發(fā)布時間：2021-03-15 07:52

　　褐飛虱是我國和亞洲稻區(qū)的主要害蟲之一。目前主要通過噴灑農(nóng)藥進行防控,但使用過量的農(nóng)藥會造成環(huán)境污染,同時也會使褐飛虱產(chǎn)生抗藥性。在生產(chǎn)實踐中選育抗性水稻品種,利用其安全、經(jīng)濟、有效的優(yōu)點,已成為褐飛虱防治的首選辦法。本研究擬利用RNAi提高水稻抗蟲性并嘗試解決轉(zhuǎn)基因稻米食用安全風(fēng)險。眾所周知,褐飛虱中腸是褐飛虱與水稻互作的重要界面,腸道是昆蟲消化食物和吸收營養(yǎng)的重要器官,食物經(jīng)口進入消化道后首先接觸到的是腸道的上皮細胞,因此利用RNAi技術(shù)干擾腸道上皮細胞的重要功能基因,可以抑制其對食物的正常消化和對營養(yǎng)的正常吸收,進而干擾其正常的生理代謝和生長發(fā)育,達到防控褐飛虱的目的。因此,在害蟲治理的研究中,RNAi分子作用的靶細胞應(yīng)優(yōu)先選擇害蟲的腸道上皮細胞。本課題開展的研究工作如下:①克隆了水稻胚乳特異性啟動子Glub-4和韌皮部特異性啟動子RSsl;構(gòu)建含針對生物Ⅰ型褐飛虱NQO基因的RNAi表達框、和刪除酶基因及其識別位點的Ti質(zhì)粒載體,轉(zhuǎn)化水稻明恢63（MH63）。鑒定轉(zhuǎn)基因水稻,通過Northern blot印跡雜交檢測陽性植株中RNAi分子的表達水平,結(jié)果顯示,陽性植株中RNAi分... 

【文章來源】：湖北大學(xué)湖北省

【文章頁數(shù)】：72 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖２－２?ｐＮＷ５５質(zhì)粒圖譜??２．２．４過渡質(zhì)粒的構(gòu)建??

圖２－３提取的水稻基因組ＤＮＡ??

圖２－６啟動子克隆菌落ＰＣＲ鑒定??

【參考文獻】：
期刊論文
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碩士論文
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[2]定向誘導(dǎo)Dicer酶切割目標(biāo)雙鏈RNA方法的研究[D]. 許文.中山大學(xué) 2016
[3]水稻抗褐飛虱基因的定位和分子標(biāo)記輔助選擇育種利用[D]. 康海燕.南京農(nóng)業(yè)大學(xué) 2013
[4]褐飛虱對常用殺蟲劑的抗性監(jiān)測[D]. 王鵬.南京農(nóng)業(yè)大學(xué) 2013
[5]利用RNAi技術(shù)控制褐飛虱的研究[D]. 張鳳珍.浙江大學(xué) 2013



本文編號：3083829