縱觀靈芝發(fā)酵生產(chǎn)的整個(gè)進(jìn)程及其研究現(xiàn)狀,靈芝酸等活性物質(zhì)產(chǎn)量低是發(fā)酵法不能進(jìn)行商業(yè)化生產(chǎn)的主要原因。研究表明,通過(guò)構(gòu)建高表達(dá)工程菌株可以顯著提高靈芝酸的生物合成量,因此,轉(zhuǎn)基因技術(shù)是靈芝酸等活性物質(zhì)增產(chǎn)的有效策略。目前的研究多集中于通過(guò)過(guò)表達(dá)靈芝酸或靈芝多糖生物合成途徑中的關(guān)鍵酶基因,從而實(shí)現(xiàn)增產(chǎn)目的。LaeA是絲狀真菌全局性調(diào)控因子之一,參與其形態(tài)發(fā)育和次級(jí)代謝的調(diào)控。研究發(fā)現(xiàn),LaeA基因?qū)z狀真菌次級(jí)代謝相關(guān)基因簇的表達(dá)水平及次級(jí)代謝產(chǎn)物的產(chǎn)量具有正調(diào)控效應(yīng)。靈芝作為高等絲狀真菌之一,其形態(tài)發(fā)育和次級(jí)代謝是否受LaeA基因的調(diào)控、如何調(diào)控及內(nèi)在的調(diào)控機(jī)制方面至今未見(jiàn)報(bào)道。本研究采用轉(zhuǎn)基因技術(shù)構(gòu)建靈芝LaeA基因沉默菌株、過(guò)表達(dá)LaeA基因cDNA序列菌株及過(guò)表達(dá)LaeA基因全序列菌株,對(duì)其菌絲生長(zhǎng)、產(chǎn)孢能力、糖消耗能力、靈芝酸和靈芝多糖產(chǎn)量以及合成相關(guān)基因表達(dá)情況進(jìn)行檢測(cè),探究LaeA基因?qū)`芝形態(tài)發(fā)育和次級(jí)代謝的調(diào)控作用及其內(nèi)在的調(diào)控機(jī)制。通過(guò)研究LaeA基因沉默、過(guò)表達(dá)LaeA基因cDNA序列、過(guò)表達(dá)LaeA基因全序列對(duì)靈芝形態(tài)發(fā)育和次級(jí)代謝的影響,結(jié)果表明:（1）LaeA基... 

【文章來(lái)源】：福建師范大學(xué)福建省

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【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

靈芝酸的基本骨架[22]

福建師范大學(xué)崔艷碩士學(xué)位論文-4-圖2靈芝酸GA-Mk、GA-T、GA-S和GA-Me的化學(xué)結(jié)構(gòu)[22]Fig.2ThechemicalstructureofGA-Mk、GA-T、GA-SandGA-Me4.3靈芝酸的生物合成靈芝酸是最重要的三萜成分，具有極其重要的藥用價(jià)值。Shiao[23]、Hirotani[24]等人利用同位素示蹤實(shí)驗(yàn)證實(shí)靈芝酸的三萜烯骨架來(lái)自甲羥戊酸途徑（MVP途徑）。由此可知：靈芝酸的生物合成起始于乙酰CoA和甲羥戊[25]，其中MVA是唯一的前體，角鯊烯和羊毛甾醇是中間體[26]。圖3所示為目前比較公認(rèn)的靈芝酸的生物合成途徑。圖3靈芝酸合成代謝的基本途徑Fig.3PutativepathwayforganodericacidsbiosynthesisfromGanodermalucidum(1)3-羥基-3-甲基戊二酰CoA還原酶；(7)鯊烯合酶；(9)羊毛甾醇合酶；(1)3-hydroxy-3-methylglutaryl-CoAreductase(HMGR);(7)Squalenesynthase(SQS);(9)

福建師范大學(xué)崔艷碩士學(xué)位論文-4-圖2靈芝酸GA-Mk、GA-T、GA-S和GA-Me的化學(xué)結(jié)構(gòu)[22]Fig.2ThechemicalstructureofGA-Mk、GA-T、GA-SandGA-Me4.3靈芝酸的生物合成靈芝酸是最重要的三萜成分，具有極其重要的藥用價(jià)值。Shiao[23]、Hirotani[24]等人利用同位素示蹤實(shí)驗(yàn)證實(shí)靈芝酸的三萜烯骨架來(lái)自甲羥戊酸途徑（MVP途徑）。由此可知：靈芝酸的生物合成起始于乙酰CoA和甲羥戊[25]，其中MVA是唯一的前體，角鯊烯和羊毛甾醇是中間體[26]。圖3所示為目前比較公認(rèn)的靈芝酸的生物合成途徑。圖3靈芝酸合成代謝的基本途徑Fig.3PutativepathwayforganodericacidsbiosynthesisfromGanodermalucidum(1)3-羥基-3-甲基戊二酰CoA還原酶；(7)鯊烯合酶；(9)羊毛甾醇合酶；(1)3-hydroxy-3-methylglutaryl-CoAreductase(HMGR);(7)Squalenesynthase(SQS);(9)

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]靈芝活性成分的研究進(jìn)展[J]. 姜芳燕,馬軍,陳永敢,陳光宙,李珍,王沛正,王輝芳.  黑龍江農(nóng)業(yè)科學(xué). 2014(08)
[2]DNA甲基化的影響因素及對(duì)基因表達(dá)的調(diào)控[J]. 邢晉祎.  生物學(xué)教學(xué). 2010(06)
[3]中國(guó)藥用真菌名錄及部分名稱的修訂[J]. 戴玉成,楊祝良.  菌物學(xué)報(bào). 2008(06)
[4]中國(guó)靈芝科資源及其地理分布Ⅲ[J]. 吳興亮,戴玉成,林尤河.  貴州科學(xué). 2004(04)
[5]中國(guó)靈芝科資源及其地理分布Ⅱ[J]. 吳興亮,戴玉成,林尤河.  貴州科學(xué). 2004(03)
[6]中國(guó)靈芝科資源及其地理分布Ⅰ[J]. 吳興亮,戴玉成,林龍河.  貴州科學(xué). 2004(02)
[7]靈芝的臨床應(yīng)用進(jìn)展[J]. 郭金龍.  福建中醫(yī)藥. 1986(06)

碩士論文
[1]紅色紅曲菌M-7全局性調(diào)控因子laeA功能的研究[D]. 蔡麗.華中農(nóng)業(yè)大學(xué) 2013



本文編號(hào)：3133269