bZIP轉(zhuǎn)錄因子（basic-region leucine zipper）一種堿性亮氨酸拉鏈轉(zhuǎn)錄因子,bZIP家族屬于最大的轉(zhuǎn)錄家族之一,其具有多種生物學(xué)功能,包括調(diào)控非生物脅迫反應(yīng)。為鑒定白樺（Betula platyphylla Suk）抗非生物脅迫的bZIP基因,本研究利用生物信息學(xué)分析、表達(dá)模式分析及轉(zhuǎn)基因功能分析等方法分析BpbZIP1的耐鹽性,獲得如下結(jié)果:進(jìn)行抗性相關(guān)基因系統(tǒng)進(jìn)化分析,結(jié)果顯示BpbZIP1與擬南芥抗性相關(guān)基因蛋白聚為一組。利用實(shí)時(shí)定量熒光法分析BpbZIP1基因和抗性相關(guān)的SOD、POD基因鹽、旱脅迫梯度時(shí)間下的表達(dá)量,結(jié)果顯示BpbZIP1基因與SOD、POD基因表達(dá)模式相似,受NaC1處理的誘導(dǎo),在甘露醇處理下,表達(dá)變化不明顯。利用基因槍介導(dǎo)的瞬時(shí)轉(zhuǎn)化法將BpbZIP1-PBI121-GFP融合表達(dá)載體轉(zhuǎn)化洋蔥表皮細(xì)胞進(jìn)行亞細(xì)胞定位,結(jié)果表明BpbZIP1基因定位在細(xì)胞核上。將BpbZIP1基因過(guò)表達(dá)載體轉(zhuǎn)入擬南芥中,鹽、旱脅迫處理轉(zhuǎn)基因材料后進(jìn)行組織化學(xué)染色（NBT、DAB、Evans Blue）。轉(zhuǎn)基因株系在NaCl脅迫條件下,清除活性氧的能力較... 

【文章來(lái)源】：東北林業(yè)大學(xué)黑龍江省 211工程院校 教育部直屬院校

【文章頁(yè)數(shù)】：68 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

圖２－１野生型白樺ＲＮＡ檢測(cè)電泳圖??

ｖ．２．０網(wǎng)站??（ｈｔｔｐ：／／ｗｗｗ．ｃｂｓ．ｄｔｕ．ｄｋ／ｓｅｒｖｉｃｅｓ／ＴＭＨＭＭ－２．０）對(duì)?基因跨膜域進(jìn)行預(yù)測(cè)。??２．３結(jié)果分析??２．３．１白樺柳基因的鑒定與克隆??閱讀大量抗性相關(guān)ｂＺＩＰ家族文獻(xiàn)后得到擬南芥中抗性相關(guān)基因，在白樺數(shù)據(jù)庫(kù)中進(jìn)??行同源比對(duì)，得到相似度極高的白樺５Ｐ０２０Ｍ３．２基因。通過(guò)ＮＣＢＩ網(wǎng)站中ｂｌａｓｔＸ程序?qū)??該基因序列進(jìn)行比對(duì)分析，確定了該基因含有完整的開(kāi)放讀碼框（０ＲＦ），功能注釋為??６Ｚ／尸基因。利用ＲＴ－ＰＣＲ對(duì)其進(jìn)行克�。▓D２－２），測(cè)序成功，命名為辦６Ｚ／Ｐ７。??￣ｌＳｓ??２８ｓ??圖２－１野生型白樺ＲＮＡ檢測(cè)電泳圖??２０００ｂｐ??１２５９ｂｐ??ｌＯＯＯｂｐ??５００ｂｐ??２５０ｂｐ??２００ｂ?ｐ??圖２－２?ＰＣＲ擴(kuò)增５沖Ｚ／Ｐｉ基因檢測(cè)電泳圖??（ｍａｋｅｒ：?ＤＮＡ?Ｍａｒｋｅｒ?ＤＬ２０００?）??－１２－??

?２白樺母基因克隆與生物信息學(xué)分析???２．３．２白樺聊２７Ｐ７基因的生物信息學(xué)分析??１．白樺辦６ＺＪＰｉ基因序列分析??在ＮＣＢＩ網(wǎng)站數(shù)據(jù)庫(kù)中，其保守區(qū)進(jìn)行預(yù)測(cè)（圖２－３）并繪制出白樺辦６Ｚ／Ｗ基因??的開(kāi)放閱讀框，利用軟件ＢｉｏＥｄｉｔ翻譯出蛋白序列。并對(duì)其保守區(qū)進(jìn)行預(yù)測(cè)，結(jié)果顯示其??含有ｂＺＩＰ蛋白保守區(qū)（圖２－３）．??辦６Ｚ／Ｗ基因閱讀框?yàn)椋�，起始在ＡＴＧ，終止在ＴＧＡ，總共編碼４８５個(gè)氨基酸殘基，??其氨基酸序列如下：??ＭＮＬＫＮＦＧＴＤＰＰＧＤＧＮＧＲＰＰＧＮＦＰＬＩＲＱＳＳＩＹＳＬＴＦＤＥＬＱＮＴＭＧＧＳＩＧＫＤＦＧＳＭＮＭＤＥＬ??ＬＫＭＷＳＡＥＤＡＱＳＩＭＡＫＰＳＷＴＴＧＰＥＧＴＶＰＰＧＧＹＬＱＲＱＧＳＬＴＬＰＲＴＬＳＱＫＴＶＤＥＶＷＲＤＩＳ??ＱＤＧＡＧＮＧＳＳＳＬＰＱＲＱＨＴＬＧＥＭＴＬＥＥＦＬＦＲＡＧＶＶＲＥＤＴＱＬＤＡＫＰＡＧＧＳＡＳＴＧＧＦＬＧＮＴ??ＧＬＧＩＧＦＱＱＴＧＧＧＴＧＬＭＧＮＲＩＡＥＳＮＮＱＦＳＩＱＳＳＮＬＰＬＮＶＮＧＶＲＳＤＱＴＱＬＳＲＰＱＱＰＱＩＦＰＫ??ＰＶＴＭＡＹＧＴＨＱＭＰＱＬＧＳＰＧＭＲＧＧＩＶＧＩＧＤＱＧＬＳＳＧＬＩＱＳＡＡＬＱＧＧＧＭＧＭＶＧＬＧＡＧＡＧ??ＡＧＧＶＳＶＧＴＧＳＰＡＮＱＬＳＳＤＧＬＧＫＳＮＧＤＭＳＳＶＳＰＶＰＹＡＦＮＧＧＬＲＧＲＲＳＧＧＰＶＥＫＶＶＥＲＲ??ＱＲＲＭＩＫＮＲＥＳＡＡＲＳＲＡＲＫＱＡＹＴＭＥＬＥＡＥＶＡＫＬＫＥＤＮＥＥＬＱＫＫＱＥＥＩＭＥＭＱＫＮＱＶＬＥＩ??ＭＮＬＱＲＧＶＫＫＱＣＬＲＫＴＬＳＧＰＷ＊??１?５５＊?Ｃ６＃?ｒｔ＜？?Ｈ７２??ｃｏｌｌ??Ｗｉｆｉ?ｂｉｎｄｉｎｇ??Ｓｐｅｃｉｆｉｃ?ｈｉｔｓ

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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博士論文
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本文編號(hào)：3061217