質(zhì)體將亂序無意義陰性序列（si-NC）、CIT小干擾RNA（si-CIT）轉(zhuǎn)染至耐藥細(xì)胞; Realtime PCR和Western blotting檢測(cè)CIT基因、連鎖凋亡抑制蛋白（XIAP）、B細(xì)胞淋巴瘤蛋白2（Bcl-2）、Bcl-2相關(guān)X基因（Bax）、細(xì)胞色素C（Cyt C）、磷酸酶基因誘導(dǎo)的假定激酶1（PINK1）、常染色體隱性遺傳性青少年帕金森綜合征致病基因（Parkin）和自噬微管相關(guān)蛋白輕鏈3抗體Ⅰ/Ⅱ（LC3-Ⅰ/Ⅱ）的表達(dá);細(xì)胞計(jì)數(shù)試劑盒-8（CCK-8）、流式細(xì)胞術(shù)和熒光探針（JC-10）染色法檢測(cè)細(xì)胞的抑制率、凋亡和線粒體膜電位。結(jié)果耐藥細(xì)胞中CIT基因表達(dá)高于正常細(xì)胞,敲減CIT可增強(qiáng)其對(duì)ADM的敏感性。敲減CIT促進(jìn)耐藥細(xì)胞凋亡和線粒體自噬能力,抑制細(xì)胞線粒體膜電位,并上調(diào)細(xì)胞Bax、PINK1、Parkin和LC3-Ⅰ/Ⅱ及胞質(zhì)中Cyt C,下調(diào)細(xì)胞中Bcl-2和線粒體中Cyt C。結(jié)論 CIT基因可通過線粒體途徑的凋亡和自噬調(diào)節(jié)阿霉素耐藥肝... 

【文章來源】：解剖學(xué)報(bào). 2020,51(05)北大核心CSCD

【文章頁數(shù)】：6 頁

【文章目錄】：
材料和方法
    1．材料
    2．方法
        2.1 細(xì)胞培養(yǎng):
        2.2 CCK-8法檢測(cè)細(xì)胞抑制率:
        2.3 Real-time PCR檢測(cè)細(xì)胞中CIT mRNA的表達(dá):
        2.4 Western blotting檢測(cè)細(xì)胞中CIT、XIAP、Bcl-2、Bax、Cyt C、PINK1、Parkin和LC3-Ⅰ/Ⅱ的蛋白表達(dá):
        2.5 流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)細(xì)胞凋亡率:
        2.6 JC-10染色法檢測(cè)細(xì)胞線粒體膜電位:
        2.7 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析:
結(jié)果
    1．肝癌耐藥細(xì)胞的建立
    2.CIT基因在耐藥細(xì)胞中的表達(dá)
    3．敲減CIT對(duì)耐藥細(xì)胞耐藥性的影響
    4．敲減CIT對(duì)耐藥細(xì)胞凋亡的影響
    5．敲減CIT對(duì)耐藥細(xì)胞線粒體膜電位的影響
    6．敲減CIT對(duì)耐藥細(xì)胞線粒體自噬的影響
討論


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]苦參素通過線粒體凋亡通路影響肝癌耐藥細(xì)胞株HepG2/ADM化學(xué)治療的耐藥性[J]. 黃桂柳,馮巍巍,黃贊松,周喜漢,覃月秋.  中華肝臟病雜志. 2019 (03)



本文編號(hào)：3168836