縱觀靈芝發(fā)酵生產(chǎn)的整個進程及其研究現(xiàn)狀,靈芝酸等活性物質(zhì)產(chǎn)量低是發(fā)酵法不能進行商業(yè)化生產(chǎn)的主要原因。研究表明,通過構(gòu)建高表達(dá)工程菌株可以顯著提高靈芝酸的生物合成量,因此,轉(zhuǎn)基因技術(shù)是靈芝酸等活性物質(zhì)增產(chǎn)的有效策略。目前的研究多集中于通過過表達(dá)靈芝酸或靈芝多糖生物合成途徑中的關(guān)鍵酶基因,從而實現(xiàn)增產(chǎn)目的。LaeA是絲狀真菌全局性調(diào)控因子之一,參與其形態(tài)發(fā)育和次級代謝的調(diào)控。研究發(fā)現(xiàn),LaeA基因?qū)z狀真菌次級代謝相關(guān)基因簇的表達(dá)水平及次級代謝產(chǎn)物的產(chǎn)量具有正調(diào)控效應(yīng)。靈芝作為高等絲狀真菌之一,其形態(tài)發(fā)育和次級代謝是否受LaeA基因的調(diào)控、如何調(diào)控及內(nèi)在的調(diào)控機制方面至今未見報道。本研究采用轉(zhuǎn)基因技術(shù)構(gòu)建靈芝LaeA基因沉默菌株、過表達(dá)LaeA基因cDNA序列菌株及過表達(dá)LaeA基因全序列菌株,對其菌絲生長、產(chǎn)孢能力、糖消耗能力、靈芝酸和靈芝多糖產(chǎn)量以及合成相關(guān)基因表達(dá)情況進行檢測,探究LaeA基因?qū)`芝形態(tài)發(fā)育和次級代謝的調(diào)控作用及其內(nèi)在的調(diào)控機制。通過研究LaeA基因沉默、過表達(dá)LaeA基因cDNA序列、過表達(dá)LaeA基因全序列對靈芝形態(tài)發(fā)育和次級代謝的影響,結(jié)果表明:（1）LaeA基... 

【文章來源】：福建師范大學(xué)福建省

【文章頁數(shù)】：112 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

靈芝酸的基本骨架[22]

福建師范大學(xué)崔艷碩士學(xué)位論文-4-圖2靈芝酸GA-Mk、GA-T、GA-S和GA-Me的化學(xué)結(jié)構(gòu)[22]Fig.2ThechemicalstructureofGA-Mk、GA-T、GA-SandGA-Me4.3靈芝酸的生物合成靈芝酸是最重要的三萜成分，具有極其重要的藥用價值。Shiao[23]、Hirotani[24]等人利用同位素示蹤實驗證實靈芝酸的三萜烯骨架來自甲羥戊酸途徑（MVP途徑）。由此可知：靈芝酸的生物合成起始于乙酰CoA和甲羥戊[25]，其中MVA是唯一的前體，角鯊烯和羊毛甾醇是中間體[26]。圖3所示為目前比較公認(rèn)的靈芝酸的生物合成途徑。圖3靈芝酸合成代謝的基本途徑Fig.3PutativepathwayforganodericacidsbiosynthesisfromGanodermalucidum(1)3-羥基-3-甲基戊二酰CoA還原酶；(7)鯊烯合酶；(9)羊毛甾醇合酶；(1)3-hydroxy-3-methylglutaryl-CoAreductase(HMGR);(7)Squalenesynthase(SQS);(9)

福建師范大學(xué)崔艷碩士學(xué)位論文-4-圖2靈芝酸GA-Mk、GA-T、GA-S和GA-Me的化學(xué)結(jié)構(gòu)[22]Fig.2ThechemicalstructureofGA-Mk、GA-T、GA-SandGA-Me4.3靈芝酸的生物合成靈芝酸是最重要的三萜成分，具有極其重要的藥用價值。Shiao[23]、Hirotani[24]等人利用同位素示蹤實驗證實靈芝酸的三萜烯骨架來自甲羥戊酸途徑（MVP途徑）。由此可知：靈芝酸的生物合成起始于乙酰CoA和甲羥戊[25]，其中MVA是唯一的前體，角鯊烯和羊毛甾醇是中間體[26]。圖3所示為目前比較公認(rèn)的靈芝酸的生物合成途徑。圖3靈芝酸合成代謝的基本途徑Fig.3PutativepathwayforganodericacidsbiosynthesisfromGanodermalucidum(1)3-羥基-3-甲基戊二酰CoA還原酶；(7)鯊烯合酶；(9)羊毛甾醇合酶；(1)3-hydroxy-3-methylglutaryl-CoAreductase(HMGR);(7)Squalenesynthase(SQS);(9)

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]靈芝活性成分的研究進展[J]. 姜芳燕,馬軍,陳永敢,陳光宙,李珍,王沛正,王輝芳.  黑龍江農(nóng)業(yè)科學(xué). 2014(08)
[2]DNA甲基化的影響因素及對基因表達(dá)的調(diào)控[J]. 邢晉祎.  生物學(xué)教學(xué). 2010(06)
[3]中國藥用真菌名錄及部分名稱的修訂[J]. 戴玉成,楊祝良.  菌物學(xué)報. 2008(06)
[4]中國靈芝科資源及其地理分布Ⅲ[J]. 吳興亮,戴玉成,林尤河.  貴州科學(xué). 2004(04)
[5]中國靈芝科資源及其地理分布Ⅱ[J]. 吳興亮,戴玉成,林尤河.  貴州科學(xué). 2004(03)
[6]中國靈芝科資源及其地理分布Ⅰ[J]. 吳興亮,戴玉成,林龍河.  貴州科學(xué). 2004(02)
[7]靈芝的臨床應(yīng)用進展[J]. 郭金龍.  福建中醫(yī)藥. 1986(06)

碩士論文
[1]紅色紅曲菌M-7全局性調(diào)控因子laeA功能的研究[D]. 蔡麗.華中農(nóng)業(yè)大學(xué) 2013



本文編號：3133269