病原體在感染昆蟲的過程中會激活昆蟲的免疫系統(tǒng)。Cry毒素是一類能在靶標昆蟲中腸形成孔道的殺蟲蛋白,目前昆蟲對Cry毒素的免疫應答機制仍不清晰。本研究從小菜蛾中腸cDNA中克隆得到小菜蛾參與免疫應答的關鍵基因（Plutella xylostella poly（U）-specific endoribonuclease homolog）。該免疫基因在小菜蛾感染病原體時表達上調,通過免疫反應保護小菜蛾。序列分析結果表明該基因開放閱讀框全長1053 bp,編碼350個氨基酸,我們將其命名為PxEH。PxEH和NCBI上Plutella xylostella poly（U）-specnc endoribonuclease（XM₀11 563907.1）的同源性為97%。將克隆得到的PxEH免疫基因構建原核表達載體pGEX-4T-1/PxEH,在B121表達菌中表達得到以與GST標簽形成融合蛋白的目的蛋白,分子量大小為66 kDa,且表達量相對較高,經(jīng)western blot實驗驗證為帶有GST標簽的目的蛋白。實驗并優(yōu)化了誘導PxEH免疫基因表達蛋白的條件,在25℃,IPTG終... 

【文章來源】：廈門大學福建省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：88 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

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圖４撖光共聚焦系統(tǒng)??Ｆｉｇ．?４?ｔｈｅ?ｓｙｓｔｅｍ?ｏｆ?ｃｏｎｆｏｃａｌ??

圖５重疊ＰＣＲ原理圖??Ｆｉｇ．?５?Ｓｃｈｅｍａｔｉｃ?ｄｉａｇｒａｍ?ｏｆ?Ｏｖｅｒｌａｐｐｉｎｇ?ＰＣＲ??

【參考文獻】：
期刊論文
[1]小菜蛾生物學特性及防治研究進展[J]. 常曉麗,袁永達,張?zhí)熹?滕海媛,王冬生.  上海農(nóng)業(yè)學報. 2017(05)
[2]甲氨基阿維菌素苯甲酸鹽藥液濃度、霧滴密度及施藥液量對小菜蛾防治效果的影響[J]. 曹源,鄧維,李永平,李學鋒,鄭明奇,袁會珠.  農(nóng)藥學學報. 2014(01)
[3]一株小菜蛾高致病性球孢白僵菌菌株的篩選及其可濕性粉劑的田間藥效試驗[J]. 徐延平,仇飛,黃勃,王濱,李增智.  中國生物防治學報. 2013(03)
[4]對小菜蛾協(xié)同增效的Cry1和Cry9類蛋白組合的篩選[J]. 蔡吉林,束長龍,宋福平,黃勃,張杰.  植物保護. 2013(01)
[5]蘇北沿海地區(qū)小菜蛾發(fā)生規(guī)律及防治策略探討[J]. 陳善國,劉海南,孫登娥,袁士榮,吳樹靜.  江西農(nóng)業(yè)學報. 2012(08)
[6]小菜蛾高致病力綠僵菌的篩選、鑒定及培養(yǎng)特性研究[J]. 張建偉,王中康,申劍飛,殷幼平.  中國生物防治學報. 2012(01)
[7]球孢白僵菌生物學特性與其對小菜蛾致病力相關性分析[J]. 雷妍圓,呂利華,何余容,陳冬虹.  中國生物防治. 2010(02)
[8]RNAi技術在昆蟲功能基因研究中的應用進展[J]. 楊中俠,文禮章,吳青君,王少麗,徐寶云,張友軍.  昆蟲學報. 2008(10)
[9]玫煙色擬青霉對小菜蛾致病力的時間-劑量-死亡率模型模擬[J]. 呂利華,何余容,武亞敬,馮夏,陳煥瑜.  昆蟲學報. 2007(06)
[10]親和層析技術在生物科學中的應用及發(fā)展[J]. 李楊,韓梅.  生命科學研究. 2006(01)

博士論文
[1]褐飛虱內(nèi)參基因的篩選及精氨酸激酶基因的分子特性研究[D]. 袁淼.華中農(nóng)業(yè)大學 2014
[2]RNA基因干擾技術抑制草魚呼腸孤病毒復制的研究[D]. 馬杰.華中農(nóng)業(yè)大學 2013
[3]大豆黃酮合成酶基因的克隆與RNA干擾調控異黃酮含量的研究[D]. 姜伊娜.上海交通大學 2013

碩士論文
[1]棉鈴蟲V-ATP酶A亞基在Cry1Ac殺蟲及抗性演化中的作用研究[D]. 鐘豐.中國農(nóng)業(yè)科學院 2015



本文編號：3075680