褐飛虱是我國(guó)和亞洲稻區(qū)的主要害蟲(chóng)之一。目前主要通過(guò)噴灑農(nóng)藥進(jìn)行防控,但使用過(guò)量的農(nóng)藥會(huì)造成環(huán)境污染,同時(shí)也會(huì)使褐飛虱產(chǎn)生抗藥性。在生產(chǎn)實(shí)踐中選育抗性水稻品種,利用其安全、經(jīng)濟(jì)、有效的優(yōu)點(diǎn),已成為褐飛虱防治的首選辦法。本研究擬利用RNAi提高水稻抗蟲(chóng)性并嘗試解決轉(zhuǎn)基因稻米食用安全風(fēng)險(xiǎn)。眾所周知,褐飛虱中腸是褐飛虱與水稻互作的重要界面,腸道是昆蟲(chóng)消化食物和吸收營(yíng)養(yǎng)的重要器官,食物經(jīng)口進(jìn)入消化道后首先接觸到的是腸道的上皮細(xì)胞,因此利用RNAi技術(shù)干擾腸道上皮細(xì)胞的重要功能基因,可以抑制其對(duì)食物的正常消化和對(duì)營(yíng)養(yǎng)的正常吸收,進(jìn)而干擾其正常的生理代謝和生長(zhǎng)發(fā)育,達(dá)到防控褐飛虱的目的。因此,在害蟲(chóng)治理的研究中,RNAi分子作用的靶細(xì)胞應(yīng)優(yōu)先選擇害蟲(chóng)的腸道上皮細(xì)胞。本課題開(kāi)展的研究工作如下:①克隆了水稻胚乳特異性啟動(dòng)子Glub-4和韌皮部特異性啟動(dòng)子RSsl;構(gòu)建含針對(duì)生物Ⅰ型褐飛虱NQO基因的RNAi表達(dá)框、和刪除酶基因及其識(shí)別位點(diǎn)的Ti質(zhì)粒載體,轉(zhuǎn)化水稻明恢63（MH63）。鑒定轉(zhuǎn)基因水稻,通過(guò)Northern blot印跡雜交檢測(cè)陽(yáng)性植株中RNAi分子的表達(dá)水平,結(jié)果顯示,陽(yáng)性植株中RNAi分... 

【文章來(lái)源】：湖北大學(xué)湖北省

【文章頁(yè)數(shù)】：72 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

圖２－２?ｐＮＷ５５質(zhì)粒圖譜??２．２．４過(guò)渡質(zhì)粒的構(gòu)建??

圖２－３提取的水稻基因組ＤＮＡ??

圖２－６啟動(dòng)子克隆菌落ＰＣＲ鑒定??

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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碩士論文
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