基因的定點修飾技術(shù)是研究基因功能的重要手段之一,而基因定點修飾技術(shù)的發(fā)展也經(jīng)歷了從早期的基因打靶到三代人工核酸內(nèi)切酶的過程。第三代人工核酸內(nèi)切酶 Clustered Regularly Interspaced Short Palindromic Repeats（CRISPR）/CRISPR-associated（Cas）因其操作簡便、成本低廉、作用高效,被廣泛應(yīng)用于生物學研究中的各個領(lǐng)域。目前,CRISPR/Cas9技術(shù)多被用于基因編碼領(lǐng)域,但是在ncRNA尤其是miRNA中的應(yīng)用相對較少見報道。miRNA是一類長約22nt,具有廣泛生物活性的ncRNA。成熟的miRNA主要通過與靶基因3’UTR上的靶點進行堿基互補配對實現(xiàn)對靶基因的表達調(diào)控。miRNA-125a是一種在進化上高度保守的miRNA,它的兩個成熟態(tài)5p及3p均有生物學功能,我們前期研究顯示miRNA-125a參與胚胎植入和復(fù)發(fā)性流產(chǎn)的發(fā)生。本研究以miRNA-125a為切入點,利用CRISPR/Cas9技術(shù)構(gòu)建針對miRNA-125a的定點編輯細胞系及小鼠模型,并從體內(nèi)和體外分別探究miRNA-125a的功能,主要分為以... 

【文章來源】：北京協(xié)和醫(yī)學院北京市 211工程院校 985工程院校

【文章頁數(shù)】：103 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

硯改造后的pX45容載體

一不同細胞系m1RNA一125a表達量(叮，<0.05，月=3)

一人pre.miRNA口125a序列及sgRNA位置


本文編號：3080353