目的檢測NCSTN基因穩(wěn)定沉默的人永生化角質(zhì)形成細胞（HaCaT）增殖活性及相關分化蛋白的改變,初步探索反常性痤瘡發(fā)病的可能機制。方法構(gòu)建慢病毒介導shRNA沉默NCSTN基因的HaCaT細胞模型（shRNA組）,轉(zhuǎn)染空載慢病毒的HaCaT細胞作為陰性對照組,實時定量PCR和Western印跡法檢測NCSTN基因的沉默效率。CCK8法檢測HaCaT細胞增殖活性,實時定量PCR和Western印跡法檢測HaCaT細胞角蛋白（CK1、CK5、CK7、CK10、CK14、CK16、CK17、CK18、CK19、CK20）及其他分化分子（內(nèi)披蛋白、兜甲蛋白）mRNA和蛋白的表達。兩組計量資料的比較采用兩獨立樣本t檢驗。結(jié)果 shRNA組NCSTN mRNA及蛋白表達（0.42 ± 0.19、0.30 ± 0.07）均顯著低于陰性對照組（1.00 ± 0.34、1.00 ± 0.26;t = 5.196、2.637,P < 0.001、< 0.05）,基因沉默效率達70%。與陰性對照組相比,shRNA組HaCaT細胞明顯增殖活躍,CK16、CK19蛋白表達顯著下調(diào)（t = 3.787... 

【文章來源】：中華皮膚科雜志. 2020,53(09)北大核心CSCD

【文章頁數(shù)】：6 頁

【參考文獻】：
期刊論文
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本文編號：3150470