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哈維氏弧菌yjeE和yeaZ基因定點(diǎn)突變及生物學(xué)性質(zhì)研究

發(fā)布時間:2021-03-29 21:07
  哈維氏弧菌(Vibrio harveyi)廣泛存在于海洋環(huán)境,在極端環(huán)境下可進(jìn)入非可培養(yǎng)(Viable but non-culturable,VBNC)狀態(tài),VBNC細(xì)胞在適宜條件下復(fù)蘇為可培養(yǎng)形式。本論文研究了過氧化氫和低溫誘導(dǎo)哈維氏弧菌形成的VBNC狀態(tài)。對哈維氏弧菌細(xì)胞生長及環(huán)境應(yīng)激相關(guān)的YjeE、YeaZ蛋白進(jìn)行了原核表達(dá)及生物學(xué)性質(zhì)研究,利用定點(diǎn)突變技術(shù)研究了YjeE和YeaZ的酶活性位點(diǎn),研究了重組蛋白的酶活性與生物學(xué)作用相關(guān)性,以及不同重組蛋白對哈維氏弧菌的促生長及促細(xì)胞復(fù)蘇作用,主要研究結(jié)果如下:哈維氏弧菌SF-1在4℃低溫誘導(dǎo)70 d后,細(xì)胞進(jìn)入活的非可培養(yǎng)狀態(tài)。當(dāng)用50 mM的H2O2誘導(dǎo)時,哈維氏弧菌細(xì)胞在96 h進(jìn)入VBNC狀態(tài)。用LIVE/DEAD BacLight試劑盒測定過氧化氫誘導(dǎo)過程中活細(xì)胞數(shù)和細(xì)胞總數(shù)變化,發(fā)現(xiàn)總細(xì)胞數(shù)和活細(xì)胞數(shù)均保持微小變化,而可培養(yǎng)細(xì)胞數(shù)下降為零,表明細(xì)胞進(jìn)入VBNC狀態(tài)。將過氧化氫酶、丙酮酸鈉、及其類似物分別添加到VBNC狀態(tài)的哈維氏弧菌細(xì)胞中,發(fā)現(xiàn)過氧化氫酶、丙酮酸鈉、α-丁酮酸鈉鹽... 

【文章來源】:蘭州理工大學(xué)甘肅省

【文章頁數(shù)】:63 頁

【學(xué)位級別】:碩士

【部分圖文】:

哈維氏弧菌yjeE和yeaZ基因定點(diǎn)突變及生物學(xué)性質(zhì)研究


激光掃描共聚焦顯微鏡下,觀察經(jīng)H2O2處理的細(xì)胞被染色照片

形態(tài)圖,哈維,弧菌,放大倍數(shù)


碩士學(xué)位論文 2.3.3.2 電鏡觀察 當(dāng)用掃描電子顯微鏡觀察時,正常狀態(tài)哈維氏弧菌的細(xì)胞為桿狀,VBNC 狀態(tài)哈維氏弧菌的細(xì)胞則變?yōu)榍蛐,并且?xì)胞體積減小。正常狀態(tài)細(xì)胞的平均大小為 1.6ⅹ0.5μm。VBNC 狀態(tài)細(xì)胞的平均半徑為 0.5 μm。

哈維氏弧菌yjeE和yeaZ基因定點(diǎn)突變及生物學(xué)性質(zhì)研究


系統(tǒng)發(fā)育樹

【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]過氧化氫處理中鼠傷寒沙門氏菌VBNC態(tài)形成及其機(jī)制解析[J]. 聶新穎,廖紅梅,劉元法.  食品與機(jī)械. 2019(07)
[2]微生物VBNC狀態(tài)形成及復(fù)蘇機(jī)制[J]. 張碩,丁林賢,蘇曉梅.  微生物學(xué)報. 2018(08)
[3]Rpf對印染廢水中VBNC菌復(fù)蘇活化的研究[J]. 高學(xué)宇.  環(huán)境科學(xué)導(dǎo)刊. 2016(S1)
[4]基于VBNC狀態(tài)復(fù)蘇的熒光假單胞桿菌CHZYR63對毒死蜱的酶降解效果[J]. 丁林賢,吳咚咚,付惠玲,王強(qiáng),蔡慧慧,施潔瑩,王新全,周育.  浙江師范大學(xué)學(xué)報(自然科學(xué)版). 2015(03)
[5]哈維弧菌及其主要致病因子的研究進(jìn)展[J]. 李洋,李強(qiáng),張顯昱.  中國農(nóng)業(yè)科技導(dǎo)報. 2014(04)
[6]活的但非可培養(yǎng)(VBNC)狀態(tài)菌的研究進(jìn)展[J]. 丁林賢,蘇曉梅,橫田明.  微生物學(xué)報. 2011(07)
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[8]三個大腸桿菌新基因與其生長密切相關(guān)[J]. 俞燕.  中國家禽. 2009(14)
[9]致病性哈維氏弧菌溶血素基因克隆及其檢測[J]. 陳吉祥,楊慧,顏顯輝,鐘英斌,張曉華,李筠.  中國水產(chǎn)科學(xué). 2005(05)
[10]哈維氏弧菌黑鯛分離株BK-1培養(yǎng)條件優(yōu)化研究[J]. 潘曉藝,沈錦玉,尹文林,曹錚,馬海其,?姑.  浙江海洋學(xué)院學(xué)報(自然科學(xué)版). 2005(03)

博士論文
[1]弧菌YeaZ基因表達(dá)、蛋白性質(zhì)及其對環(huán)境微生物促生長作用研究[D]. 李彥林.蘭州理工大學(xué) 2017

碩士論文
[1]紅平紅球菌rpf基因突變、生物活性及應(yīng)用研究[D]. 羅旦.蘭州理工大學(xué) 2019
[2]哈維氏弧菌YeaZ互作蛋白基因克隆表達(dá)及其性質(zhì)研究[D]. 芮文鴻.蘭州理工大學(xué) 2018
[3]添加藤黃球菌SRpf對序批式反應(yīng)器(SBR)廢水處理效果的影響及其機(jī)理初探[D]. 劉殷東.浙江大學(xué) 2016
[4]海洋弧菌復(fù)蘇促進(jìn)因子家族糖蛋白酶的研究[D]. 趙明君.中國海洋大學(xué) 2011
[5]辛辛那提弧菌、哈維氏弧菌和鰻弧菌活的非可培養(yǎng)狀態(tài)的研究[D]. 鐘琳紅.中國海洋大學(xué) 2009



本文編號:3108191

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