稻瘟病是水稻最嚴(yán)重的病害之一,利用宿主抗性進(jìn)行品種的抗病遺傳改良為稻瘟病提供了經(jīng)濟(jì)有效和環(huán)境友好的解決辦法。但稻瘟病病菌的群體變異頻繁,導(dǎo)致水稻單個(gè)抗性基因品種的抗病效果在短時(shí)間內(nèi)減弱甚至喪失。因此,需要進(jìn)一步的研究稻瘟病抗性機(jī)制,開(kāi)發(fā)新的廣譜抗性基因,為水稻抗性育種提供新的資源。本研究中的稻瘟病抗性基因Pi63具有良好的田間抗性,前期實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明Pi63的表達(dá)量在抗性品種中很高,且抗性與其表達(dá)量成正相關(guān),推測(cè)這一特性與啟動(dòng)子的調(diào)節(jié)和表達(dá)模式密切相關(guān)。前期研究利用生物信息學(xué)軟件分析了Pi63啟動(dòng)子區(qū)域的順式作用元件,根據(jù)預(yù)測(cè)的順式作用元件的分布位置不同,分段構(gòu)建了4個(gè)啟動(dòng)子缺失片段。本研究并將上述構(gòu)建體分別連接GUS基因和Pi63全長(zhǎng)基因進(jìn)行遺傳轉(zhuǎn)化分析其啟動(dòng)子的表達(dá)特性及對(duì)抗病的影響。此外,Pi63位于水稻4號(hào)染色體31 Mb區(qū)域內(nèi),是這個(gè)區(qū)域內(nèi)被克隆的第一個(gè)基因。為研究Pi63的進(jìn)化機(jī)制,發(fā)掘抗性資源,本研究在收集的栽培稻和野生稻品種里克隆了Pi63的同源基因,并對(duì)同源基因的轉(zhuǎn)基因植株進(jìn)行了抗病分析。本研究取得的結(jié)果如下:⑴將上述缺失體連接Pi63全長(zhǎng)基因轉(zhuǎn)入植物雙元表達(dá)載體pMD... 

【文章來(lái)源】：中南民族大學(xué)湖北省

【文章頁(yè)數(shù)】：69 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

不同缺失體的目的片段擴(kuò)增電泳檢測(cè)Fig2.1Theelectrophoresisdetectionofdifferentfragmentamplification

c d圖 2.2 啟動(dòng)子缺失載體陽(yáng)性鑒定電泳檢測(cè)Fig 2.2 The clony PCR of vector construction DL；a: Pi63 5'u-p0；b:Pi63 5'u-p1；c:Pi63 5'u-p2；d:P轉(zhuǎn)化達(dá)載體以日本晴為受體材料進(jìn)行農(nóng)桿菌介導(dǎo)的共培養(yǎng)，篩選，分化，生根，煉苗 6 個(gè)階段得到

圖 2.3 水稻遺傳轉(zhuǎn)化部分過(guò)程示意圖.3 Schematic diagram of rice genetic transformation p代植株的陽(yáng)性鑒定Z-P0 共計(jì)轉(zhuǎn)化 60 瓶愈傷，得到 pCAMBIA1391Z-P1 共計(jì)轉(zhuǎn)化 40 瓶愈傷，得到 pCAM鑒定并未得到的 pCAMBIA1391Z-P2 轉(zhuǎn)基因；pCAMBIA1391Z-P3 共計(jì)轉(zhuǎn)化 50 瓶愈傷 轉(zhuǎn)基因苗 14 棵（圖 2.4）。

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]水稻稻瘟病抗病基因Pi63順式作用元件的載體構(gòu)建[J]. 梁華兵,王曉婉,胡曉嵐,趙峰,張成國(guó),韓淑慧,姚富城,徐鑫.  中國(guó)農(nóng)學(xué)通報(bào). 2015(30)
[2]實(shí)時(shí)定量PCR鑒定轉(zhuǎn)基因作物純合體[J]. 張麗,劉麗麗,梁曉聲,王海英.  中南民族大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版). 2015(01)
[3]水稻稻瘟病抗性基因研究進(jìn)展[J]. 李婷,王建龍.  作物研究. 2012(06)
[4]水稻稻瘟病及其綜合防治措施[J]. 張俊奇.  安徽農(nóng)學(xué)通報(bào)(下半月刊). 2012(08)

碩士論文
[1]SA和MeJA雙重誘導(dǎo)的GT基因啟動(dòng)子5′-缺失體構(gòu)建及其功能研究[D]. 李靜.中南民族大學(xué) 2007



本文編號(hào)：3047872