目的:探討mi R-382-3p對骨關節(jié)炎軟骨細胞增殖和凋亡的影響及其機制。方法:用100 ng/mL的脂多糖（LPS）處理軟骨細胞,記為LPS組,以正常培養(yǎng)的軟骨細胞作為正常對照（NC）組。mi R-NC、mi R-382-3p、anti-miR-NC、anti-miR-382-3p轉(zhuǎn)染至軟骨細胞中,記為mi R-NC組、mi R-382-3p組、anti-miR-NC組、anti-miR-382-3p組;將mi R-NC、mi R-382-3p、si-NC、si-RASA1轉(zhuǎn)染至軟骨細胞后再用100 ng/mL的LPS處理,記為mi R-NC+LPS組、mi R-382-3p+LPS組、si-NC+LPS組、si-RASA1+LPS組;將mi R-382-3p分別與pcDNA-NC、pcDNA-RASA1共轉(zhuǎn)染至軟骨細胞后再用100 ng/mL的LPS處理,記為mi R-382-3p+pcDNA-NC+LPS組、mi R-382-3p+pcDNA-RASA1+LPS組。實時熒光定量PCR（RT-qPCR）檢測mi R-382-3p和Ras p21蛋白活化因子1（RASA1）m RN... 

【文章來源】：現(xiàn)代生物醫(yī)學進展. 2020,20(13)

【文章頁數(shù)】：7 頁

【文章目錄】：
前言
1 材料與方法
    1.1 材料
    1.2 方法
        1.2.1 軟骨細胞的分離培養(yǎng)
        1.2.2 細胞處理與分組
        1.2.3 實時熒光定量PCR（Real-time quantitative PCR,RT-qPCR）檢測mi R-382-3p和RASA1 m RNA表達水平
        1.2.4 蛋白質(zhì)印跡（Western blot）法檢測RASA1、CyclinD1、Cleaved-caspase-3蛋白表達
        1.2.5 MTT檢測細胞存活率
        1.2.6流式細胞術檢測細胞凋亡
        1.2.7 熒光素酶報告實驗檢測mi R-382-3p和RASA1的靶向關系
        1.2.8 pulldown實驗
        1.2.9 統(tǒng)計學分析
2 結果
    2.1 在LPS誘導的軟骨細胞，mi R-382-3p和RASA1表達情況
    2.2 過表達mi R-382-3p對LPS處理的軟骨細胞增殖和凋亡的影響
    2.3 敲減RASA1對LPS處理的軟骨細胞增殖和凋亡的影響
    2.4 mi R-382-3p靶向RASA1
    2.5 高表達RASA1可以部分逆轉(zhuǎn)mi R-382-3p高表達對LPS處理的軟骨細胞增殖和凋亡的影響
3 討論


【參考文獻】：
期刊論文
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博士論文
[1]軟骨細胞代謝影響骨關節(jié)炎的作用和機制研究[D]. 俞冬升.浙江大學 2017

碩士論文
[1]miR-223靶向RASA1影響結直腸癌的發(fā)生發(fā)展的研究[D]. 馬玉濤.南京大學 2013



本文編號：3047927