紅花油體蛋白家族CtOleosin基因克
發(fā)布時間：2021-03-24 18:09
紅花,1-2年生草本植物,是近年來國內(nèi)外發(fā)展較快的新型油料作物之一,含油量高達35-47%,其亞油酸含量高達73-80%,號稱“亞油酸之王”。本實驗以紅花為研究對象,利用RT-PCR技術(shù)克隆紅花CtOleosin家族基因全長cDNA片段;生物信息學(xué)方法分析其理化性質(zhì)及結(jié)構(gòu)特性;利用qRT-PCR方法檢測該家族基因在紅花不同組織器官、種子不同發(fā)育時期以及不同脅迫處理下的表達規(guī)律;構(gòu)建植物超表達載體,轉(zhuǎn)化擬南芥,獲得T3代轉(zhuǎn)基因擬南芥種子,進而研究其功能。具體研究結(jié)果如下:1、篩選出最佳內(nèi)參為EF1ɑ。qRT-PCR結(jié)果表明,CtOleosin家族基因具有類似的表達模式。該家族基因主要在紅花的花和種子中表達,在根、莖、葉、子葉、胚軸幾乎不表達;在紅花種子不同發(fā)育時期,該家族基因的表達量逐漸升高,28d時達到最高,之后下降;經(jīng)ABA、SA、NaCl處理后發(fā)現(xiàn)該家族基因受它們的調(diào)控影響顯著。2、利用RT-PCR技術(shù)成功克隆了CtOleosin家族基因的全長cDNA片段,并對該家族基因進行生物信息學(xué)分析,結(jié)果顯示,CtOleosin1-8家族基因分別編碼161,137,160,185,211,2...
【文章來源】：吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)吉林省
【文章頁數(shù)】：79 頁
【學(xué)位級別】：碩士
【部分圖文】：
油體結(jié)構(gòu)模型
位論文 Oleosin2 促進油體融合。成熟種子中 Oleosin 一旦缺白結(jié)構(gòu)及生物學(xué)作用（Caleosin）以 Ca2+結(jié)合的方式存在于油體表面，其油體穩(wěn)定等。油體鈣蛋白的結(jié)構(gòu)與油體蛋白結(jié)構(gòu)類似的疏水區(qū)和 C-端的親水區(qū) 3 部分組成。油體鈣蛋白端都為親水區(qū)，油體蛋白 C 端為兩親性(兼親水性和白有相似的功能，可以維持油體穩(wěn)定性[51]。有研究構(gòu)紊亂，說明油體鈣蛋白對維持油體結(jié)構(gòu)具有重要的不僅受 ABA 調(diào)控而且還與植物開花有關(guān)[53]。
圖 1-1 載體結(jié)構(gòu)示意圖Fig.1-1 Structure diagram of pOBT vector圖 1-2 載體構(gòu)建示意圖Fig.1-2 Structure of recombinant vector放置 1.5 mL 離心管內(nèi)，加入 Solution I 連接酶，16℃反應(yīng) 30m取單一菌落進行 PCR 鑒定，經(jīng)鑒定正確的菌株，保菌，保存于系見表 1-8。表 1-8 表達載體連接體系
【參考文獻】：
期刊論文
[1]西藏白菜型油菜種子油體、蛋白體、含油量和蛋白質(zhì)含量的相關(guān)性分析[J]. 侯維海,王建林,旦巴,胡單. 中國油料作物學(xué)報. 2017(05)
[2]紅花籽油的功效及應(yīng)用前景分析[J]. 姜黎. 農(nóng)產(chǎn)品加工. 2017(12)
[3]紅花籽油對D-半乳糖致衰老小鼠模型的抗衰老作用[J]. 韓小苗,吳蘇喜,吳美芳,馬斌. 食品與機械. 2016(10)
[4]不同含油量文冠果種子掃描電鏡顯微結(jié)構(gòu)觀察[J]. 郭維,李佳興,岳妍,李琳琳,金華. 黑龍江農(nóng)業(yè)科學(xué). 2016(10)
[5]紅花轉(zhuǎn)錄物組中篩選的Unigene100791基因克隆、生物信息學(xué)分析及功能預(yù)測[J]. 陳笑,沈彥岐,王清曼,杜林娜,盧玉彬,強衛(wèi)東,郭詠昕,王紅雨,楊瑩,楊晶,魏健. 食品工業(yè)科技. 2016(23)
[6]紅花藥理作用及其開發(fā)與應(yīng)用研究進展[J]. 易善勇,官麗莉,楊晶,李海燕,李校堃,姜潮,黃建. 北方園藝. 2015(05)
[7]紅花油酸去飽和酶基因的克隆及序列分析[J]. 王文慧,強衛(wèi)東,王清曼,鄒德毅,吳治邦,王晶晶,王瀝浩,楊晶. 西北農(nóng)林科技大學(xué)學(xué)報(自然科學(xué)版). 2014(12)
