茉莉酸在煙草的煙堿代謝調(diào)控中發(fā)揮關(guān)鍵作用。為揭示茉莉酸介導(dǎo)煙堿代謝的分子機制,本研究分析了下游轉(zhuǎn)錄因子MYC2和MYB305對煙堿合成相關(guān)基因的調(diào)控作用。以前期培育的MYC2和MYB305過表達植株（MYC2-OE、MYB305-OE）和基因沉默植株（MYC2-RI、MYB305-RI）、茉莉酸受體蛋白COI1的基因沉默植株（COI1-RI）和COI1沉默植株與MYC2和MYB305過表達植株的雜交后代（COI1-RI×MYC2-OE、COI1-RI×MYB305-OE）、以及TN90對照煙草為材料,進行了茉莉酸敏感性及煙堿含量檢測,分析了MYC2和MYB305對煙草茉莉酸敏感特性及煙堿合成水平的影響;檢測了MYC2和MYB305轉(zhuǎn)基因材料中MYC2和MYB305的表達水平、以及ERF類煙堿合成調(diào)控因子基因（ERF189、ERF168）的表達水平,以解析MYC2、MYB305間的相互表達調(diào)控及其對煙堿代謝相關(guān)ERF調(diào)控因子基因的表達調(diào)控;并檢測了煙堿代謝功能基因[精氨酸脫羧酶（Arginine decarboxylase,ADC）、鳥氨酸脫羧酶（Ornithine decarboxyl... 

【文章來源】：中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院北京市

【文章頁數(shù)】：63 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
abstract
主要符號對照表
第一章 緒論
    1.1 煙堿合成過程與調(diào)控機制
        1.1.1 煙堿的合成
        1.1.2 激素調(diào)控
        1.1.3 煙堿合成關(guān)鍵基因PMT的分子調(diào)控
    1.2 茉莉酸途徑在煙堿代謝中的調(diào)控作用
        1.2.1 JA受體蛋白COI1
    1.3 bHLH家族轉(zhuǎn)錄因子
    1.4 MYB家族轉(zhuǎn)錄因子
    1.5 研究內(nèi)容及研究意義
        1.5.1 研究目的與意義
        1.5.2 技術(shù)路線
第二章 MYC2、MYB305 對煙草茉莉酸敏感特性及煙堿合成的影響分析
    2.1 材料與方法
        2.1.1 試驗材料
        2.1.2 試劑與儀器
        2.1.3 材料處理
        2.1.4 轉(zhuǎn)基因材料的鑒定
        2.1.5 轉(zhuǎn)基因材料的茉莉酸敏感性分析
        2.1.6 煙堿含量測定
    2.2 結(jié)果與分析
        2.2.1 轉(zhuǎn)基因植株的鑒定
        2.2.2 MYC2、MYB305 對煙草茉莉酸敏感性的影響
        2.2.3 MYC2、MYB305 對煙堿合成水平的影響
    2.3 討論
第三章 MYC2、MYB305 對煙堿代謝相關(guān)調(diào)控因子的表達調(diào)控
    3.1 材料與方法
        3.1.1 試驗材料
        3.1.2 試劑與儀器
        3.1.3 實驗方法
    3.2 結(jié)果與分析
        3.2.1 MYC2和MYB305 之間的表達調(diào)控作用
        3.2.2 MYC2、MYB305對ERF類煙堿合成調(diào)控基因ERF168/189 的表達調(diào)控
    3.3 討論
第四章 MYC2、MYB305 對煙堿代謝功能基因的表達調(diào)控
    4.1 材料與方法
        4.1.1 試驗材料
        4.1.2 試劑與儀器
        4.1.3 實驗方法
    4.2 結(jié)果與分析
        4.2.1 MYC2、MYB305 對煙堿代謝功能基因ADC、ODC的表達調(diào)控
        4.2.2 MYC2、MYB305 對煙堿代謝功能基因PMT、QPT的表達調(diào)控
    4.3 討論
第五章 MYC2、MYB305對COI1-RI的煙堿代謝恢復(fù)特性
    5.1 材料與方法
        5.1.1 試驗材料
        5.1.2 試劑與儀器
        5.1.3 實驗方法
    5.2 結(jié)果與分析
        5.2.1 MYC2、MYB305 對恢復(fù)COI1-RI煙草的茉莉酸敏感性分析
        5.2.2 MYC2、MYB305對COI1-RI煙草中煙堿合成水平的恢復(fù)特性分析
        5.2.3 MYC2、MYB305對COI1-RI煙草中煙堿代謝功能基因的表達調(diào)控
    5.3 討論
第六章 ADC、ODC的啟動子克隆及載體構(gòu)建
    6.1 材料與方法
        6.1.1 試驗材料
        6.1.2 試劑與儀器
        6.1.3 目的基因Pr ADC和 Pr ODC的獲得
        6.1.4 pENTR-D-TOP-PrADC和 pENTR-D-TOP-PrODC的構(gòu)建
        6.1.5 pMDC-attR-PrADC-GUS和 pMDC-attR-PrODC-GUS蛋白表達載體的構(gòu)建
        6.1.6 PrADC和 PrODC融合報告基因GUS轉(zhuǎn)基因材料的培育
    6.2 結(jié)果與分析
        6.2.1 NtADC和 NtODC基因的啟動子克隆
        6.2.2 NtADC和 NtODC基因啟動子融合GUS基因報告的植物表達載體構(gòu)建
        6.2.3 轉(zhuǎn)基因材料的培育
    6.3 討論
第七章 全文結(jié)論
    7.1 結(jié)論
    7.2 展望
參考文獻
附錄 A
致謝
作者簡歷



本文編號：3087910