發(fā)布時(shí)間：2021-04-05 00:15

　　囊泡病毒（ascovirus）是一類較新發(fā)現(xiàn)的含有大分子雙鏈DNA基因組的昆蟲病毒。囊泡病毒主要侵染鱗翅目夜蛾科昆蟲,引起寄主昆蟲產(chǎn)生慢性致死病。囊泡病毒侵染使細(xì)胞裂解產(chǎn)生包含病毒粒子的囊泡,囊泡在血淋巴中積累,使血淋巴呈乳白色。囊泡病毒侵染形成包含病毒粒子囊泡的過程類似于凋亡小體的形成過程,囊泡病毒通過凋亡形成囊泡而不是凋亡小體。本研究以HvAV-3h為實(shí)驗(yàn)對(duì)象,擬通過研究HvAV-3h侵染與細(xì)胞凋亡的關(guān)系及決定凋亡過程的基因?yàn)槟遗莶《厩秩拘纬赡遗萏峁┬碌睦碚撘罁?jù)。主要結(jié)果如下:快速測(cè)定囊泡病毒滴度方法的建立。通過測(cè)定HvAV-3h侵染細(xì)胞不同時(shí)期的細(xì)胞凋亡率并結(jié)合顯微觀察研究結(jié)果確定病毒凋亡檢測(cè)的最適侵染時(shí)間為24 h p.i.。梯度稀釋病毒原液侵染細(xì)胞24 h后臺(tái)盼藍(lán)染色計(jì)數(shù)染色細(xì)胞個(gè)數(shù)并計(jì)算死細(xì)胞率。病毒侵染組每孔的細(xì)胞死亡率高于對(duì)照組則判定為病毒侵染孔,否則為病毒未侵染孔。并根據(jù)Reed-Muench的方法測(cè)定病毒的滴度為5.62×10⁸ TCID₅₀/mL。HvAV-3h侵染細(xì)胞12 h誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡,但病毒侵染24 h時(shí)能抑制由放... 

【文章來源】：華中農(nóng)業(yè)大學(xué)湖北省 211工程院校 教育部直屬院校

【文章頁(yè)數(shù)】：75 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

囊泡病毒的細(xì)胞病理學(xué)示意圖Fig.1-2Schematicillustrationtypicalofascoviruscytopathology1.1.2囊泡病毒滴度

IAPs 的結(jié)構(gòu)域示意圖，淺藍(lán)色長(zhǎng)框表示 BIR 結(jié)構(gòu)域，粉色短框表示 RING 結(jié)構(gòu)域（Vaux and Silke 2005）。圖1-3 IAP蛋白包含BIR結(jié)構(gòu)域和RING結(jié)構(gòu)域Fig. 1-3 IAPprotein contains BIR domain and RING1.2.4 IAP 功能iap 基因廣泛存在于桿狀病毒中，甚至在哺乳類動(dòng)物中都發(fā)現(xiàn)有桿狀病毒 iap 基因的同源基因（Schultz and Friesen 2009）。IAP 蛋白對(duì)病毒侵染誘導(dǎo)的細(xì)胞凋亡有抑制作用，但并非所有的 IAPs 都含有抗凋亡活性，一些病毒 IAPs 具有誘導(dǎo)或延遲細(xì)胞凋亡的能力，或在病毒復(fù)制中起某些作用（Clem2015，Yuetal2008，Srinivasulaand Ashwell 2008）。功能分析顯示 Hycu-IAP3 具有抗凋亡活性，然而，Hycu-IAP1具有誘導(dǎo)美國(guó)白蛾核型多角體病毒（HycuMNPV）細(xì)胞凋亡的能力（Ikedaetal2004

囊泡病毒 HvAV-3h iap-like 基因的功能分析第 3 章 結(jié)論與討論速測(cè)定囊泡病毒滴度方法建立及滴度測(cè)定vAV-3h 誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè) HvAV-3h 侵染 IOZCAS-Spex-II-A 細(xì)胞不同時(shí)期：與對(duì)照組的細(xì)胞凋亡率相比，HvAV-3h 侵染 12 h 的細(xì)胞凋HvAV-3h 侵染 24h 的細(xì)胞凋亡率約為 61.34%，HvAV-3h 侵染 3為 63.7%。HvAV-3h 侵染組的細(xì)胞凋亡率顯著高于對(duì)照組。

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]Genome analysis of Heliothis virescens ascovirus 3h isolated from China[J]. Guo-Hua Huang,Dian-Hai Hou,Manli Wang,Xiao-Wen Cheng,Zhihong Hu.  Virologica Sinica. 2017(02)



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