[8]希金斯炭疽菌腺苷酸環(huán)化酶生物信息學(xué)分析[J]. 韓長志. 湖北農(nóng)業(yè)科學(xué). 2014(20)
[9]紅花籽油對深Ⅱ度燙傷兔創(chuàng)面愈合的影響[J]. 呂瑞林,吳繼炎,鄭國平,傅智慧,程翔,楊建秋. 中國中西醫(yī)結(jié)合外科雜志. 2013(04)
[10]紅花的化學(xué)成分及其藥理活性研究進展[J]. 扈曉佳,殷莎,袁婷婷,王玉玨,黃珍茹,陸陽. 藥學(xué)實踐雜志. 2013(03)
本文編號：3098156
【文章來源】：吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)吉林省
【文章頁數(shù)】：79 頁
【學(xué)位級別】：碩士
【部分圖文】：
油體結(jié)構(gòu)模型
位論文 Oleosin2 促進油體融合。成熟種子中 Oleosin 一旦缺白結(jié)構(gòu)及生物學(xué)作用（Caleosin）以 Ca2+結(jié)合的方式存在于油體表面，其油體穩(wěn)定等。油體鈣蛋白的結(jié)構(gòu)與油體蛋白結(jié)構(gòu)類似的疏水區(qū)和 C-端的親水區(qū) 3 部分組成。油體鈣蛋白端都為親水區(qū)，油體蛋白 C 端為兩親性(兼親水性和白有相似的功能，可以維持油體穩(wěn)定性[51]。有研究構(gòu)紊亂，說明油體鈣蛋白對維持油體結(jié)構(gòu)具有重要的不僅受 ABA 調(diào)控而且還與植物開花有關(guān)[53]。
圖 1-1 載體結(jié)構(gòu)示意圖Fig.1-1 Structure diagram of pOBT vector圖 1-2 載體構(gòu)建示意圖Fig.1-2 Structure of recombinant vector放置 1.5 mL 離心管內(nèi)，加入 Solution I 連接酶，16℃反應(yīng) 30m取單一菌落進行 PCR 鑒定，經(jīng)鑒定正確的菌株，保菌，保存于系見表 1-8。表 1-8 表達載體連接體系
【參考文獻】：
期刊論文
[1]西藏白菜型油菜種子油體、蛋白體、含油量和蛋白質(zhì)含量的相關(guān)性分析[J]. 侯維海,王建林,旦巴,胡單. 中國油料作物學(xué)報. 2017(05)
[2]紅花籽油的功效及應(yīng)用前景分析[J]. 姜黎. 農(nóng)產(chǎn)品加工. 2017(12)
[3]紅花籽油對D-半乳糖致衰老小鼠模型的抗衰老作用[J]. 韓小苗,吳蘇喜,吳美芳,馬斌. 食品與機械. 2016(10)
[4]不同含油量文冠果種子掃描電鏡顯微結(jié)構(gòu)觀察[J]. 郭維,李佳興,岳妍,李琳琳,金華. 黑龍江農(nóng)業(yè)科學(xué). 2016(10)
[5]紅花轉(zhuǎn)錄物組中篩選的Unigene100791基因克隆、生物信息學(xué)分析及功能預(yù)測[J]. 陳笑,沈彥岐,王清曼,杜林娜,盧玉彬,強衛(wèi)東,郭詠昕,王紅雨,楊瑩,楊晶,魏健. 食品工業(yè)科技. 2016(23)
[6]紅花藥理作用及其開發(fā)與應(yīng)用研究進展[J]. 易善勇,官麗莉,楊晶,李海燕,李校堃,姜潮,黃建. 北方園藝. 2015(05)
[7]紅花油酸去飽和酶基因的克隆及序列分析[J]. 王文慧,強衛(wèi)東,王清曼,鄒德毅,吳治邦,王晶晶,王瀝浩,楊晶. 西北農(nóng)林科技大學(xué)學(xué)報(自然科學(xué)版). 2014(12)
[8]希金斯炭疽菌腺苷酸環(huán)化酶生物信息學(xué)分析[J]. 韓長志. 湖北農(nóng)業(yè)科學(xué). 2014(20)
[9]紅花籽油對深Ⅱ度燙傷兔創(chuàng)面愈合的影響[J]. 呂瑞林,吳繼炎,鄭國平,傅智慧,程翔,楊建秋. 中國中西醫(yī)結(jié)合外科雜志. 2013(04)
[10]紅花的化學(xué)成分及其藥理活性研究進展[J]. 扈曉佳,殷莎,袁婷婷,王玉玨,黃珍茹,陸陽. 藥學(xué)實踐雜志. 2013(03)
本文編號：3098156
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