食管癌是世界范圍內(nèi)最常見的消化道腫瘤之一,食管鱗癌在已確診的食管癌中占據(jù)90%的比例,而其中大約70%的病例發(fā)生在中國。食管鱗癌是世界第六、中國第四致死性的癌癥,其5年總生存率不超過25%,主要歸咎于患者在確診時就已經(jīng)進入晚期,往往伴隨著腫瘤局部浸潤和遠端轉(zhuǎn)移。因此,提高食管鱗癌的早期診斷和抑制腫瘤轉(zhuǎn)移成為當(dāng)前工作的重中之重。microRNA（miRNA）是一類小分子非編碼RNA,能通過降解靶mRNA或者抑制翻譯的方式來調(diào)節(jié)基因表達,在多種生理和病理過程中發(fā)揮重要作用。近些年的研究顯示,miRNA通過各種不同途徑參與食管鱗癌的發(fā)生和進展。在本研究中,我們應(yīng)用一個體外Transwell模型,旨在從包含約1000個前體miRNA的慢病毒文庫中篩查出促進食管鱗癌浸潤轉(zhuǎn)移的miRNA。結(jié)果,一個由miR-99b/let-7e/miR-125a三者組成的miRNA基因簇從候選者中脫穎而出。過表達miR-99b/let-7e/miR-125a基因簇在體外促進食管鱗癌細胞的侵襲和遷移,并且誘導(dǎo)動物體內(nèi)實驗性轉(zhuǎn)移;與此同時,對細胞增殖和細胞周期并無影響。在食管鱗癌組織標(biāo)本中,我們檢測到miR-99b/... 

【文章來源】：北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院北京市 211工程院校 985工程院校

【文章頁數(shù)】：127 頁

【學(xué)位級別】：博士

【部分圖文】：

圖１－４采用反向ＰＣＲ方法突變特定ＤＮＡ序列的原理圖

?ｂｙ?ｓｅｑｕｅｎｃｉｎｇ??圖１－５?ｍｉＲＮＡ慢病毒文庫篩選流程示意圖。??接下來，我們分析了測序結(jié)果，計算出各個ｍｉＲＮＡ的出現(xiàn)頻率（圖１－６Ａ），發(fā)??現(xiàn)其中頻率較高的ｒｄＲ－９９ｂ，?ｌｅｔ－７ｅ，?ｍｉＲ－１２５ａ來自于同一個ｍｉＲＮＡ?ｃｌｕｓｔｅｒ?（基因簇），??這個ｃｌｕｓｔｅｒ定位于人類染色體１９ｑｌ３．４１（參考ＧＲＣｈ３８／ｈｇ３８，?Ｄｅｃ．?２０１３），并在小鼠、??黑猩猩等多個哺乳動物基因組中存在同源序列（圖１－６Ｂ）。??Ａ?Ｂ??．ｍ，Ｒ．ｌ２５ａ??＿?９５ｂｐ?＿?３６８?ｂｐ?＿??＼－ｊ％?■?ｍｉＲ－２６ａ－ｌ??■?ｍｉＲ－３７３??＾?▼?—?＿?獅Ｐ＿?胸－??ｍｉＲ－９９ｂ??圖１－６?ｍｉＲＮＡ慢病毒文庫篩選得到的可能促進食管癌細胞侵襲的ｍｉＲＮＡＡ篩選得到的各??個ｍｉＲＮＡ及其所占比例。Ｂ．?ｍｉＲ－９９ｂ／ｌｅｔ－７ｅ／ｍｉＲ－１２５ａ?ｃｌｕｓｔｅｒ在基因組上的定位示意圖。??３４??

??ｂｙ?ｓｅｑｕｅｎｃｉｎｇ??圖１－５?ｍｉＲＮＡ慢病毒文庫篩選流程示意圖。??接下來，我們分析了測序結(jié)果，計算出各個ｍｉＲＮＡ的出現(xiàn)頻率（圖１－６Ａ），發(fā)??現(xiàn)其中頻率較高的ｒｄＲ－９９ｂ，?ｌｅｔ－７ｅ，?ｍｉＲ－１２５ａ來自于同一個ｍｉＲＮＡ?ｃｌｕｓｔｅｒ?（基因簇），??這個ｃｌｕｓｔｅｒ定位于人類染色體１９ｑｌ３．４１（參考ＧＲＣｈ３８／ｈｇ３８，?Ｄｅｃ．?２０１３），并在小鼠、??黑猩猩等多個哺乳動物基因組中存在同源序列（圖１－６Ｂ）。??Ａ?Ｂ??．ｍ，Ｒ．ｌ２５ａ??＿?９５ｂｐ?＿?３６８?ｂｐ?＿??＼－ｊ％?■?ｍｉＲ－２６ａ－ｌ??■?ｍｉＲ－３７３??＾?▼?—?＿?獅Ｐ＿?胸－??ｍｉＲ－９９ｂ??圖１－６?ｍｉＲＮＡ慢病毒文庫篩選得到的可能促進食管癌細胞侵襲的ｍｉＲＮＡＡ篩選得到的各??個ｍｉＲＮＡ及其所占比例。Ｂ．?ｍｉＲ－９９ｂ／ｌｅｔ－７ｅ／ｍｉＲ－１２５ａ?ｃｌｕｓｔｅｒ在基因組上的定位示意圖。??３４??


本文編號：3131495