為探索StAR基因在中華鱉性腺發(fā)育過程中的作用,利用RACE技術克隆獲得中華鱉StAR基因全長cDNA,qRT-PCR分析其在不同組織及胚胎不同發(fā)育時期的表達情況,并制備多克隆抗體,采用Western blot檢測StAR在不同組織中的表達情況,通過免疫組化進行定位,同時檢測來曲唑處理雄性中華鱉后StAR在精巢中的表達情況。結果顯示,該基因全長2 377 bp,開放閱讀框903 bp,編碼300個氨基酸。氨基酸序列比對及系統(tǒng)進化分析表明,中華鱉StAR與龜類親緣關系最近。實時熒光定量PCR結果表明,StAR基因在精巢中表達量最高,顯著高于其他組織;StAR基因于中華鱉胚胎發(fā)育16期已有表達,早于性腺分化啟動時期;來曲唑處理的中華鱉精巢中,StAR表達量先上調后回降。本研究利用原核表達系統(tǒng)構建中華鱉StAR基因原核重組表達載體,經蛋白純化后免疫小鼠,獲得中華鱉StAR多克隆抗體。Western blot檢測結果顯示StAR在不同組織中的表達量與熒光定量結果一致。免疫組化結果顯示,StAR蛋白在卵巢間質細胞、精巢間質細胞,精原細胞及胞質中表達。綜上所述,StAR基因可能是中華鱉性腺分化關鍵... 

【文章來源】：水產學報. 2020,44(11)北大核心

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【參考文獻】：
期刊論文
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碩士論文
[1]StAR在尼羅羅非魚性腺分化和配子發(fā)生過程中的功能研究[D]. 蔡靜.西南大學 2018
[2]來曲唑對貴州香豬睪丸細胞作用的研究[D]. 陳釗.貴州大學 2017



本文編號：3058020