目的肺炎克雷伯菌（Klebsiella pneumoniae,K.pneumoniae）是革蘭陰性菌中一種常見且非常重要的致病菌,可以引起多種疾病,常見的有肺炎、尿路感染、血液感染、化膿性肝膿腫以及細(xì)菌性腦膜炎。cAMP受體蛋白（cAMP receptor protein,CRP）是細(xì)菌的一種重要轉(zhuǎn)錄調(diào)控子。肺炎克雷伯菌中KP1₁373基因功能目前尚不清楚。在KP1₁373基因的啟動(dòng)子區(qū)中,發(fā)現(xiàn)了CRP蛋白可能的結(jié)合序列,提示了CRP蛋白對靶基因可能存在的轉(zhuǎn)錄調(diào)控影響。本文擬用實(shí)驗(yàn)探究并驗(yàn)證CRP蛋白對KP1₁373基因可能存在的調(diào)控作用。方法先用凝膠阻滯實(shí)驗(yàn)（EMSA）判斷CRP蛋白能否直接特異性結(jié)合在KP1₁373基因上游的啟動(dòng)子區(qū)。擴(kuò)增KP1₁373基因啟動(dòng)子區(qū)域的DNA片段,與純化的CRP蛋白進(jìn)行體外孵育,觀察有無阻滯帶的出現(xiàn)。然后,用LacZ報(bào)告基因融合實(shí)驗(yàn)判斷CRP蛋白對靶基因的具體調(diào)控關(guān)系。擴(kuò)增KP1₁373基因啟動(dòng)子序列,將DNA片段導(dǎo)入p... 

【文章來源】：重慶醫(yī)科大學(xué)重慶市

【文章頁數(shù)】：48 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

EMSA原理圖

LacZ報(bào)告基因融合實(shí)驗(yàn)原理圖

EMSA實(shí)驗(yàn)結(jié)果

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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碩士論文
[1]高毒力肺炎克雷伯菌生物標(biāo)志的鑒定研究及基因組學(xué)分析[D]. 唐敏.西南醫(yī)科大學(xué) 2019



本文編號(hào)：3078729