為探索StAR基因在中華鱉性腺發(fā)育過(guò)程中的作用,利用RACE技術(shù)克隆獲得中華鱉StAR基因全長(zhǎng)cDNA,qRT-PCR分析其在不同組織及胚胎不同發(fā)育時(shí)期的表達(dá)情況,并制備多克隆抗體,采用Western blot檢測(cè)StAR在不同組織中的表達(dá)情況,通過(guò)免疫組化進(jìn)行定位,同時(shí)檢測(cè)來(lái)曲唑處理雄性中華鱉后StAR在精巢中的表達(dá)情況。結(jié)果顯示,該基因全長(zhǎng)2 377 bp,開(kāi)放閱讀框903 bp,編碼300個(gè)氨基酸。氨基酸序列比對(duì)及系統(tǒng)進(jìn)化分析表明,中華鱉StAR與龜類(lèi)親緣關(guān)系最近。實(shí)時(shí)熒光定量PCR結(jié)果表明,StAR基因在精巢中表達(dá)量最高,顯著高于其他組織;StAR基因于中華鱉胚胎發(fā)育16期已有表達(dá),早于性腺分化啟動(dòng)時(shí)期;來(lái)曲唑處理的中華鱉精巢中,StAR表達(dá)量先上調(diào)后回降。本研究利用原核表達(dá)系統(tǒng)構(gòu)建中華鱉StAR基因原核重組表達(dá)載體,經(jīng)蛋白純化后免疫小鼠,獲得中華鱉StAR多克隆抗體。Western blot檢測(cè)結(jié)果顯示StAR在不同組織中的表達(dá)量與熒光定量結(jié)果一致。免疫組化結(jié)果顯示,StAR蛋白在卵巢間質(zhì)細(xì)胞、精巢間質(zhì)細(xì)胞,精原細(xì)胞及胞質(zhì)中表達(dá)。綜上所述,StAR基因可能是中華鱉性腺分化關(guān)鍵... 

【文章來(lái)源】：水產(chǎn)學(xué)報(bào). 2020,44(11)北大核心

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【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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[2]飼料蛋白質(zhì)和脂肪水平對(duì)中華鱉生長(zhǎng)性能、肌肉質(zhì)構(gòu)指標(biāo)及肝臟相關(guān)基因表達(dá)的影響[J]. 吳凡,陸星,文華,田娟,劉偉,蔣明,楊長(zhǎng)庚,喻麗娟,梁宏偉.  淡水漁業(yè). 2018(01)
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碩士論文
[1]StAR在尼羅羅非魚(yú)性腺分化和配子發(fā)生過(guò)程中的功能研究[D]. 蔡靜.西南大學(xué) 2018
[2]來(lái)曲唑?qū)F州香豬睪丸細(xì)胞作用的研究[D]. 陳釗.貴州大學(xué) 2017



本文編號(hào)：3058020