洋蔥（Allium cepa L.）屬百合科蔥屬,是嚴格的二年生植物,在適合的光周期下,當年形成鱗莖,經(jīng)冬貯春化后,第二年再經(jīng)適合光周期成花結(jié)實,從而完成生命周期。植物光周期調(diào)控涉及到眾多調(diào)控元件,如光敏色素（PHYA,PHYB）,隱花色素（CryC）,時鐘節(jié)律元件（CDF）及信號輸出元件CO等。在植物的光周期調(diào)控通路中,光感受器（如光敏色素、隱花色素）接收光信號,通過信號轉(zhuǎn)導(dǎo)形成胞內(nèi)第二信使系統(tǒng)的級聯(lián)傳遞來調(diào)節(jié)光形態(tài)建成反應(yīng)。模式植物中的研究表明,COP是一個光形態(tài)建成的抑制劑,在擬南芥的多種光介導(dǎo)發(fā)育過程中起著中樞調(diào)節(jié)的作用,包括開花和下胚軸生長調(diào)控等。COP的豐度和活性對正常植物的發(fā)育是必不可少的,而且是CO-FT開花調(diào)控途徑的中心抑制因子。而時鐘調(diào)節(jié)通路則協(xié)調(diào)許多對光周期和溫度變化的發(fā)育過程,其中較為主要的是CDF-FKF1調(diào)控元件,其中CDF基因作為內(nèi)生節(jié)律基因,對植物發(fā)育和生理的協(xié)調(diào)不僅限于開花和下胚軸伸長,還涉及到耐寒和耐旱等多種逆境調(diào)節(jié)。COP及CDF可以抑制光周期調(diào)控途徑中的CO/FT調(diào)節(jié)元件的晝夜節(jié)律和光周期信號轉(zhuǎn)錄水平,抑制植物開花,而且貫穿整個植物生命周期的諸多... 

【文章來源】：東北農(nóng)業(yè)大學(xué)黑龍江省 211工程院校

【文章頁數(shù)】：81 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
英文摘要
1 引言
    1.1 研究目的意義
    1.2 國內(nèi)外研究進展
        1.2.1 高等植物成花機制概述
        1.2.2 COP及CDF的結(jié)構(gòu)及功能
    1.3 技術(shù)路線
2 試驗材料與方法
    2.1 試驗材料
        2.1.1 植物材料
        2.1.2 細菌菌株與質(zhì)粒載體
        2.1.3 主要試劑和試劑
        2.1.4 試驗器材
    2.2 試驗方法
        2.2.1 洋蔥總RNA的提取和cDNA第一鏈的合成
            2.2.1.1 洋蔥總RNA的提取
            2.2.1.2 cDNA第一鏈的合成
        2.2.2 AcCOP10,AcCDF2基因的克隆
        2.2.3 AcCOP10,AcCDF2生物信息學(xué)分析
        2.2.4 AcCOP10和AcCDF2基因的表達分析
        2.2.5 植物表達載體的構(gòu)建
        2.2.6 遺傳轉(zhuǎn)化
        2.2.7 轉(zhuǎn)基因植株擬南芥的表型分析
        2.2.8 轉(zhuǎn)基因植株基因表達調(diào)控
        2.2.9 非生物脅迫實驗
        2.2.10 下胚軸測量實驗
3 結(jié)果與分析
    3.1 AcCOP10,AcCDF2基因的克隆及生物信息學(xué)分析
        3.1.1 AcCOP10,AcCDF2基因全長克隆
        3.1.2 AcCOP10,AcCDF2二級結(jié)構(gòu)預(yù)測
        3.1.3 同源序列比對
        3.1.4 進化樹分析
    3.2 AcCOP10,AcCDF2的表達模式分析
    3.3 植物表達載體的構(gòu)建與鑒定
        3.3.1 過表達載體的構(gòu)建
        3.3.2 RNAi載體的構(gòu)建
        3.3.3 農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化
    3.4 AcCOP10,AcCDF2功能分析
        3.4.1 轉(zhuǎn)基因陽性植株的鑒定
        3.4.2 轉(zhuǎn)基因擬南芥植株的成花及分析
        3.4.3 AcCDF2其他功能分析
        3.4.4 轉(zhuǎn)AcCOP10基因擬南芥植株下胚軸表型及分析
4 討論
    4.1 AcCOP10,AcCDF2家族基因的功能分析
        4.1.1 AcCOP10,AcCDF2家族基因?qū)﹂_花的調(diào)控
        4.1.2 對非生物脅迫的響應(yīng)
        4.1.3 其他功能分析
    4.2 AcCOP10,AcCDF2與其他調(diào)控基因間的互作關(guān)系
    4.3 下一步工作計劃
5 結(jié)論
致謝
參考文獻
附錄
攻讀碩士學(xué)位期間發(fā)表的學(xué)術(shù)論文


【參考文獻】：
期刊論文
[1]我國植物光信號轉(zhuǎn)導(dǎo)研究進展概述[J]. 景艷軍,林榮呈.  植物學(xué)報. 2017(03)
[2]水稻開花光周期調(diào)控相關(guān)基因研究進展[J]. 孔德艷,陳守俊,周立國,高歡,羅利軍,劉灶長.  遺傳. 2016(06)
[3]茶樹CsCDF1基因克隆及表達分析[J]. 胡娟,王麗鴛,韋康,成浩,張成才,張芬,吳立赟.  茶葉科學(xué). 2015(05)
[4]COP1調(diào)控植物花色苷合成的研究進展[J]. 朱婷婷,林玲,楊濤,高帆,劉天宇,潘東明,夏惠.  分子植物育種. 2015(09)
[5]高等植物成花誘導(dǎo)調(diào)控的分子和遺傳機制[J]. 宋楊,竇連登,張紅軍.  植物生理學(xué)報. 2014(10)
[6]光周期途徑核心因子CO的開花調(diào)控機制[J]. 楊修勤,湯青林,宋明,王志敏.  植物生理學(xué)報. 2013(09)
[7]植物Dof基因家族功能研究進展[J]. 蔡曉鋒,張余洋,張俊紅,李漢霞,葉志彪.  植物生理學(xué)報. 2013(01)



本文編號：3161448