普魯蘭酶屬于脫支酶的一種,其可以高效并且專一的的切開支鏈淀粉中的α-1,6-糖苷鍵,從而切下支鏈淀粉的整個支鏈,形成直連淀粉。這個特點(diǎn)決定了普魯蘭酶蛋白在以淀粉為原料的的工業(yè)生產(chǎn)活動中,不管是單獨(dú)使用還是配合其他淀粉酶共同使用,在降低淀粉質(zhì)類原料的使用量、降低生產(chǎn)成本、減少廢棄尾物,保護(hù)環(huán)境方便具有很高應(yīng)用價值。與普魯蘭酶高的應(yīng)用價值不相匹配的是其較高的酶產(chǎn)品的價格,由于普魯蘭酶是淀粉酶類中唯一一種我國還不能自主生產(chǎn)的酶類,能夠應(yīng)用到實(shí)際進(jìn)行工業(yè)化生產(chǎn)的高產(chǎn)普魯蘭酶工程菌一直是相關(guān)研究的熱點(diǎn)。由于普魯蘭酶分子量較大,所以在大腸桿菌中的表達(dá)會受到比較大的限制。透明顫菌血紅蛋白的表達(dá)受到環(huán)境中氧氣含量高低的調(diào)控,可以協(xié)助氧氣進(jìn)入細(xì)胞,加快氧氣在細(xì)胞內(nèi)的傳遞,在微生物代謝產(chǎn)物的積累方面有積極的作用。實(shí)驗(yàn)室保藏了一株可以產(chǎn)生普魯蘭酶蛋白的菌種,本實(shí)驗(yàn)通過蛋白質(zhì)譜與高通量測序相結(jié)合的方法,得到普魯蘭酶蛋白的完整編碼序列pulA。通過分子克隆技術(shù),使之成功在大腸桿菌BL21（DE3）中表達(dá),透明顫菌血紅蛋白編碼基因vgb與pulA基因通過共生質(zhì)粒一起在宿主菌中表達(dá)。通過酶活性高低對比,vgb基因在... 

【文章來源】：深圳大學(xué)廣東省

【文章頁數(shù)】：52 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

普魯蘭酶作用普魯蘭糖機(jī)制

生物信息分析流程圖

保藏菌種上清蛋白與市面所售普魯蘭酶蛋白SDS-PAGE電泳


本文編號：3119038