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PAX1及PAX3基因在肛門直腸畸形大鼠胚胎后腸發(fā)育中的表達分析

發(fā)布時間:2021-04-19 20:31
  目的:本研究利用乙烯硫脲(ethylenethiourea,ETU)在Wistar大鼠E10天對其胎鼠行灌胃致畸,建立ARMs(Anorectal Malformations,ARMs)動物模型,運用免疫組化(Immunohistochemical-paraffin section,IHC-P),Western blot及q RT-PCR技術(shù),對ARMs胎鼠和ARMs胎鼠肛門直腸發(fā)育過程中Pax1及Pax3基因在直腸末端表達水平進行檢測,探討ARMs發(fā)生與Pax1及Pax3基因的相關(guān)性。實驗材料:1、實驗動物:體重220250gWistar雌性大鼠,體重250300gWistar雄鼠(均購自中國遼寧長生生物技術(shù)有限公司)。2、實驗試劑:乙烯硫脲,Ethylenethiourea,ETU(純度99%)(購于德國Aldrich公司),Pax1AB203065)、Pax3(AB180754)多克隆抗體(Abcam公司);免疫組化試劑盒和DAB顯色劑(均購于福州邁新生物技術(shù)開發(fā)有限公司);GAPDH抗體(Proteintech TM公司);蛋白提取試... 

【文章來源】:中國醫(yī)科大學(xué)遼寧省

【文章頁數(shù)】:45 頁

【學(xué)位級別】:碩士

【文章目錄】:
摘要
abstract
英文縮略語
1 前言
2 材料與方法
    2.1 實驗動物試劑及儀器
    2.2 實驗方法
        2.2.1 ARMs動物模型的制作
        2.2.2 標(biāo)本處理
        2.2.3 Pax1、Pax3 IHC-P
        2.2.4 Western blot 測定組織中 Pax1、Pax3 蛋白表達量
        2.2.5 qRT-PCR檢測組織中Pax1、Pax3mRNA的表達
        2.2.6 數(shù)據(jù)整理
3 結(jié)果
    3.1 兩組不同胎齡大鼠胚胎分布情況
    3.2 PAX1 在大鼠胚胎發(fā)育過程中末端直腸
        3.2.1 免疫組織化學(xué)染色結(jié)果
        3.2.2 Western blot PAX1 蛋白檢測結(jié)果
        3.2.3 qRT-PCR pax1、Pax1 mRNA 結(jié)果
4 討論
5 結(jié)論
本研究創(chuàng)新性的自我評價
參考文獻
文獻綜述
    參考文獻
攻讀學(xué)位期間科研成績
致謝
個人簡介


【參考文獻】:
期刊論文
[1]直腸肛門畸形環(huán)境致病因素的研究進展[J]. 王琛,鄭偉,李龍.  臨床小兒外科雜志. 2015 (04)
[2]Shh/Bmp4信號在直腸末端的表達與先天性肛門直腸畸形發(fā)生的關(guān)系[J]. 張娟,張志波,高紅,王維林.  中華小兒外科雜志. 2008 (06)
[3]肛門直腸畸形的合并畸形[J]. 汪健.  臨床外科雜志. 2008(05)
[4]EphB2基因多態(tài)性與先天性肛門直腸畸形的相關(guān)性研究[J]. 王大佳,白玉作,盧瑤,高紅,張志波,黃英,王練英,袁正偉,王維林.  中華小兒外科雜志. 2008 (05)
[5]先天性肛門直腸畸形Hoxc-8基因表達的研究及其意義[J]. 邢茂青,王俊文,張金哲.  中華小兒外科雜志. 2004(03)
[6]先天性無肛畸形Gli2基因表達的研究[J]. 張志波,高紅,王練英.  中華小兒外科雜志. 2001(06)



本文編號:3148259

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