第一部分JAK2基因敲除對(duì)糖尿病小鼠勃起功能的影響及機(jī)制[目的]探討非受體型酪氨酸激酶2（JAK2）基因敲除對(duì)糖尿病小鼠勃起功能的影響及機(jī)制。[方法]40只8周齡雄性條件性JAK2基因敲除(Cre^+/+-Jak2^fl/fl)小鼠隨機(jī)均分為4組:正常對(duì)照組、JAK2基因敲除組、糖尿病組和糖尿病+JAK2基因敲除組。糖尿病通過(guò)連續(xù)5天腹腔注射鏈脲佐菌素60mg/kg/d來(lái)誘導(dǎo)。3個(gè)月后,再通過(guò)連續(xù)5天腹腔注射他莫昔芬20mg/kg/d來(lái)誘導(dǎo)JAK2基因敲除。再過(guò)1個(gè)月后,通過(guò)陰莖海綿體內(nèi)壓（ICP）/平均動(dòng)脈壓（MAP）來(lái)評(píng)價(jià)勃起功能,收集陰莖海綿體標(biāo)本,用Western blot、免疫組化、免疫熒光等方法檢測(cè)相關(guān)蛋白的表達(dá)。[結(jié)果]在正常小鼠中敲除JAK2基因?qū)Σ鸸δ軣o(wú)明顯影響。糖尿病小鼠的勃起功能明顯降低,且JAK2磷酸化增加（P<0.05）。在糖尿病小鼠中敲除JAK2基因后,JAK2的表達(dá)和磷酸化均顯著減少,小鼠的勃起功能明顯改善（P<0.05）。糖尿病可以導(dǎo)致小鼠陰莖海綿體中內(nèi)皮源性一氧化氮合酶（e NOS）的磷酸化減少、N... 

【文章來(lái)源】：華中科技大學(xué)湖北省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁(yè)數(shù)】：124 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：博士

【部分圖文】：

基因鑒定的瓊脂糖凝膠電泳結(jié)果

通過(guò)電刺激海綿體神經(jīng)誘導(dǎo)勃起,利用ICP/MAP來(lái)評(píng)判小鼠的勃起功能。JAK2-/-組小鼠的勃起功能與Control組相比無(wú)顯著差異(圖1-2)。DM組小鼠的勃起功能明顯低于Control組小鼠(P<0.05)。DM+JAK2-/-組小鼠的勃起功能也低于Control組小鼠,但比DM組有所改善(P<0.05)。這說(shuō)明,在正常小鼠體內(nèi)敲除JAK2基因,不會(huì)對(duì)勃起功能造成明顯影響。而在糖尿病小鼠中敲除JAK2基因,可改善勃起功能。4. JAK2的表達(dá)和磷酸化情況

利用Western blot檢測(cè)各組小鼠陰莖海綿體中JAK2的表達(dá)和磷酸化情況,P-JAK2是JAK2的激活狀態(tài)。通過(guò)免疫組化來(lái)進(jìn)一步檢測(cè)陰莖海綿體中JAK2的表達(dá)情況。Western blot結(jié)果顯示,與Control組相比,DM組小鼠陰莖海綿體中JAK2的表達(dá)無(wú)明顯增加,但JAK2磷酸化顯著提高(圖1-3,P<0.05)。JAK2-/-組小鼠JAK2的表達(dá)和磷酸化水平均低于Control組(P<0.05)。DM+JAK2-/-組小鼠JAK2的表達(dá)和磷酸化水平均低于Control組,且低于DM組(P<0.05)。免疫組化的結(jié)果與Western blot類(lèi)似(圖1-4)。這些結(jié)果表明糖尿病對(duì)JAK2的基礎(chǔ)表達(dá)無(wú)明顯影響,但可以顯著提高JAK2的活性。敲除JAK2基因既極大地降低了JAK2的表達(dá)量,也明顯減少了JAK2的磷酸化水平。

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]經(jīng)NO-cGMP-PDE5通路治療勃起功能障礙的中藥研究進(jìn)展[J]. 廖暉,Jacob Rajfer.  中華男科學(xué)雜志. 2012(03)
[2]Antioxidant properties of berberine on cultured rabbit corpus cavernosum smooth muscle cells injured by hydrogen peroxide[J]. Yan TAN~(2,3,5),Qiang TANG~4,Ben-rong HU~4,Ji-zhou XIANG~4~2 Institute of Urology,Renmin Hospital,Yunyang Medical College,Shiyan 442000 China,~3 Department of Pharmacology,Yunyang MedicalCollege,Shiyan 442000,China,~4 Department of Pharmacology,Tongji Medical College,Huazhong University of Science and Teehnology,Wuhan 430030,China.  Acta Pharmacologica Sinica. 2007(12)



本文編號(hào)：3102594