利用CRISPR/CAS9技術(shù)編輯水稻香味基因Badh2
發(fā)布時(shí)間:2021-04-21 06:03
【目的】香稻作為一類特殊的水稻群體,以其清香可口的品質(zhì)特性備受消費(fèi)者的歡迎。到目前為止,水稻中的香味主要受第8染色體上編碼甜菜堿醛脫氫酶基因Badh2控制!痉椒ā客ㄟ^CRISPR/CAS9技術(shù)對(duì)中花11的香味基因Badh2進(jìn)行編輯。【結(jié)果】獲得轉(zhuǎn)基因T0代植株并對(duì)其所衍生的T1代20個(gè)單株進(jìn)行了鑒定分析,獲得了一個(gè)剔除了載體骨架且第1外顯子上插入一個(gè)堿基T的突變體材料。該材料中Badh2 RNA水平顯著下調(diào);利用GC-MS技術(shù)測定野生型及突變體材料籽粒2-乙酰-1-吡咯啉含量,結(jié)果表明突變體材料中的香味物質(zhì)顯著增加;此外,我們還對(duì)野生型及T2代香型植株水稻產(chǎn)量及稻米蒸煮食味品質(zhì)進(jìn)行了考查及測定分析,發(fā)現(xiàn)除分蘗數(shù)及結(jié)實(shí)率呈現(xiàn)出顯著差異外(P<0.05),其余各項(xiàng)指標(biāo)在兩組材料間都無顯著差異!窘Y(jié)論】通過CRISPR/CAS9技術(shù)成功地對(duì)水稻香味基因進(jìn)行了編輯,可為香稻育種提供豐富的理論指導(dǎo),加快香稻的育種進(jìn)程。
【文章來源】:中國水稻科學(xué). 2017,31(02)北大核心CSCD
【文章頁數(shù)】:7 頁
【文章目錄】:
1 材料與方法
1.1 試驗(yàn)材料
1.2 載體構(gòu)建及轉(zhuǎn)基因研究
1.3 香味物質(zhì)測定
1.4 突變體表型分析
1.5 PCR鑒定分析及q RT-PCR分析
2.1 CRISPR-CAS9表達(dá)載體的構(gòu)建
2.2 Badh2的編輯及無標(biāo)記后代的鑒定分析
2.3 轉(zhuǎn)基因后代Badh2 RNA水平檢測及香味物質(zhì)2-AP含量的測定
2.4 Badh2基因編輯后代產(chǎn)量性狀的考查及蒸煮食味品質(zhì)的測定
3 討論
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]國內(nèi)外香稻資源遺傳多樣性研究[J]. 余亞瑩,邵高能,圣忠華,蔣漢偉,賀記外,孫園園,蔡怡聰,胡培松,唐紹清. 植物分類與資源學(xué)報(bào). 2015(06)
[2]泰國香米事件及啟示[J]. 胡培松,唐紹清,魏興華. 中國稻米. 2006(04)
本文編號(hào):3151203
【文章來源】:中國水稻科學(xué). 2017,31(02)北大核心CSCD
【文章頁數(shù)】:7 頁
【文章目錄】:
1 材料與方法
1.1 試驗(yàn)材料
1.2 載體構(gòu)建及轉(zhuǎn)基因研究
1.3 香味物質(zhì)測定
1.4 突變體表型分析
1.5 PCR鑒定分析及q RT-PCR分析
2.1 CRISPR-CAS9表達(dá)載體的構(gòu)建
2.2 Badh2的編輯及無標(biāo)記后代的鑒定分析
2.3 轉(zhuǎn)基因后代Badh2 RNA水平檢測及香味物質(zhì)2-AP含量的測定
2.4 Badh2基因編輯后代產(chǎn)量性狀的考查及蒸煮食味品質(zhì)的測定
3 討論
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]國內(nèi)外香稻資源遺傳多樣性研究[J]. 余亞瑩,邵高能,圣忠華,蔣漢偉,賀記外,孫園園,蔡怡聰,胡培松,唐紹清. 植物分類與資源學(xué)報(bào). 2015(06)
[2]泰國香米事件及啟示[J]. 胡培松,唐紹清,魏興華. 中國稻米. 2006(04)
本文編號(hào):3151203
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