目的 構(gòu)建線粒體抗病毒信號（mitochondrial antiviral signaling,MAVS）和核因子κB1（nuclear factorkappa B1,NFκB1）基因敲除的犬腎細(xì)胞系（Madin-Daby canine kidney cells, MDCK）,對細(xì)胞系的生長特性、流感病毒（influenza virus, Flu）的增殖特性進(jìn)行初步鑒定。方法 采用CRISPR/Cas9技術(shù),將MDCK細(xì)胞的MAVS和NFκB1基因敲除,獲得穩(wěn)定的敲除細(xì)胞系。接種Flu并檢測培養(yǎng)上清中病毒的血凝（hemagglutinination, HA）滴度和TCID50滴度,與野生MDCK細(xì)胞進(jìn)行比較。結(jié)果 獲得2株穩(wěn)定敲除的MDCK細(xì)胞系MDCK-MAVS－和MDCK-NFκB1－,與野生MDCK細(xì)胞同樣為貼壁的上皮樣細(xì)胞。接種Flu后,2株敲除細(xì)胞系測定的病毒HA滴度與野生細(xì)胞相比無明顯差異,TCID50分別比野生MDCK細(xì)胞系提高了9.5倍和10倍,其差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＝0.0316）。結(jié)論 本研究構(gòu)建的2株基因敲除細(xì)胞系MDCK-MAVS－和MDCK-NFκB1－能夠提... 

【文章來源】：中華實(shí)驗(yàn)和臨床病毒學(xué)雜志. 2020,(02)

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