沉默整合素連接激酶基因?qū)θ税螂啄蚵飞掀ぐ㏕24細胞生物學特性的影響
發(fā)布時間:2021-03-31 15:22
目的觀察人膀胱尿路上皮癌T24細胞中整合素連接激酶(ILK)基因的表達,通過ILK-小干擾RNA(siRNA)轉染模型驗證人膀胱尿路上皮癌細胞中ILK基因沉默與膀胱尿路上皮癌細胞生物特性之間的關系。方法選擇人尿路上皮癌T24細胞(中國科學院細胞庫)進行體外實驗,通過構建一套ILK-siRNA轉染模型,轉染T24細胞并通過反轉錄-聚合酶鏈反應(RT-PCR)檢測出最有效的干擾序列,將T24細胞分為3組,即膀胱尿路上皮癌T24細胞組(陰性對照組)、膀胱尿路上皮癌T24細胞陰性轉染組(陰性轉染組)和膀胱尿路上皮癌T24細胞+ILK-siRNA組(目的轉染組),分別采用RT-PCR和蛋白質(zhì)印跡法(Western blot)的方法定量檢測3組細胞中ILK mRNA和ILK的表達。采用流式細胞術、噻唑藍(MTT)法分別檢測3組細胞的細胞增殖能力和凋亡率,進行細胞侵襲、遷移實驗。實驗數(shù)據(jù)以均值±標準差(Mean±SD)表示。組間比較采用t檢驗。結果 3組細胞流式細胞術檢測(亞G0/G1期、G0/G1期)為(3.16%、45.55%)、(3.23%、46.65%)、(7.86%、55.43%)。MTT...
【文章來源】:中華實驗外科雜志. 2020,37(03)北大核心CSCD
【文章頁數(shù)】:3 頁
本文編號:3111661
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