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忽地笑LaSUVH1基因克隆與功能分析

發(fā)布時(shí)間:2021-04-24 10:07
  為了深入探究忽地笑(Lycoris aurea)組蛋白賴(lài)氨酸甲基轉(zhuǎn)移酶(histone lysine methyltransferase, HKMT)基因的功能,該研究根據(jù)前期轉(zhuǎn)錄組測(cè)序結(jié)果,采用RT-PCR方法克隆得到一個(gè)組蛋白賴(lài)氨酸甲基轉(zhuǎn)移酶基因LaSUVH1。序列分結(jié)果表明,LaSUVH1基因的編碼區(qū)(coding sequences, CDs)序列長(zhǎng)2 007 bp,編碼668個(gè)氨基酸殘基;LaSUVH1蛋白不具有信號(hào)肽結(jié)構(gòu),無(wú)跨膜結(jié)構(gòu),為親水性蛋白,含有SET、YDG/SRA、Pre-SET和Post-SET結(jié)構(gòu)域;序列比對(duì)和系統(tǒng)進(jìn)化樹(shù)分析發(fā)現(xiàn),LaSUVH1與蘆筍AoSUVH1-like蛋白親緣關(guān)系最近。實(shí)時(shí)熒光定量PCR分析表明,LaSUVH1基因在忽地笑不同組織部位均有表達(dá),且在葉中表達(dá)量最高。經(jīng)潮霉素篩選成功獲得3個(gè)反義過(guò)表達(dá)LaSUVH1的轉(zhuǎn)基因擬南芥株系。進(jìn)一步功能分析發(fā)現(xiàn),反義過(guò)表達(dá)LaSUVH1促進(jìn)了擬南芥幼苗側(cè)根的發(fā)生,降低了擬南芥對(duì)NaCl的耐受性,增加了擬南芥種子萌發(fā)對(duì)脫落酸(ABA)的敏感性,表明LaSUVH1基因響應(yīng)鹽脅迫應(yīng)答可能依賴(lài)ABA信號(hào)通路。 

【文章來(lái)源】:西北植物學(xué)報(bào). 2020,40(11)北大核心CSCD

【文章頁(yè)數(shù)】:9 頁(yè)

【文章目錄】:
1 材料和方法
    1.1 材料及處理
    1.2 方 法
        1.2.1 總RNA提取及cDNA第一鏈合成
        1.2.2 LaSUVH1基因克隆
        1.2.3 LaSUVH1基因的生物信息學(xué)分析
        1.2.4 實(shí)時(shí)熒光定量PCR分析
        1.2.5 LaSUVH1基因反義過(guò)表達(dá)載體構(gòu)建及轉(zhuǎn)基因擬南芥LaSUVH1轉(zhuǎn)錄水平與表型分析
    1.3 數(shù)據(jù)處理
2 結(jié)果與分析
    2.1 LaSUVH1基因克隆與序列分析
    2.2 LaSUVH1基因編碼蛋白的同源性及進(jìn)化分析
    2.3 LaSUVH1基因的組織表達(dá)分布
    2.4 反義過(guò)表達(dá)LaSUVH1轉(zhuǎn)基因擬南芥表型分析
    2.5 反義過(guò)表達(dá)LaSUVH1基因降低擬南芥對(duì)NaCl的抗性并增加擬南芥對(duì)ABA的敏感性
3 討 論


【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]植物組蛋白賴(lài)氨酸甲基化建立過(guò)程及其遺傳性研究進(jìn)展[J]. 周偉,王宇,解莉楠.  生物技術(shù)通報(bào). 2020(04)
[2]A group of SUVH methyl-DNA binding proteins regulate expression of the DNA demethylase ROS1 in Arabidopsis[J]. Xinlong Xiao,Jieqiong Zhang,Tao Li,Xing Fu,Viswanathan Satheesh,Qingfeng Niu,Zhaobo Lang,Jian-Kang Zhu,Mingguang Lei.  Journal of Integrative Plant Biology. 2019(02)
[3]An update on histone lysine methylation in plants[J]. Yu Yu a, Zhongyuan Bu a, Wen-Hui Shen b, Aiwu Dong a,a State Key Laboratory of Genetic Engineering, Institute of Plant Biology, School of Life Sciences, Fudan University, Shanghai 200433, China b Institut de Biologie Moléculaire des Plantes (IBMP), Laboratoire Propre du CNRS (UPR 2357) conventionné avec l’Université LouisPasteur Strasbourg, 67084 Strasbourg Cédex, France.  Progress in Natural Science. 2009(04)



本文編號(hào):3157173

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