目的探究軟骨細(xì)胞-海藻酸鈉凝膠構(gòu)建體中軟骨細(xì)胞的轉(zhuǎn)錄組水平的變化。方法將軟骨細(xì)胞分別封裝在0.8%和4%海藻酸鈉溶液制成的水凝膠中,制成細(xì)胞-凝膠構(gòu)建體并培養(yǎng)一段時(shí)間。對(duì)兩種凝膠材料的交聯(lián)密度、溶脹率、模量等物理性能進(jìn)行表征,然后通過(guò)RNA測(cè)序技術(shù)從這兩種培養(yǎng)條件中檢測(cè)到軟骨細(xì)胞轉(zhuǎn)錄組的差異并進(jìn)行比對(duì)和分析。最后,通過(guò)q PCR和免疫組織化學(xué)對(duì)測(cè)序結(jié)果進(jìn)行驗(yàn)證。結(jié)果我們發(fā)現(xiàn),與4%構(gòu)建體相比,0.8%構(gòu)建體具有較低的交聯(lián)密度、較高的溶脹率以及較高的營(yíng)養(yǎng)交換滲透性。通過(guò)RNA測(cè)序從這兩種培養(yǎng)條件中檢測(cè)到軟骨細(xì)胞轉(zhuǎn)錄組的差異,發(fā)現(xiàn)差異表達(dá)基因（DEGs）反映在細(xì)胞外基質(zhì)（ECM）分泌、細(xì)胞周期、細(xì)胞增殖、軟骨發(fā)育等方面。值得注意的是,與軟骨ECM和細(xì)胞增殖相關(guān)的DEGs的表達(dá)在0.8%構(gòu)建體中上調(diào),而參與細(xì)胞周期和基質(zhì)降解的DEGs的表達(dá)在4%構(gòu)建體中上調(diào);在0.8%構(gòu)建體中,軟骨細(xì)胞肥大標(biāo)志物的基因表達(dá)上調(diào),而4%構(gòu)建體似乎有利于軟骨細(xì)胞表型的長(zhǎng)期維持。此外,軟骨細(xì)胞的轉(zhuǎn)錄組水平也受到構(gòu)建體培養(yǎng)時(shí)間長(zhǎng)短的顯著影響。這些結(jié)果也通過(guò)了q PCR和免疫組織化學(xué)驗(yàn)證。結(jié)論在軟骨組織工程中,不同密... 

【文章來(lái)源】：青島大學(xué)山東省

【文章頁(yè)數(shù)】：50 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

圖2.1兩種凝膠構(gòu)建體（0.8%，4%）的結(jié)構(gòu)示意圖

青島大學(xué)碩士學(xué)位論文10第三章結(jié)果3.1水凝膠的物理性質(zhì)對(duì)兩種水凝膠的物理性質(zhì)（包括溶脹能力、交聯(lián)密度、凝膠內(nèi)部大分子的擴(kuò)散能力、凝膠內(nèi)部大分子的釋放能力、彈性模量以及封裝的細(xì)胞在凝膠內(nèi)部的分布）進(jìn)行檢測(cè)，檢測(cè)結(jié)果如圖3.1所示。相對(duì)于0.8％凝膠，4％凝膠的溶脹率從285.8±18.39降至123.2±7.317（圖3.1A），同時(shí)，交聯(lián)密度從0.3478±0.03515增至1.421±0.1794mol/m3（圖3.1B）。0.8％凝膠和4％凝膠的有效擴(kuò)散系數(shù)（De）分別為9.062±0.125×10-7cm2/s和4.328±0.3608×10-7cm2/s（圖3.1C）。圖3.1D顯示了兩種凝膠中BSA累計(jì)釋放率隨時(shí)間變化的曲線。當(dāng)累積釋放低于60％時(shí)，繪制的BSA釋放值與時(shí)間平方根的關(guān)系圖如圖3.1E所示。良好的線性相關(guān)性（R2>0.97）表明BSA的釋放受菲克擴(kuò)散控制。0.8％凝膠和4％凝膠的壓縮模量分別為2.355kPa和23.450kPa（圖3.1F）。如圖3.1G所示，包裹的軟骨細(xì)胞均勻分布于0.8%和4%的凝膠中。圖3.1兩種水凝膠（0.8%，4%）的物理性質(zhì)

青島大學(xué)碩士學(xué)位論文12黏著斑激酶相關(guān)途徑，等等。圖3.2凝膠構(gòu)建體調(diào)控下第7天的基因表達(dá)注：(A)兩種構(gòu)建體中表示的差異表達(dá)數(shù)。(B)在第7天兩種構(gòu)建體DEGs的火山圖。(C)在第7天兩種構(gòu)建體DEGs的熱圖。(D)第7天0.8%構(gòu)建體的上調(diào)基因的GO富集分析。(E)第7天0.8%構(gòu)建體的上調(diào)基因的KEGG通路分析。


本文編號(hào)：3063384