發(fā)布時(shí)間：2021-03-28 05:12

　　鎘（Cd）是一種二價(jià)重金屬元素,過(guò)量的Cd積累會(huì)危害人類健康、影響植物生長(zhǎng)。通過(guò)Cd脅迫下轉(zhuǎn)錄組測(cè)序分析,發(fā)現(xiàn)水稻OsLCD3受Cd誘導(dǎo)表達(dá)。OsLCD3具有磷酸激酶結(jié)構(gòu)域,沒(méi)有轉(zhuǎn)運(yùn)功能,也不屬于解毒蛋白,探討OsLCD3對(duì)Cd響應(yīng)的機(jī)理及其功能具有重要理論意義。本研究通過(guò)CRISPR/Cas9技術(shù)獲得突變體lcd3,結(jié)合轉(zhuǎn)錄組測(cè)序、酵母雙雜交等技術(shù),對(duì)OsLCD3在水稻中生物學(xué)功能以及在鎘離子運(yùn)輸調(diào)節(jié)中的作用進(jìn)行了初步研究。主要結(jié)果如下:1.利用OsLCD3的基因組序列設(shè)計(jì)基因編輯靶位點(diǎn),構(gòu)建OsLCD3-Cas9敲除載體,以日本晴為背景,通過(guò)遺傳轉(zhuǎn)化獲得43株基因編輯的敲除水稻,鑒定到23株陽(yáng)性植株,包括12株純合體和11株雜合體�？寺〕鯫sLCD3基因的CDS片段,通過(guò)同源重組的方法將其連到有2×35S啟動(dòng)子的pHB過(guò)表達(dá)載體上,轉(zhuǎn)入水稻中,經(jīng)鑒定得到4株陽(yáng)性植株,選取純合突變體lcd3-1（-7bp）、lcd3-19（-5bp）、OE-2、OE-3進(jìn)行后續(xù)實(shí)驗(yàn)。2.對(duì)lcd3-1,lcd3-19和WT的主要農(nóng)藝學(xué)性狀進(jìn)行觀察和統(tǒng)計(jì),發(fā)現(xiàn)突變體的千粒重顯著高于WT,結(jié)實(shí)率顯著低于... 

【文章來(lái)源】：湖南師范大學(xué)湖南省 211工程院校

【文章頁(yè)數(shù)】：74 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

從土壤至籽粒Cd轉(zhuǎn)運(yùn)模型

酵母雙雜交的蛋白質(zhì)互作機(jī)理Fig.1-2DetectionofproteininteractionmechanismbyYeasttwo-hybridsystem

DUALmembranesystem工作原理


本文編號(hào)：3104948